国家自然科学基金(30872670)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- MSCS通过分泌细胞因子及抗凋亡作用修复H2O2损伤的PCl2细胞
- 目的:新生儿缺氧缺血性脑损伤是儿童神经系统致残的常见原因之一,课题组前期研究表明体内移植MSCs对HIBD新生大鼠学习记忆功能的恢复具有明显促进作用,但同时也发现MSCs在体内的分化率不足10%,因此,仅用直接分化为有功...
- 张赟江伟毕杨龚敏张小建喻琴魏小平李廷玉陈洁
- 关键词：MSCS细胞因子HIBDPC12
- 文献传递
- 大鼠Toll样受体2基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:构建特异性抑制大鼠TLR2基因的重组腺病毒载体,并在大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中进行功能鉴定。方法:体外合成3对大鼠siTLR2的双链DNA序列,经退火定向克隆到穿梭质粒pSES-HUS中获得pSES-HUS-siTLR2质粒,Pme I线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒进行同源重组获得pAd-siTLR2质粒,脂质体转染HEK293细胞,包装获得Ad-siTLR2腺病毒颗粒,继而感染PC12细胞,通过Real-time PCR和Western blot方法检测3对siRNA对TLR2基因的抑制效率。结果:PCR凝胶电泳和测序结果均证实目的基因正确克隆到腺病毒载体中;Real-time PCR和Western blot结果显示:携带siTLR2的病毒颗粒能够在mRNA和蛋白水平有效抑制PC12细胞中TLR2的表达。结论:成功构建了Ad-siTLR2重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中包装成重组腺病毒,转染PC12细胞后能有效抑制TLR2基因的表达,为进一步研究TLR2在不同疾病中的免疫调节机制奠定重要基础。
- 张赟龚敏毕杨江伟喻琴李廷玉陈洁
- 关键词：TOLL样受体2SIRNA重组腺病毒载体免疫调节
- 大鼠siTLR4重组腺病毒载体的构建及功能鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的构建特异性针对大鼠TLR4基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步研究TLR4在不同疾病中的免疫调节机制奠定重要基础。方法设计并合成3对大鼠TLR4基因的siRNA序列,退火处理后定向克隆到pSES-HUS穿梭质粒中,获得pSES-HUS-siTLR4,经Pme I线性化后与pAdEasy-1骨架质粒在BJ5183细菌中进行同源重组,从而构建pAd-siTLR4质粒,通过脂质体转染,在HEK293细胞中包装形成Ad-siTLR4腺病毒颗粒,用该病毒感染PC12细胞,从基因和蛋白质水平分别检测3对siTLR4的抑制效果,同时从蛋白质水平检测TLR4下游关键分子NF-κB的表达。结果 PCR、酶切和测序均证实目的基因正确克隆到所构建的pAd-siTLR4重组腺病毒载体中;经包装获得的Ad-siTLR4病毒颗粒在PC12细胞中能够有效地抑制TLR4 mRNA和蛋白水平的表达,并显著地降低了NF-κB的表达。结论成功构建了pAd-siTLR4重组腺病毒质粒,同时包装获得了Ad-siTLR4重组腺病毒,转染PC12细胞后不仅能明显降低TLR4的表达,而且有效地抑制了TLR4通路下游关键分子NF-κB的表达。
- 张赟毕杨龚敏江伟魏小平李廷玉陈洁
- 关键词：SIRNA重组腺病毒载体NF-ΚB免疫调节
- 骨髓间充质干细胞在组织损伤局部微环境中的调节作用
- 2010年
- 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有自我增殖和多向分化潜能的细胞,植入体内后对损伤组织具有一定的修复作用,研究发现MSCs在体内的分化效率极低(不足10%),故仅用其分化能力不能完全解释它良好的修复效能。新近研究表明,MSCs可通过旁分泌途径调节损伤局部的微环境,从而促进受损组织的修复,提示这种微环境的调节较其自身分化更具有临床意义。该文对MSCs在组织损伤局部微环境中的调节作用做一简要概述,为MSCs更广阔地应用于医学领域提供理论基础。
- 张赟陈洁李廷玉
- 关键词：骨髓间充质干细胞
