国家自然科学基金(81272032)
- 作品数：23 被引量：233H指数：10
- 相关作者：肖德明雷鸣于斐崔文岗石岩更多>>
- 相关机构：北京大学深圳医院深圳市第二人民医院广州医学院更多>>
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- 软骨细胞特殊染色技术的比较与应用被引量：10
- 2015年
- 目的探讨多种特殊染色技术在软骨细胞中的染色规律及其应用价值。方法选取出生7 d内的C57BL/6J小鼠12只,处死后取双侧膝关节软骨行软骨细胞原代培养,并行Ⅱ型胶原免疫荧光鉴定,取5代以内的原代细胞制作细胞爬片,细胞爬片制备完成后行HE染色、番红O-固绿双染色、SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色,观察软骨细胞组织形态变化,并对几种染色方式进行比较。结果 HE染色中细胞核呈紫蓝色,细胞质呈粉红色,细胞形态结构清楚;番红O-固绿双染色中细胞核呈粉红色,细胞质呈蓝绿色,细胞形态结果较清晰;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色时,衰老软骨细胞呈绿色,未衰老细胞无着色;Ⅱ型胶原免疫组化染色时,Ⅱ型胶原呈棕黄色,细胞核呈紫蓝色。结论 HE染色和番红O-固绿双染色可以清晰分辨细胞核和细胞质等细胞结构,对单个细胞形态的显示比较清楚;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色可以显示出衰老细胞的数量及衰老的程度;Ⅱ型胶原免疫组化染色可以对Ⅱ型胶原进行定位与定量。
- 于斐曾晖于红燕雷鸣袁昊肖德明
- 关键词：软骨细胞特殊染色原代细胞膝关节
- 胫骨平台骨折手术治疗新进展被引量：71
- 2013年
- 胫骨平台骨折手术治疗一直在追求最坚强的内固定术式、最保护软组织的外固定方式、最微创手术入路并不断取得新进展。基于CT的三柱分型理论有助于更方便、更有效地指导临床治疗,提高胫骨平台骨折治疗效果。切开复位内固定仍然是治疗胫骨平台骨折的主要手段,微创经皮钢板固定、经皮螺钉固定等微创技术并发症少、疗效确切,仍具有明显优势。俯卧位、漂浮体位的后侧、后外侧入路,目前已成为胫骨平台骨折治疗的新选择。外固定支架治疗伴有骨骼、肌肉、皮肤严重缺损的胫骨平台骨折可获得满意的临床疗效。胫骨成形术和球囊扩张胫骨成形术在治疗胫骨平台衰竭骨折和压缩性骨折方面已显示独特优势,可能会成为治疗胫骨平台压缩性骨折的良好选择。关节镜辅助下治疗胫骨平台骨折较传统开放式手术,有更加确切的治疗效果,值得临床推广应用。
- 石岩崔文岗肖德明
- 关键词：胫骨平台骨折关节镜
- 白藜芦醇通过NF-κB信号通路抑制软骨细胞炎症因子的表达被引量：18
- 2016年
- 背景:炎症因子如IL-1β、TNF-α等可通过一系列级联反应引起关节软骨破坏和炎症反应,在骨关节炎软骨病变中尤为重要。白藜芦醇(resveratrol,Res)具有抗炎、抗氧化等作用,研究Res对软骨细胞炎症因子表达的影响可为其预防、治疗骨关节炎提供参考依据。目的:探讨Res对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠软骨细胞核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活化及炎症因子基因表达的调节及其相关机制。方法:体外分离培养小鼠膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫荧光检测进行软骨细胞鉴定。根据加入不同培养物分为3组:LPS组(1μg/ml LPS);Res组(100μmol/L Res+1μg/ml LPS);空白对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组软骨细胞中NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB-α,I-κBα)的表达量,细胞免疫荧光染色观察NF-κB核转位情况,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)测IL-1β、TNF-αm RNA表达量。结果:荧光显微镜下可见软骨细胞核呈蓝色荧光,胞质呈红色荧光。ELISA检测:LPS组的I-κBα表达量低于空白对照组(P<0.05),Res组明显高于LPS组(P<0.01)。细胞免疫荧光染色检测:与空白对照组相比,LPS组中NF-κB发生明显的核转位,而Res组中NF-κB的核转位受到抑制。RT-PCR检测:LPS组中IL-1β和TNF-αm RNA的表达量与空白对照组相比明显上调,而Res组中IL-1β和TNF-αm RNA的表达量与LPS组相比明显下调,均有统计学差异(P<0.05)。结论:Res可通过NF-κB信号通路影响软骨细胞IL-1β、TNF-αm RNA的表达,进而降低软骨细胞炎症反应,延缓关节软骨细胞退变。
