浙江省自然科学基金(LY14H260004)
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 相关作者：宋杨吴南翔高明王思梦王禹更多>>
- 相关机构：浙江省医学科学院杭州师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p,p’-DDE致大鼠跨代雄性生殖毒性效应及Igf2 DMR2区域甲基化的可能机制被引量：2
- 2017年
- [目的]建立宫内p,p’-DDE暴露跨代大鼠模型,观察雄性子代生殖毒性是否具有亲源性遗传特征及可能的表观遗传机制。[方法]SPF级的SD大鼠于孕8~15天给予每天每千克体重100 mg p,p’-DDE灌胃,另设溶剂对照组采用玉米油灌胃,孕鼠自由分娩,保留所有雄性仔鼠(F1代),同组别不同窝别的F1代仔鼠于出生后90天按雌雄比1∶1交配,产生F2代仔鼠。染毒组和对照组雌雄F2代按以下分组设计两两交配后,产生F3代仔鼠,分组为:(1)雌雄均为对照组(C♂-C♀),(2)雌雄均为染毒组(DDE♂-DDE♀),(3)染毒组雄性与对照组雌性(DDE♂-C♀),(4)对照组雄性与染毒组雌性(C♂-DDE♀)。用计算机辅助精子分析系统(CASA)分析3代雄性仔鼠成年后的精子质量,亚硫酸氢钠基因组测序法检测Igf2 DMR2区域甲基化水平,实时荧光定量PCR分析印记基因表达。[结果]p,p’-DDE可诱导F1、F2及F3代DDE♂-DDE♀、DDE♂-C♀精子数量和活力下降,F1代精子数量和活力分别从(70.63±11.79)×106/m L、(76.75±7.57)%下降至(50.00±13.08)×106/m L、(62.42±9.40)%;F2代精子数量和活力分别从(82.86±38.60)×106/m L、(82.14±6.44)%下降至(43.75±25.04)×106/m L、(60.88±25.03)%;F3代DDE♂-DDE♀精子数量及活力分别从(68.89±41.37)×106/m L、(68.56±10.67)%下降至(21.66±4.83)×106/m L和(29.33±32.70)%,F3代DDE♂-C♀精子数量和活力下降为(28.00±16.60)×106/m L和(34.60±31.60)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。F1~F3代雄性仔鼠精子细胞Igf2 DMR2区域(1、16、18位点)低甲基化,Igf2转录下调,H19转录上调,Igf2基因的转录水平和Igf2 DMR2甲基化成正相关(r=0.806 5)。[结论]Igf2 DMR2区域甲基化改变可能在p,p’-DDE诱导的跨代雄性大鼠生殖毒性中起重要作用。
- 宋杨高明王禹吴南翔
- 关键词：IGF2甲基化雄性生殖
- P,p'-DDE对胰岛素瘤细胞H19差异甲基化区甲基化及胰岛素分泌的影响
- 2022年
- [背景]糖尿病是全球重要的公共卫生问题。研究表明二氯二苯基二氯乙烷(p,p’-DDE)与2型糖尿病的发病密切相关,然而相关分子机制尚不清楚。[目的]探讨p,p’-DDE对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)H19差异甲基化区(DMR)甲基化及胰岛素分泌的影响。[方法]用不同浓度的p,p’-DDE(0、3.125、6.25、12.5、25、50、75μmol·L^(-1))染毒INS-1细胞24 h,采用CCK-8法检测INS-1细胞活力;以0、12.5、25、50μmol·L^(-1)p,p’-DDE作为后续实验浓度,染毒24 h。采用亚硫酸氢盐修饰测序法检测H19 DMR 24个Cp G位点甲基化水平;采用实时荧光定量PCR检测胰岛素样生长因子2(IGF2)基因转录水平;采用Western blotting检测IGF2和1型胰岛素样生长因子受体(IGF1R)蛋白水平;采用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验测定INS-1细胞胰岛素分泌功能(高糖和低糖浓度分别为5、25 mmol·L^(-1))。[结果]与对照组相比,12.5μmol·L^(-1)p,p’-DDE增加INS-1细胞活力,然而,50、75μmol·L^(-1)p,p’-DDE抑制细胞活力(P<0.01),故本研究选择50μmol·L^(-1)为最高染毒浓度。25μmol·L^(-1)p,p’-DDE暴露导致H19 DMR Cp G18、Cp G22~Cp G24位点甲基化水平下调,50μmol·L^(-1)p,p’-DDE暴露导致H19 DMR Cp G10~Cp G24位点甲基化水平下调(P<0.05或P<0.01)。不同浓度(12.5、25、50μmol·L^(-1))p,p’-DDE均可下调胰岛细胞IGF2 mRNA、蛋白表达和IGF1R蛋白表达,IGF2转录水平分别降低为对照组的67.8%、68.6%、62.5%,蛋白水平分别降低为对照组的73.3%、79.5%、80.9%,IGF1R蛋白水平分别降低为对照组的54.8%、25.6%、12.9%(P<0.01)。在高糖环境(25 mmol·L^(-1)葡萄糖)下,不同浓度p,p’-DDE均抑制胰岛素分泌水平,分别降低为对照组的85.0%、58.6%、49.5%(P<0.01)。[结论]p,p’-DDE下调胰岛细胞H19 DMR甲基化水平,干扰IGF2/IGF1R信号通路,导致胰岛素分泌功能障碍。
