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国家自然科学基金(30170364)

作品数:6 被引量:16H指数:3
相关作者:张波侯琳凌云刘海静赵瑗君更多>>
相关机构:北京大学北京大学第一医院北京市第六医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金北京市科委基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇肿瘤
  • 2篇端粒
  • 2篇端粒酶
  • 2篇免疫
  • 2篇免疫组化
  • 2篇基因
  • 2篇基因表达
  • 1篇单杂交
  • 1篇端粒酶活性
  • 1篇乙酰化
  • 1篇乙酰化酶
  • 1篇杂交
  • 1篇增殖
  • 1篇增殖细胞
  • 1篇增殖细胞核
  • 1篇增殖细胞核抗...
  • 1篇肉瘤
  • 1篇软组织
  • 1篇软组织肉瘤

机构

  • 5篇北京大学
  • 2篇北京大学第一...
  • 1篇北京大学第三...
  • 1篇首都医科大学...
  • 1篇山东大学
  • 1篇齐齐哈尔医学...
  • 1篇北京市第六医...

作者

  • 5篇张波
  • 4篇侯琳
  • 2篇刘海静
  • 2篇凌云
  • 1篇沈棋
  • 1篇马彩红
  • 1篇孙颖
  • 1篇李挺
  • 1篇迟英凯
  • 1篇龚一蕾
  • 1篇廖松林
  • 1篇郭华
  • 1篇徐文怀
  • 1篇高冬霞
  • 1篇吕英志
  • 1篇吕彧
  • 1篇王玉萍
  • 1篇白增亮
  • 1篇唐志伟
  • 1篇赵瑗君

