国家自然科学基金(30972928) 作品数:17 被引量:85 H指数:7 相关作者: 张宏伟 刘传江 秦涛 王玉柱 付强 更多>> 相关机构: 郑州大学 河南省人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
急性胰腺炎患者血清长链非编码RNA-MEG3表达及意义 被引量:10 2018年 目的探讨长链非编码RNA-MEG3(long non-coding RNA-MEG3,lncR-MEG3)在急性胰腺炎患者血清中的表达及临床意义。方法急性胰腺炎患者63例,其中重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)21例(SAP组),轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)42例(MAP组),采用实时荧光定量PCR法检测2组血清lncR-MEG3及C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、D-二聚体(D-Dimer,DD)表达水平,ROC曲线分析血清lncR-MEG3、CRP和DD单独及联合检测诊断SAP的效能。结果 SAP组血清lncR-MEG3水平[3.46(2.53,5.64)]低于MAP组[7.12(6.54,7.93)](P<0.05),血清CRP、DD水平[119.7(113.3,129.3)、2.95(2.39,3.75)mg/L]高于MAP组[63.1(39.2,70.3)、1.17(0.84,1.53)mg/L](P<0.05);血清lncR-MEG3、CRP、DD诊断SAP的AUC分别为0.797(95%CI:0.673~0.921,P<0.05)、0.814(95%CI:0.707~0.921,P<0.05)、0.846(95%CI:0.734~0.958,P<0.05),最佳截断值分别为6.34、74.2mg/L、2.34mg/L,诊断灵敏度分别为86%、86%、81%,特异度分别为67%、81%、86%;血清lncR-MEG3、CRP与DD联合检测诊断SAP的AUC为0.908(95%CI:0.838~0.979,P<0.05),灵敏度为91%,特异度为86%;血清lncR-MEG3、CRP与DD联合检测诊断SAP的AUC大于单一指标检测(P<0.05),灵敏度、特异度与单一指标检测比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清lncR-MEG3表达及CRP、DD水平可反映急性胰腺炎患者病情严重程度,lncR-MEG3可能是潜在的区分MAP和SAP的生物学标志物。 张旭 付强 秦涛 刘传江 王玉柱 张宏伟关键词:急性胰腺炎 C-反应蛋白 骨髓间充质干细胞对慢性胰腺炎大鼠血清指标及行为学的影响 被引量:1 2013年 目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对慢性胰腺炎大鼠血清指标及行为学的影响.方法 SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、假治疗组和治疗组,检测大鼠血清指标表达水平,观察大鼠饮食体质量及活动的变化.结果 输入BMSCs后,治疗组的血清淀粉酶、脂肪酶、透明质酸酶表达水平明显降低(P<0.05).治疗组的进食量与模型组和假治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05),但体质量增加[(24±10)g]比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BMSCs能够降低慢性胰腺炎的血清淀粉酶、脂肪酶、透明质酸酶的表达水平,改善慢性胰腺炎个体的生活质量. 秦涛 刘传江 付强 胡明星 唐强 王玉柱 张宏伟关键词:骨髓间充质干细胞 慢性胰腺炎 饮食 体质量 长链非编码RNARGD1566401在大鼠急性胰腺炎中对外分泌细胞凋亡的作用 被引量:5 2018年 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)-RGD1566401(lncR-RGD1566401)在大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)中表达及对AR42J凋亡的影响。方法分别用携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒(Lenti-lncRNA)和特异性lncR-RGD1566401抑制剂(lncRNA Smart Silencer)转染AR42J细胞株24 h,转染空病毒(Lenti-NC)和特异性lncR-RGD1566401阴性抑制剂作为对照;以100 nmol/L雨蛙肽(Caerulin)体外诱导正常培养AR42J及转染后AR42J的凋亡,药物诱导24 h后运用流式细胞技术(FCM)检测各组AR42J细胞凋亡率,使用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测各组lncR-RGD1566401的表达,采用Western blot检测各组凋亡蛋白活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和p53表达量变化。