- 袁昊曾晖肖德明于斐林健静
- 关键词：骨关节炎软骨细胞炎症
- MicroRNA与骨关节炎被引量：8
- 2017年
- 骨性关节炎(osteoarthritis,OA)以关节软骨退变,微观下软骨细胞凋亡为主要病变。近年来,在OA的研究过程中,microRNA由于在基因表达转录时期发挥重要作用,其研究受到广泛关注。microRNA可能作为新的生物学标记在OA早期诊断中发挥重要作用,同时可以将microRNA作为靶向进行新药开发,将给人类预防或延缓OA进程提供新的手段。
- 陈蓟雷鸣刘弼肖德明
- 关键词：MICRORNA软骨细胞骨性关节炎
- 骨关节炎临床表现特点及沉默信息调节因子1在其发病中的作用被引量：4
- 2017年
- 背景:研究发现一些功能性基因的功能变化是引发骨关节炎的调控环节,而年龄可能是其中的关键因素之一。目的:对近年来骨关节炎中的临床现表现特点及沉默信息调节因子1在骨关节炎发生发展中的研究进展做一概述。方法:计算机检索中国期刊全文数据库、Pub Med、Springer Link、Elsevier Science Direct数据库,检索时间1987年1月至2016年1月,检索词分别为"骨关节炎;沉默信息调节因子1;软骨"和"Osteoarthritis,Cartilage,Silent information regulation 1"。对纳入符合标准的83条文献进行分析。结果与结论:研究表明,在多种信号通路中去乙酰化修饰调控大量细胞因子的表达和生物学功能,继而影响骨关节炎的发生和发展。沉默信息调节因子1具有调节机体代谢,抑制细胞凋亡,修复DNA损伤,延缓衰老,抵抗应激反应等重要作用,同时在表观遗传学修饰、基因沉默和信号转导调节中发挥着重要的生物学功能,因此沉默信息调节因子1与各种年龄相关的疾病有关,如骨关节炎、骨质疏松症、糖尿病和阿尔茨海默症等。沉默信息调节因子1有望成为开发治疗骨关节炎药物的重要靶点,甚至可能在骨关节炎不成熟的阶段,逆转机械应力导致的软骨功能损伤。
- 雷鸣于斐肖德明
- 关键词：骨关节炎软骨国家自然科学基金
- 白藜芦醇对兔膝骨关节炎的保护作用被引量：3
- 2017年
- [目的]研究白藜芦醇对兔膝骨性关节炎模型的保护作用。[方法]将40只成年新西兰兔(限雄性)作为实验兔,随机分为5组,正常组、模型组、低剂量白藜芦醇组、中剂量白藜芦醇组、高剂量白藜芦醇组,模型组及白藜芦醇组采用Hulth经典方法造骨关节炎模型。术后4周造模成功,各组分别干预,10周后行X线片检测,并取膝关节标本行HE染色、Mankins评分、micro CT扫描,数据作统计学处理。[结果]与模型组相比,白藜芦醇处理组的X线膝关节间隙改变和镜下软骨退变明显减轻。此外,白藜芦醇组的组织学Manking评分和micro CT的软骨下骨骨量体积比(BV/TV)及骨小梁数目(Tb.N)值也以剂量依赖的方式减低,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]白藜芦醇能防止关节软骨退变,从而延缓骨关节炎进程。
- 陈蓟雷鸣周震全刘弼肖德明
- 关键词：白藜芦醇骨关节炎软骨
- 中国正常成人髋关节解剖参数研究进展被引量：1
- 2013年
- 髋关节置换术疗效与髋关节假体与人体匹配程度有很大关系。人体髋关节解剖学特征是髋关节假体设计制造的基础,髋关节解剖参数因人种、性别,甚至地域不同而存在差异,并影响假体匹配。该文就中国正常成人髋关节解剖参数研究进展及其参数与西方人种的差异作一简要综述。
- 金进宝肖德明
- 关键词：髋关节中国人
- 华南人髋臼前倾角测量分析及临床意义被引量：4
- 2013年
