国家教育部博士点基金(20040625011)
- 作品数:4 被引量:36H指数:3
- 相关作者:夏庆友赵萍向仲怀朱虹段军更多>>
- 相关机构:西南农业大学西南大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 家蚕卵黄原蛋白及其受体基因被引量:13
- 2005年
- 家蚕小卵突变体 (Smalleggmutant ,sm) ,其卵体积仅及正常卵的 2 / 3,不能受精而致死。因其卵母细胞不能正常吸收卵黄原蛋白 (Vg) ,人们认为其原因可能是卵黄原蛋白受体基因 (VgR)突变所致。本研究首先通过克隆筛选和基因组序列分析 ,获得了 2 5 6 4bp含有 ployA的家蚕卵黄原蛋白受体基因 (BmVgR)片段。将该基因片段的预测蛋白与其它物种的VgR/YPR和低密度脂蛋白受体 (LDLR)家族比较 ,发现该基因具有LDLR家族的基本结构特征。其次 ,经RT PCR检测 ,结果表明BmVgR在sm的不同时期的卵母细胞中都能正常转录。最后 ,分别对sm不同发育时期的体液和卵的总蛋白进行SDS PAGE分析 ,发现该突变体的卵母细胞不能正常摄取体液蛋白 (包括Vg)。综合分析 ,sm不能正常摄取Vg ,可能并不是VgR的功能异常导致 。
- 林英赵萍侯勇李娟龚达平孙全夏庆友向仲怀
- 关键词:受体基因低密度脂蛋白受体家蚕卵卵黄原蛋白卵母细胞
- 与家蚕细胞凋亡相关的Caspase基因BmIce的克隆和序列分析被引量:13
- 2005年
- DrIce基因在果蝇的细胞调亡代谢途径中起着重要作用。采用tblastn程序将DrICE在家蚕EST数据库中进行同源性检索,检索到的EST序列进行电子延伸,根据延伸结果设计引物,用RT-PCR检测和克隆测序验证,成功地克隆到家蚕第二种Caspase基因的全长cDNA(GenBank登录号为:AY885228)。克隆的cDNA长1410bp,ORF长825bp,编码275个氨基酸残基,预测分子量为31.8kD,等电点为6.15,基因名定为BmIce。将BmIce的cD-NA与家蚕基因组序列进行比对,结果表明该基因具有6个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。BmICE在氨基酸水平上与果蝇DrICE、线虫的CED-3的一致性分别为34%和29%,在第169个氨基酸残基处具有QACRG的五肽活性位点,该活性位点是Caspase家族的典型结构。与果蝇Caspase家族聚类分析中,BmICE与果蝇中具有短的N端结构域的DrICE、DCP-1及DECAY聚为一类,根据其结构分析和聚类分析,推测家蚕BmIce基因可能参与细胞凋亡的执行作用。
- 段军朱虹查幸福赵萍夏庆友
- 关键词:细胞凋亡CASPASE家蚕
- 家蚕化学诱变剂及诱导突变体的筛选被引量:8
- 2007年
- 在家蚕Bombyx mori基因组计划完成之后,其功能基因组研究成为该领域的最重要课题。突变体是功能基因组学研究的重要材料,因此,通过人为诱导获取大量的突变系统是及其重要的手段。本研究用化学诱变剂ENU、MNU、DES、5-BU、EMS诱导处理家蚕标准品种C108,筛选获得了非滞育红卵,长圆筒茧、小茧、丝胶茧及绵茧突变体,致死突变体及无鳞毛蛾翅突变体。结果还表明:MNU、DES诱变家蚕的突变效率高,注射翅原基比腹部更方便且效果好,化学诱导雄体比雌体的效果好;在时期上,注射蛹和蛾都有诱导效果。上述突变体大多为致死性突变,推测其可能与致死性基因突变有关。同时,本研究为应用TILLING技术鉴定家蚕更多目的基因突变体提供了有效的材料。
- 林英陈冬妹代方银杨瑜向仲怀夏庆友
- 关键词:家蚕化学诱变剂突变体TILLING技术
- 家蚕先天免疫基因Bmimd的克隆、表达及序列分析被引量:2
- 2008年
- 昆虫的先天免疫应答由一组基因通过级联网络调控实现。果蝇Drosophila免疫缺陷(immune deficiency,imd)基因在体液免疫信号传递途径中起着重要的作用。我们利用生物信息学方法进行电子克隆,成功地找到了imd基因在家蚕Bombyx mori中的同源体,命名为Bmimd。该基因全长1092bp,由4个外显子和3个内含子组成,开放阅读框(openreadingframe,ORF)长750bp,编码250个氨基酸,预测蛋白质分子量为28.6kD。Bmimd序列中含有一个致死结构域,经聚类分析表明该结构域与哺乳动物的受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)相似。将该基因亚克隆到PET-50b载体进行原核表达,表达出了带有2个6×His tag和1个Nus.Tag标签的重组蛋白。Western blotting结果表明Bmimd蛋白在5龄4天家蚕的头、脂肪体、生殖腺、表皮和中肠中都有表达,但丝腺中没有检测到表达。
- 张雨丽程廷才许平震黄璐琳夏庆友
- 关键词:家蚕克隆先天免疫