结果雨蛙肽体外诱导AR42J凋亡的凋亡率[(19.34±0.54)%]较对照组[(7.23±0.33)%]明显升高,lncR-RGD1566401表达量较对照组升高(5.43±0.31)倍,活性Caspase-3和p53表达量明显升高;转染携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒组lncR-RGD1566401表达量较空病毒组升高(8.24±0.22)倍,差异有统计学意义(P=0.006);AR42J凋亡率[(38.20±0.37)%]较空病毒组[(22.60±0.96)%]明显升高,差异有统计学意义(P=0.016);活性Caspase-3和p53表达量明显升高;应用特异性lncR-RGD1566401抑制剂组较阴性对照组lncR-RGD1566401表达量降低(0.54±0.14)倍,差异有统计学意义(P=0.003),AR42J凋亡率[(13.60±0.33)%]较阴性对照组[(19.60±0.46)%]明显降低,差异有统计学意义(P=0.012),活性Caspase-3和p53表达量明显降低。结论lncR-RGD1566401与大鼠AR42J细胞凋亡相关,上调lncR-RGD1566401的表达能够促进大鼠AR42J细胞凋亡。 张旭 付强 秦涛 刘传江 胡明星 张宏伟关键词:长链非编码RNA 脱噬作用 胰腺腺泡细胞 梗阻性黄疸模型小鼠肝脏自然杀伤细胞水平变化及意义 被引量:2 2016年 目的探讨梗阻性黄疸模型小鼠自然杀伤(natural killer,NK)细胞的水平变化及意义。方法 80只小鼠随机分为手术组和假手术组各40只,手术组行胆总管结扎术制备梗阻性黄疸小鼠模型,假手术组仅游离胆管。分别于第7天和第14天取小鼠血清及肝脏组织,检测2组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素水平;对肝脏组织行组织病理检查HE染色、Masson三染色,采用免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR检测肝脏NK细胞表面特异性标志NK1.1、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和TNF相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)mRNA表达情况。结果手术组第7、14天血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素水平较假手术组明显升高(P<0.01),第14天各指标水平高于第7天(P<0.05);手术组第7天NK1.1、TRAIL、TNF-αmRNA相对表达量(36.04±4.42、1.96±0.29、203.23±20.90)明显高于假手术组(1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00)(P<0.01),第14天(168.69±12.90、4.95±0.43、530.44±57.66)明显高于第7天和假手术组(1.01±0.03、1.01±0.02、0.99±0.02)(P<0.01),假手术组第7天NK1.1、TRAIL、TNF-αmRNA相对表达量与第14天比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论梗阻性黄疸模型小鼠肝脏NK细胞增多,与肝损伤严重程度明显相关,NK细胞可能通过TRAIL依赖途径参与梗阻性黄疸的肝损伤过程。 陈琳 付强 唐强 刘传江 张莉 张宏伟关键词:梗阻性黄疸 胆汁淤积 自然杀伤细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 小鼠 小干扰RNA特异性沉默c-myc基因对人胰腺癌SW1990细胞生物学影响 被引量:7 2015年 目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默c-myc基因的表达对人胰腺癌细胞株SW1990细胞生物学影响.方法 用siRNA沉默胰腺癌SW1990细胞中c-myc基因,用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot技术检测c-myc mRNA及蛋白的表达量;噻唑蓝(MTT)法检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞增殖的影响;膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染流式细胞术检测沉默c-myc基因细胞凋亡水平;Transwell细胞迁移实验检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞迁移能力的影响.