传媒

  • 2篇中华病理学杂...
  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇山东大学学报...
  • 1篇Chines...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 2篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2004
  • 2篇2003
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
端粒酶调节相关基因TRAP与肿瘤生物学特性的关系被引量:7
2003年
目的 :研究TRAP基因在人肿瘤组织中的表达及其与人端粒酶逆转录酶 (hTERT)的作用相关性 ,探讨其在人肿瘤发生中的作用。方法 :通过原核表达TRAP蛋白免疫新西兰白兔 ,制备特异性多克隆抗体 ;免疫组化检测TRAP及hTERT在人肿瘤组织中的表达 ;通过构建TRAP真核表达载体、基因转染 ,观察TRAP对细胞hTERT转录、端粒酶活性和癌细胞生长及成瘤性的影响。结果 :通过大肠杆菌表达的TRAP蛋白免疫、制备多克隆抗体 ,经Westernblot鉴定与TRAP具有特异结合性 ;免疫组化显示 2 4 7例恶性肿瘤中有 2 13例TRAP阳性 ,表达率为 86 .2 % ,而在所有癌旁组织中TRAP为阴性。另外 ,交界性及癌前病变与良性病变组织中TRAP表达差异也有显著性。进一步检测卵巢生发上皮肿瘤、乳腺癌、肝癌及中枢神经系统肿瘤组织hTERT表达 ,显示hTERT与TRAP表达的结果相一致。TRAP正义转染使hTERT及端粒酶活性升高 ,细胞增殖加快 ;而反义转染时 ,两者均下降 ,细胞增殖受抑。裸鼠成瘤性实验表明 :正义TRAP使癌细胞成瘤性增强 ,而反义则抑制移植瘤的生长。结论 :TRAP表达存在于人癌组织及部分癌前病变 ,与癌细胞恶性表型相关 ,并与hTERT表达一致。TRAP基因参与对端粒酶的调节作用 ,可能与人肿瘤发生有关。
唐志伟张波徐文怀赵瑗君侯琳
关键词:TRAP肿瘤生物学特性免疫组化
DNA损伤剂诱导端粒酶调节相关hALP基因表达及作用研究被引量:1
2005年
目的确定端粒酶调节相关hALP基因对细胞DNA损伤的反应和作用。方法以DNA损伤剂H2O2和顺铂处理人HeLa、Hep2细胞,运用定量逆转录聚合酶链反应和免疫荧光观察hALP基因表达的改变,并以荧光素酶报告基因法测定hALP基因启动子活性变化。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析不同hALP基因表达状态下DNA损伤剂对细胞生长的影响。结果0.2~1.6mmol/LH2O2可诱导hALPmRNA水平升高,当浓度为0.4mmol/L时,hALPmRNA水平最高;以0.4mmol/LH2O2处理细胞6h即可观察到hALPmRNA水平显著升高,并在36h内保持高水平。顺铂处理细胞也可以上调hALP的mRNA表达,并呈一定的剂量和时间依赖性。免疫荧光检测发现:在0.2或0.4mmol/LH2O2、0.2或0.5μmol/L顺铂处理细胞12h后,hALP的表达水平升高,并且多聚集于细胞核。H2O2和顺铂处理细胞时可通过hALP基因启动子-705~+20nt区域的序列上调其启动子转录活性。H2O2(0.4mmol/L)或顺铂(0.5μmol/L)处理HeLa细胞时,表达正义hALP基因的细胞生长仍活跃,而表达反义hALP基因和对照组细胞则生长相对缓慢。结论DNA损伤可通过激活hALP基因启动子转录活性而上调其表达,hALP基因的表达可以增强细胞对H2O2和顺铂损伤的抵抗性。
刘海静凌云侯琳张波
关键词:DNA损伤基因表达
转录因子COUP-TFII对端粒酶活性的抑制及其相互作用蛋白的分离和鉴定被引量:1
2004年
端粒酶催化亚基hTERT的转录调控是端粒酶活性调节的关键步骤 .实验分离和克隆了参与hTERT转录调控的转录因子COUP TFII,分析了其对HeLa细胞端粒酶活性的生物学效应 ,并分离和鉴定了与其相互作用的蛋白质 .结果表明在以hTERT启动子为诱饵的酵母单杂交体系中 ,COUP TFII可以与hTERT启动子结合 ;得到了纯度高达98%的COUP TFII融合蛋白 ,并且其结合于hTERT启动子 2 0 1~ +35区段 ,抑制HeLa细胞端粒酶的活性 ;从HeLa细胞核蛋白中分离到了 2种与COUP TFII相互作用的蛋白质 .研究初步揭示了COUP TFII在细胞分化和肿瘤转化过程中的参与途径和调控机制 ,为开启以端粒酶为靶目标的肿瘤治疗奠定了基础 .
王强白增亮李璇侯琳张波
关键词:酵母单杂交COUP-TFII端粒酶相互作用蛋白
ENHANCED EXPRESSION OF hALP GENE CONFERS CELLULAR RESISTANCE TO H_2O_2 INDUCED SENESCENCE被引量:3
2006年
Objective To investigate the H_ 2O_ 2-induced expression of human histone acetyltransferase-like protein (hALP), a telomerase regulation-associated gene, and its effects on the stress-triggered cellular senescence.Methods The induced expression of hALP was measured by semi-quantitative RT-PCR and immunofluorescent histochemistry after treatment of HeLa cells by H_ 2O_ 2.The effects of hALP expression on cellular responses to H_ 2O_ 2 were analyzed by MTT, flowcytometry, and SA-β-gal staining, respectively.Results hALP mRNA could be dose-dependently induced by treatments of 0.2-1.6 mmol/L H_ 2O_ 2, and the induction