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小鼠窦前卵泡培养成熟后卵母细胞纺锤体的变化: 2006年; 目的小鼠窦前卵泡体外培养得到成熟卵母细胞,观察卵母细胞的染色体和纺锤体形态,分析其变化及原因。方法完整小鼠窦前卵泡培养12 d,得到的卵母细胞进行免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察纺锤体和染色体的形态和分布。结果经过体外培养,得到GV、M I、MⅡ期卵母细胞分别占总数27.9%、37.2%、34.9%;GV期卵母细胞存在完整的染色质圆环,11.8%的M I期卵母细胞显示正常纺锤体和染色体;38.5%的MⅡ期卵母细胞显示正常的纺锤体和染色体。结论小鼠窦前卵泡经体外培养后能够得到成熟的MⅡ期卵母细胞,但是其效率较低。原因可能是卵母细胞骨架结构的异常使染色体分离障碍,部分卵母细胞停留于M I期;同时成熟卵母细胞的受精率低也与纺锤体异常有关。; 彭宇洪庄广伦周灿权; 关键词：染色体卵母细胞小鼠

自然周期冷冻胚胎解冻移植临床分析被引量：16: 2005年; 【目的】探讨影响自然周期冷冻胚胎解冻移植妊娠率的因素。【方法】回顾性分析本中心2003年1月到2004年1月233个病人进行的268个自然周期冷冻胚胎解冻移植周期,对年龄、子宫内膜厚度和回声类型、LH峰日激素水平以及移植胚胎个数和妊娠率等因素进行分析。【结果】268个周期中58例妊娠,妊娠率21.6%。年龄在妊娠组和未妊娠组间有显著性差异[(30.8±3.0)岁vs(31.9±4.0)岁,P=0.035)]。年龄≤35岁组其LH峰日子宫内膜厚度显著厚于>35岁组(10.2±1.8mmvs9.3±2.0mm,P=0.007)。移植1、2、3个胚胎的妊娠率分别为13.3%、18.2%和23.8%,三组间妊娠率没有显著性差别。LH峰日子宫内膜厚度和类型在妊娠组和未妊娠组间没有显著性差异(P>0.05)。【结论】年龄显著影响自然周期冷冻胚胎移植妊娠率。移植胚胎的个数和子宫内膜的类型及厚度对妊娠率没有显著影响。; 苗本郁周灿权方丛庄广伦; 关键词：妊娠率自然周期年龄子宫内膜

小鼠体外发育与体内发育成熟卵子胞浆成熟度和细胞骨架比较: 2005年; 【目的】体外培养小鼠窦前卵泡得到成熟卵子,比较其与体内发育成熟卵子直径、谷胱甘肽含量、皮质颗粒分布以及纺锤体结构的差异,评估胞浆成熟度对卵子发育潜能的影响。【方法】选择出生10d小鼠,分离窦前卵泡,培养后得到326个MII期卵子作为体外发育组。8～10周雌鼠经孕马血清和绒毛膜促性腺激素注射得到244个MII卵子作为体内发育组。酶法检测卵子谷胱甘肽含量,免疫荧光染色,共聚焦显微镜成像显示纺锤体形态和皮质颗粒分布。【结果】体外发育成熟卵子直径(69.6±5.7)μm,明显小于体内发育成熟卵子直径(84.2±3.0)μm;体外发育成熟卵子谷胱甘肽含量(4.3±0.7)pmol明显低于体内发育成熟卵子(6.1±1.0)pmol;50个体外发育成熟卵子中18个(36%)皮质颗粒周边分布,40个体内发育成熟卵子中36个(90%)皮质颗粒周边分布(P<0.05);14个(28%)体外发育卵子出现无皮质颗粒区,34个(85%)体内发育成熟卵子出现无皮质颗粒区(P<0.05);120个体外发育成熟卵子中46个(38.3%)显示正常桶状纺锤体,84个体内发育成熟卵子中80个(95.2%)显示正常桶状纺锤体(P<0.05)。【结论】体外发育成熟卵子胞浆成熟度没有达到体内发育成熟卵子水平。; 彭宇洪庄广伦陈文芳李涛周灿权; 关键词：卵泡微管蛋白皮质颗粒

超短时受精对人类配子体外多精受精发生率的影响被引量：12: 2007年; [目的]分析精卵孵育10 min的超短时受精方案对人类配子体外多精受精的影响。[方法]将获卵数≥6、行常规IVF受精的病人所获得的卵子随机分为两组,一组采用超短时受精方案(精卵孵育10 min);另一组采用常规短时受精方案(精卵孵育2 h)。比较两组的多精受精率,正常受精率.受精失败的发生率,以及卵裂率、优质胚胎率(移植和冷冻胚胎的比率),并进行统计学分析。[结果]超短时受精组多精受精率为6.6%,常规短时受精组的多精受精率为4.8%,两组之间无统计学差异(P=0.34);两组间正常受精率分别为65.6%、67.2%,差异无统计学意义;两组中受精失败的发生率相同;两组的优质胚胎(移植和冷冻胚胎)率无统计学差异。[结论]精卵孵育10 min的超短时受精方案不能降低多精受精的发生率。; 李涛任姿张敏芳周灿权; 关键词：多精受精体外受精-胚胎移植

玻璃化冷冻法保存人类胚胎干细胞被引量：2: 2005年; 【目的】探讨玻璃化冷冻方法保存人类胚胎干细胞的效率。【方法】冷冻保存人类胚胎干细胞,按冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组和慢速冷冻组,比较两组解冻后人类胚胎干细胞的细胞复苏率、克隆生长与分化情况,并比较分析解冻后的与未经冷冻的胚胎干细胞的生长、分化情况,鉴定解冻后人类胚胎干细胞的全能性。【结果】玻璃化冷冻组与慢速冷冻组解冻后的细胞复苏率分别为81.9%和22.8%(P<0.001)。慢速冷冻组解冻后克隆生长较玻璃化冷冻组缓慢且更易分化。两组未分化的胚胎干细胞继续培养的生长与分化情况一致。玻璃化冷冻组解冻后第6代人类胚胎干细胞染色体核型正常,SSEA鄄4、SSEA鄄3阳性,表达OCT鄄4基因。人类胚胎干细胞来源的畸胎瘤包含了来源于3个胚层的组织细胞。【结论】玻璃化冷冻是保存人类胚胎干细胞的有效方法,解冻后的干细胞在继续培养过程中仍可保持其正常核型和全能性。; 麦庆云周灿权李涛邓明芬方丛庄广伦; 关键词：玻璃化冷冻慢速冷冻人类胚胎干细胞克隆生长

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广东省科技攻关计划(2003A3020305)