结果 靶向c-myc的特异性siRNA可以高效抑制人胰腺癌SW1990细胞c-myc基因表达,在mRNA水平(0.263±0.048)较转染对照质粒组(0.970±0.012)明显降低,c-myc蛋白质表达量及细胞增值率均较转染对照质粒组明显降低;转染后48 h c-myc siRNA组细胞凋亡率为(19.90±2.09)%,明显高于siRNA阴性对照组(4.93±0.25)%和空白对照组(4.40±0.34)%;Transwell实验结果示细胞穿膜数c-myc siRNA组[(34.3±1.2)个]较siRNA-NC组[(68.3±5.8)个]和空白组[(72.3±1.2)个]均明显降低.结论 c-myc siRNA能够显著抑制c-myc基因在人胰腺癌SW1990细胞中的表达,降低细胞的增殖和迁移能力,促进细胞的凋亡. 王玉柱 薛焕洲 付强 秦涛 刘传江 张宏伟关键词:胰腺癌 小干扰RNA C-MYC基因 早期肠内营养治疗高脂血症性急性重症胰腺炎的安全性及疗效观察 被引量:18 2018年 目的探讨高脂血症性急性重症胰腺炎(hyperlipidemia-induced severe acute pancreatitis,HLSAP)患者行早期肠内营养治疗的安全性及疗效。方法 HLSAP患者68例,入院确诊72h后行肠内营养治疗者36例为延迟营养组,入院确诊72h内行肠内营养治疗者32例为早期营养组,比较2组患者腹痛缓解时间、血及尿淀粉酶恢复时间,治疗2周后血清总蛋白、白蛋白和血清C反应蛋白水平变化、急性生理性及慢性健康状况评分Ⅱ(Acute Physiology And Chronic Health Evaluation ScoreⅡ,APACHEⅡ)评分、住院时间、并发症发生率等。结果早期营养组腹痛缓解时间[(3.6±1.2)d]、血淀粉酶恢复时间[(6.0±1.0)d]、尿淀粉酶恢复时间[(17.1±2.2)d]和住院时间[(28.2±2.4)d)]短于延迟营养组[(5.9±1.4)d、(9.5±1.4)d、(19.7±1.8)d、(33.3±3.9)d)](P<0.05),治疗2周后血清总蛋白[(57.7±3.4)g/L]、白蛋白[(25.9±2.4)g/L]高于延迟营养组[(51.9±2.6)g/L、(21.1±2.9)g/L](P<0.05),治疗后APACHEⅡ评分(7.1±2.5)和血清C反应蛋白水平[(40.1±20.7)mg/L]低于延迟营养组[(8.7±3.1)分,(104.3±21.9)mg/L](P<0.05);延迟营养组并发症发生率(66.7%)、病死率(19.4%)与早期营养组(43.8%,15.6%)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HLSAP患者入院确诊72h内进行肠内营养治疗安全、有效,可加速患者康复,缩短住院时间。 贾鹏冲 薛飞 付强 刘传江 张旭 梁运田 张宏伟关键词:早期肠内营养 87例肝门部胆管癌临床分析 被引量:3 2011年 目的:探讨肝门部胆管癌诊断方法、临床特点和外科治疗效果。方法:回顾性分析87例肝门部胆管癌患者的临床资料及随访结果。结果:87例患者行根治性手术26例,姑息性手术17例,引流术14例,单纯开腹探查术12例,经皮肝穿刺胆管引流术13例,逆行胰胆管造影+支架植入术5例。行根治性手术者1,3 a生存率分别为81.0%,52.3%;行姑息性手术者1,3 a分别为生存率45.5%,27.2%;根治手术组生存率高于姑息手术组(P<0.05);年龄、血清总胆红素、Bismuth-Corlette分型、手术方式、淋巴结转移、肿瘤分期对患者预后有影响。结论:多项检查联合应用可提高肝门部胆管癌诊断率;手术切除是治疗肝门部胆管癌的有效方法;掌握个体化治疗原则对改善患者生存质量和提高生存期有重要意义。 唐强 张宏伟 秦涛 张莉 胡明星关键词:肝门部胆管癌 外科手术 微小RNA-92b在大鼠急性胰腺炎中对腺泡细胞凋亡的影响 被引量:7 2013年 目的观察微小RNA-92b(miRNA-92b)在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响。方法以50μg/L肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)建立体外急性水肿型胰腺炎模型,未处理的AR42J作为对照,检测干预12h后培养基中淀粉酶含量,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)检测miRNA-92b在1、3、6h时表达量变化。慢病毒携带miRNA-92b的模拟物(miRNAmimic)及反义寡核苷酸链(miRNAAMO)转染AR42J,转染空病毒组作为对照。建立体外急性胰腺炎模型后,使用FQ-PCR检测miRNA-92b表达量;流式细胞术检测AR42J细胞凋亡率,Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)表达量变化。结果TNF—α.