- 宗艳秋谢华森李晓青王莉君杨磊宋杨
- 关键词：胰岛功能H19胰岛素样生长因子2
- p,p’-DDE宫内暴露致雄性子代大鼠的生殖毒性
- 2015年
- [目的]探讨宫内暴露p,p’-DDE对雄性子代生殖毒性的影响。[方法]母鼠交配成功后,将其随机分为对照（玉米油）组和100 mg/kg p,p’-DDE染毒组,每组8只。染毒组于孕第8~15 d采用灌胃方式给予100 mg/kg p,p’-DDE处理,对照组孕鼠给予等容积玉米油。孕鼠自由分娩,观察仔鼠个数和出生性别,测量雄性仔鼠肛殖距及检查乳头存留情况;计算睾丸的脏器系数;利用计算机辅助精子分析系统测定雄性仔鼠的精子质量各相关指标;酶联免疫吸附法测定雄性子代血清睾酮水平。[结果]染毒组仔鼠肛殖距[（0.94±0.12）cm]较对照组仔鼠肛殖距[（1.11±0.13）cm]有所缩短,乳头存留率（34%）较对照组（0%）明显上调,精子数目[（50.00±4.62）×106个/m L],较对照组[（70.63±4.17）×106个/m L]明显降低,精子活力[（62.42±3.32）%],较对照组[（76.75±2.68）%]明显下降,差异均有统计学意义。2组雄性仔鼠雌雄比例、睾丸脏器系数、血清睾酮水平、睾丸重量差异均无统计学意义。[结论]宫内暴露p,p’-DDE可诱导雄性仔鼠出现雌性化特征,精子数目和活力下降,导致雄性子代生殖毒性。
- 王思梦吴南翔高明谭玉凤宋杨
- 关键词：雄性子代生殖毒性
- 持久性有机污染物导致糖尿病发病机制研究进展
- 2015年
- 近年来,糖尿病的患病率明显升高,机制尚不清楚。研究发现,持久性有机污染物(POP)可能是导致糖尿病发生的原因之一。本文对POP的概念、种类及其导致糖尿病的相关机制进行综述,并从胰岛素分泌、胰岛素抵抗及表观遗传学3个方面对POP与糖尿病的关系进行探讨,推测POP通过升高血清γ谷氨酰转移酶水平影响胰岛素分泌;也可通过抑制葡萄糖转运蛋白4表达造成胰岛素抵抗;除此之外,POP可通过改变组蛋白修饰、DNA甲基化和微小RNA(miRNA)的水平等表观遗传修饰导致糖尿病的发生。
- 王思梦吴南翔宋杨
- 关键词：持久性有机污染物糖尿病表观遗传学
- p,p’-DDE宫内暴露致子代SD大鼠糖耐量受损被引量：1
- 2017年
- [目的]研究2,2-双(对氯苯基)-1,1-二氯乙烯(p,p’-DDE)宫内暴露对子代SD大鼠糖代谢的影响。[方法]将8~10周龄的性成熟雌、雄SD大鼠各16只按1∶1雌雄同笼交配,母鼠交配成功后,将孕鼠随机分为对照组和p,p’-DDE染毒组,每组各8只。孕第8~15天时,按100 mg/kg(以体重计)的剂量对染毒组孕鼠用p,p’-DDE连续灌胃8 d,对照组孕鼠给予5 m L/kg(以体重计)的等容积玉米油。足月孕鼠自由分娩,保留每窝雌雄仔鼠各5只。8周后,仔鼠称重过夜禁食,然后进行口服葡萄糖耐量实验,测定灌胃后0、30、60、120 min尾静脉血中的血糖水平并计算血糖曲线下面积。同时,灌胃前及灌胃后2 h进行眼眶采血,并用酶联免疫法测定眼眶血血清中的胰岛素水平。[结果]染毒组雄仔鼠的空腹血糖水平降低(t=3.94,P=0.011)。染毒组雌、雄仔鼠灌胃后30 min血糖水平均高于对照组(t=-2.876,P=0.016;t=-3.862,P=0.012),而灌胃后60 min和120 min的血糖水平均无改变(P>0.05)。同时,染毒组雌、雄仔鼠的血糖曲线下面积均较对照组高(t=-3.422,P=0.004;t=-2.804,P=0.038)。染毒组雌、雄仔鼠灌胃前(t=-3.33,P=0.008;t=-6.90,P=0.000)及灌胃后2 h(t=-5.19,P=0.000;t=-4.18,P=0.006)的血清胰岛素水平均高于对照组。[结论]p,p’-DDE宫内暴露可诱导子代SD大鼠糖耐量受损。
- 王禹宋杨高明吴南翔
- 关键词：宫内暴露糖耐量
- 砷的雄性生殖毒性研究进展
- 2021年
- 砷是一种天然类金属化学元素,广泛存在于自然界中[1]。同时,砷也是一种雄性生殖毒物,可影响下丘脑—垂体—睾丸轴、损害支持细胞和生精细胞,引起精子质量下降[2]。本文就长期砷暴露所引起的雄性生殖毒性及相关机制进行综述。1砷的雄性生殖毒性1.1砷对下丘脑—垂体—睾丸轴的影响下丘脑—垂体—睾丸轴是男性生殖的重要调节路径,下丘脑多肽能神经元合成促性腺激素释放激素(GnRH),促进腺垂体分泌黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)。
- 宗艳秋谢华森李晓青王莉君杨磊宋杨
- 关键词：砷雄性生殖毒性
- 基因印记与精子发生障碍的研究进展
- 2014年
- 基因印记是特定基因的一对等位基因发生差异性的表达,机体仅表达来自亲本一方的等位基因,而另一方保持沉默。精子发生是一个高度复杂的独特分化过程,包括精原细胞发育为精母细胞、单倍体精细胞的形成和精子成熟。本文通过探讨精子发生障碍与基因印记的关系,分析不育男性表观遗传缺陷的潜在风险,为临床男性不育的预防和治疗提供理论支持。
- 王思梦宋杨吴南翔
- 关键词：基因印记DNA甲基化精子发生