- 目的测量分析华南人髋臼前倾角,为设计适合华南人的髋关节假体提供数据支持。方法随机选取115例患者及志愿者(男63人,女52人)作为研究对象,按身高和性别不同分组。对各组研究对象骨盆进行螺旋CT扫描,将扫描数据以Dicom格式导入Mimics软件重建髋臼三维模型;采用Imageware软件测量髋臼模型前倾角并进行统计分析。结果测得华南人髋臼前倾角平均值为16.37°,与我国其他地区人群及欧美人存在差异,均有显著统计学意义(P<0.05);男性髋臼前倾角较女性小,差异有统计学意义(P<0.05),髋臼前倾角大小与身高无明显相关性(P>0.05)。结论本研究精确测得华南人髋臼前倾角,为华南人髋关节解剖数据库的建立提供数据支持,为设计适合华南人的髋关节假体提供理论依据,也为华南地区全髋关节置换术提供数据参考。
- 金进宝石岩尚鹏崔文岗熊建义王大平肖德明
- 关键词：髋臼前倾角髋关节假体
- 高龄小鼠沉默信息调节因子1基因敲除后膝骨关节炎模型的建立被引量：16
- 2015年
- 背景:国内外学者对骨关节炎的发病机制和治疗方法进行了大量的研究,近期发现沉默信息调节因子1(SIRT1)基因在骨关节炎的发病中有着重要的意义,但对其研究尚少,用于该基因研究的骨关节炎模型也鲜有报道。目的:建立特异性的高龄SIRT1基因敲除小鼠膝骨关节炎模型,以期为骨关节炎的研究提供便利条件。方法:采用随机对照分组的方法,将小鼠分为4组,即SIRT1^(+/+)小鼠假手术组(A组)、SIRT1^(+/+)小鼠骨关节炎模型组(B组)、SIRT1^(-/-)小鼠假手术组(C组)及SIRT1^(-/-)小鼠骨关节炎模型组(D组),每组6只。行单侧膝关节前交叉韧带横断加内侧半月板切除建立骨关节炎模型,荧光定量聚合酶链反应检测SIRT1基因敲除情况;苏木精-伊红染色、番红O-固绿双染色观察膝关节软骨形态结构改变,Mankin评分评价膝骨关节炎程度。结果与结论:SIRT1^(-/-)小鼠SIRT1 mRNA表达量明显低于SIRT1^(+/+)小鼠(P<0.01),说明SIRT1基因敲除成功。染色结果显示,B、D两组膝关节软骨破坏明显,Mankin评分明显高于A、C两组(P<0.01),并且SIRT1基因敲除后Mankin评分升高更明显(P<0.05)。提示软骨组织特异性SIRT1基因敲除膝骨关节炎小鼠动物模型建立成功。
- 于斐雷鸣曾晖李明华肖德明
- 关键词：实验动物模型基因敲除膝骨关节炎半月板
- SIRT1经p53和NF—κB的相关蛋白途径调控软骨细胞凋亡的体外研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨S1RT1经p53／bax和NF-κB／过氧化物酶体增殖物受体1共激活因子-1α（PGC．1a）途径调控软骨细胞凋亡的作用机制。方法常规培养新西兰兔关节软骨细胞，分为3组（n：10）：SIRTI激活剂（白藜芦醇）组、对照组、SIRT1抑制剂（尼克酰胺）组，用硝普钠诱导细胞凋亡。采用噻唑蓝法俭测各组软骨细胞活性及增殖、4＇，6-二脒基-2-苯幕吲哚（DAPI）染色和流式细胞术检测各组细胞捌亡，采用WesternBlot技术检测各组细胞SIRT1、p53、NF-κB、bax、PGC-α的表达，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组细胞SIRTⅠ、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达。结果SIRT1激活剂组、对照组、SIRT1抑制剂组OD值平均分别为0．139±0．016、0．098±0．006、0．079±0．002，细胞凋亡率平均分别为9．8％±0．7％、27．3％±1．6％、41．9％±2．0％，以上项目3组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0。05）。SIRT1激活剂组细胞SIRT1、PGC-1α的表达较对照组增高，而SIRT1抑制剂组较对照组降低；SIRTI激活剂组p53、NF。KB、bax的表达较对照组降低，而SIRT1抑制剂组较对照组升高。SIRT1激活剂组细胞SIRTI、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达最高，对照组次之，SIRT1抑制剂组最低。结论SIRT1可通过调控p53、NF-κB的表达改变其下游bax、PGC-1α的表达，从而调控软骨细胞的凋亡。
- 刘弼肖德明雷鸣王大平熊建义马经野许蕴史敦云张晓丽
- 关键词：软骨细胞细胞凋亡体外研究基因表达调控