could be observed after 6 hours and kept for 36 hours in the presence of 0.4 mmol/L H_ 2O_ 2.Meanwhile, the immunofluorescent staining showed marked stronger nuclear intensity of hALP protein in H_ 2O_ 2-treated HeLa cells.In the treatment of H_ 2O_ 2, the ectopic expression of hALP enhanced continuous growth and overcame G_ 2/M arrest as well as decreased senescence-associated β-gal staining.On the contrary, the transfected clones with antisense or blank vector and original HeLa cells presented growth suppression, G_ 2/M delay and higher percentage of SA-β-gal activities in the presence of H_ 2 O_ 2.Conclusions The expression of hALP could be up-regulated by treatment of H_ 2O_ 2, and elevated expression could enhance cellular resistance to H_ 2O_ 2-induced cellular senescence.The data might be of references to elucidation of basic biological function of hALP gene and its associated telomerase activity.
Yun LingHai-jing LiuLin HouBo Zhang
关键词:EXPRESSIONSTRESSSENESCENCE
N-乙酰转移酶NAT10在软组织肿瘤中的表达及意义被引量:2
2006年
目的:观察N-乙酰转移酶NAT10蛋白在软组织肉瘤中的表达及与类型、分级的关系。方法:通过原核表达NAT10蛋白免疫制备特异性多克隆抗体,并经免疫印迹鉴定;以组织芯片-免疫组化检测166例软组织肉瘤和28例良性肿瘤及瘤样病变中NAT10蛋白的表达。结果:制备多克隆抗体经Western印迹鉴定与NAT10具有特异结合性。免疫组化显示166例软组织肉瘤中NAT10蛋白阳性95例,阳性率为57%(95/166),28例良性肿瘤及瘤样病变中4例阳性14%(4/28),两者间有显著性差异(P<0.05)。NAT10表达的主要分布为:滑膜肉瘤76%(13/17)、恶性纤维组织细胞瘤75%(15/20)、原始神经外胚叶瘤(PNET)70%(16/23)、横纹肌肉瘤70%(7/10)、恶性外周神经鞘膜瘤50%(11/22)、隆突性皮肤纤维肉瘤50%(7/14)、平滑肌肉瘤43%(6/14)、脂肪肉瘤42%(8/19)、黏液性纤维肉瘤38%(6/16)。统计比较显示:滑膜肉瘤与黏液性纤维肉瘤和脂肪肉瘤,以及恶性纤维组织细胞瘤与黏液性纤维肉瘤之间NAT10表达具有显著性差异(P<0.05);而其它各组间无明显差异(P>0.05)。同时,NAT10蛋白强阳性表达(≥++)多存在于滑膜肉瘤(53%,9/17)、横纹肌肉瘤(40%,4/10)及恶性纤维组织细胞瘤(40%,8/20)。在FNCLCC分级中,19例I级肉瘤中NAT10阳性表达率为42%(8/19),44例II级肉瘤为43%(19/44),70例III级肉瘤为73%(51/70)。III级NAT10阳性率显著高于II级组和I级组(均为P<0.05)。结论:研究表明N-乙酰转移酶NAT10表达于多种人软组织肉瘤,尤其在高度恶性肉瘤,因此有可能为软组织肉瘤的分级及预后因子。
凌云龚一蕾李挺郭华孙颖迟英凯沈棋刘海静侯琳张波
关键词:组蛋白乙酰化酶软组织肉瘤组织芯片免疫组化
端粒酶转录酶及其调节相关蛋白与增殖细胞核抗原在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义被引量:3
2003年
目的 探讨端粒酶转录酶 (hTERT)及端粒酶调节相关蛋白 (TRAP)与增殖细胞核抗原(PCNA)在卵巢上皮性肿瘤中的表达和临床意义。方法 收集 10 6例卵巢上皮性肿瘤 (恶性 5 4例 ,交界性 33例 ,良性 19例 )的临床资料 ,行hTERT、TRAP和PCNA 3种抗体的免疫组织化学标记链霉素卵白素生物素 (LSAB)法染色。对 87例恶性和交界性患者进行了随访 ,4 5例获结果 ,随访时间为 2~6 0个月。结果 hTERT蛋白的表达在良性 (4/ 19)和交界性 (90 9% ,30 / 33)以及良性和恶性(94 4 % ,5 1/ 5 4 )间的差异均有显著性 (P均 <0 0 0 1) ,TRAP蛋白的表达在良性 (4/ 15 )和恶性(77 8% ,2 8/ 36 )间的差异有显著性 (P <0 0 0 1) ;hTERT和TRAP蛋白的表达在卵巢癌Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期两组病例中的差异均无显著性 (P >0 0 5 ,P >0 3)。PCNA的表达在良性 (6 9± 5 9) %和交界性 (2 6 4± 17 8) %、良性和恶性 (5 1 8± 2 2 1) %以及交界性和恶性间的差异均有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 0 1,P <0 0 5 )。 33例交界性患者全部存活 ,5 4例恶性患者中 35例 (6 4 8% )有转移 (包括 5例淋巴结转移 ) ,4例 (7 4 % )死亡。结论 hTERT和TRAP蛋白的表达与卵巢上皮性肿瘤的良恶性有关 ,但与其临床分期无关 ;
高冬霞吕彧吕英志马彩红王玉萍张波廖松林
关键词:增殖细胞核抗原卵巢上皮性肿瘤基因表达
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