广西壮族自治区卫生厅重点科研课题(200531)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：蒋明莫碧文王绩英王昌明林云更多>>
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- 应用RNA干扰技术沉默NF-κB基因对肺癌A549细胞的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断肺癌细胞株A549中NF-κBp65基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖的影响。方法:实验以肺癌A549细胞株为材料,分为空白对照、脂质体对照以及siRNA干扰实验共3组。以体外转录法合成dsRNA,并用脂质体转染A549细胞株,RT-PCR法测定肺癌A549细胞内NF-κBp65mRNA的表达。ELISA法检测NF-κB亚单位p65的DNA结合活性的改变。MTT检测细胞增殖情况。结果:与空白对照和脂质体对照组相比,siR-NA组具有明显抑制肺癌A549细胞NF-κBp65mRNA表达的作用(P<0.01),同时ELISA结果显示,siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于空白对照和脂质体对照组(P<0.05)。MTT法显示siRNA组中细胞增殖减慢,生长受到抑制。结论:应用RNAi技术可以有效干扰肺癌A549细胞NF-κBp65的表达。
- 王昌明王绩英曾锦荣莫碧文蒋明林云韦江红
- 关键词：RNA干扰NF-ΚBA549细胞
- RNA干扰技术抑制肺癌细胞外源性绿色荧光蛋白的表达
- 2008年
- 目的:构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体(pshRNA-GFP),观察对肺癌A549细胞的GFP特异性抑制作用。方法:设计针对GFP基因的shRNA序列,构建pshRNA-GFP质粒。与报告基因质粒PEGFP-N1共转染A549细胞,分别用激光共聚焦扫描显微镜(Laser confocal scanning micro-scope,LCSM)和流式细胞术检测干扰效果。结果:瞬时共转染pshRNA-GFP质粒和PEGFP-N1质粒后,荧光显微镜观察结果显示A549细胞中发出荧光的细胞数量减少,荧光强度明显降低。流式细胞术检测阳性细胞百分率降低至32.4%,差异有显著性。结论:靶向GFP的shRNA表达质粒能有效而特异抑制GFP在A549中的表达,A549细胞中存在RNA干扰现象。
- 王昌明王绩英曾锦荣莫碧文蒋明林云韦江红
- 关键词：RNA干扰肺癌绿色荧光蛋白
- RNAi抑制NF-κB基因增强肺癌细胞对TRAIL敏感性的研究
- 2010年
- 目的:探讨RNAi靶向沉默NF-κB基因对TRAIL诱导肺癌细胞凋亡的影响。方法:使用NF-κBp65siRNA转染肺癌A549细胞48h,实验分为空白对照、脂质体对照以及干扰实验3组。采用RT-PCR法测定肺癌A549细胞内NF-κBp65mRNA的表达,MTT法检测siRNA转染前后TRAIL对A549细胞生长抑制作用的变化。结果:与空白对照和脂质体对照组相比,siRNA组具有明显抑制肺癌A549细胞NF-κBp65mRNA表达的作用(P<0.01)。MTT实验表明,转染siRNA后TRAIL对A549细胞的生长抑制作用明显增强,但在同一浓度,转染NF-κBp65siRNA的细胞与未转染组相比,细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。结论:应用RNAi技术可有效干扰NF-κBp65的表达,抑制肺癌A549细胞的增殖,并可增加肺癌细胞对TRAIL的敏感性。
- 王绩英王昌明曾锦荣莫碧文蒋明林云
- 关键词：RNA干扰NF-ΚBTRAIL肺癌细胞
