中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(030201310)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：杨涛吴东来冯瑜菲李俊平孙恩成更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 蓝舌病病毒反向遗传操作系统的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立蓝舌病病毒(BTV)的反向遗传操作系统,本研究构建了分别表达血清1型BTV SZ97/1株VP1、VP3、VP4、VP6、VP7、NS1和NS2蛋白的7个真核表达质粒,同时又构建了含有SZ97/1株BTV的全部10个基因节段的T7聚合酶体外转录重组质粒。并利用T7 RNA聚合酶对酶切线性化的10个体外转录质粒进行体外转录,制备BTV全部10个基因的体外转录RNA。将已构建的7个真核表达质粒和体外转录获得的RNA产物依次共转染BHK-21细胞,拯救出含有分子标记的BTV。本研究首次在我国建立了BTV的反向遗传操作系统,为我国深入开展该病毒致病机理、传播机制、基因组功能的研究以及新型疫苗的研发奠定了基础。
- 杨涛徐青元孙恩成冯瑜菲李俊平孙亮孙晶吴东来
- 关键词：蓝舌病蓝舌病病毒反向遗传学
- 蓝舌病病毒一步RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立蓝舌病病毒（BTV）群特异性核酸检测方法,本研究针对BTV S10基因保守区域设计并合成1对特异性引物,建立了一步RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测.实验结果表明：该方法对BTV1～24型均有特异性反应,而对茨城病毒（IBAV）、中山病毒（CV）和赤羽病病毒（AKAV）无交叉反应,具有良好的特异性;最低检出量为102 TCID50/mL.此外,该方法能有效的从羊的抗凝血样品中检测出BTV核酸.本研究所建立的一步RT-PCR检测方法可以用于BTV的快速检测及流行病学调查.
- 冯瑜菲赵国辉徐青元杨涛孙恩成李俊平吴东来
- 关键词：蓝舌病病毒分子诊断BLUETONGUEVIRUS