诱导AR42J建立的体外急性胰腺炎模型,miRNA-92b3h表达水平较对照组升高(1.81±0.09)倍(P〈0.05);转染miRNA-92bmimic组miRNA-92b表达量较空病毒组升高(3.71±0.33)倍(P〈0.05),AR42J凋亡率[(41.20±2.42)%]较空病毒组[(23.50±1.85)%]明显升高(P〈0.05),活性Caspase-3表达量明显升高;转染miRNA-92bAMO组较空病毒组miRNA-92b表达量降低(O.58±0.15)倍(P〈0.05),AR42J凋亡率[(13.80±0.40)%]较空病毒组[(23.50±1.85)%]明显降低(P〈0.05),活性Caspase-3表达量明显降低。转染空病毒组较未转染组miRNA-92b表达量、细胞凋亡率、活性Caspase-3表达量差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论急性水肿性胰腺炎发生时miRNA-92b表达量明显升高;上调miRNA-92b的表达,胰腺腺泡细胞的凋亡率增高,下调其表达胰腺腺泡细胞的凋亡率降低。 付强 张宏伟 秦涛 刘传江 胡明星 唐强 王玉柱 薛飞 张莉关键词:急性胰腺炎 脱噬作用 微小RNA 骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎中星状细胞的影响 被引量:2 2011年 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对慢性胰腺炎(CP)中星状细胞(PSC)的活化、增殖和分化的影响。方法将80只SD大鼠随机分为空白组(20只,注射无菌生理盐水)、模型组[20只,尾静脉注射二氯二丁基酯(DBTC)制作大鼠CP模型]、治疗组(20只,于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体GFP-MSCs)、假治疗组(20只,于CP模型制作成功后尾静脉注射等量的无菌生理盐水)。取大鼠胰腺检测PSC活化表达的Desmin、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平,组织中Ⅰ、Ⅲ胶原含量及白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β1表达水平。结果治疗组PSC表达的Desmin、GFAP、α-SMA,组织中Ⅰ(0.135±0.030)ng/g、Ⅲ胶原含量(0.029±0.008)ng/g,TGF-β1(0.020±0.006)μg/L浓度均低于假治疗组(P〈0.05),但IL-10(603.799±89.374)g/ml,TNF-α(507.45±90.13)μg/L均高于假治疗组(P〈0.05),后者与模型组之间的差异无统计学意义(P〉0.05),空白组未见明显异常。结论BMSCs可以通过对细胞因子的调控减少PSC的活化,抑制其增殖及分化,降低细胞外基质的沉积。 刘传江 秦涛 刘健康 唐强 王玉柱 张宏伟关键词:骨髓间充质干细胞 慢性胰腺炎 星状细胞 BAY11-7082对5-氟尿嘧啶的抑制胰腺癌细胞增殖及诱导凋亡的影响 2014年 目的 观察核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082对胰腺癌细胞增殖及对不同浓度5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导胰腺癌细胞凋亡的影响.方法 人胰腺癌细胞SW1990经5μmoL/LNF-κB抑制剂BAY11-7082预处理1h后,Western blot法检测磷酸化NF-κB p65蛋白表达量.加入含有50、200 μg/L、1.0 mg/L 5-Fu的培养基,未经处理组作为对照,噻唑蓝(MTT)法检测各组胰腺癌细胞的抑制率,实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2) mRNA表达量,Western blot法检测抗凋亡基因bcl-2基因蛋白表达量,流式细胞术检测24 h胰腺癌细胞的凋亡率.结果 经BAY11-7082预处理1h后磷酸化NF-κB p65蛋白表达量较对照组明显降低.不同浓度的5-Fu作用下,经BAY11-7082预处理的各组胰腺癌细胞抑制率较对照组均明显升高(P<0.05).bcl-2基因mRNA表达量(0.75±0.09、0.52 ±0.01、0.41±0.06)较对照组(0.92 ±±0.01、0.81±0.05、0.72±0.01)均明显降低(P<0.05),bcl-2蛋白表达量较对照组明显降低,胰腺癌细胞的凋亡率[(16.79±1.23)%、(26.82±1.26)%、(38.20±5.89)%]较对照组[(8.64±0.30)%、(14.02±0.32)%、(24.13±1.60)%]明显增高(P<0.05).结论 BAY11-7082能通过抑制NF-κB的活化,增加5-Fu抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖及诱导胰腺癌SW1990细胞的凋亡. 胡明星 付强 刘传江 王玉柱 秦涛关键词:胰腺癌 5-氟尿嘧啶 凋亡