国家自然科学基金(30600160)
- 作品数：11 被引量：24H指数：3
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- 沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应
- 为探讨RNA干扰（RNA interference,RNAi）乏氧诱导因子-1α（Hypoxia induced factor 1α,HIF-1α）和生存素（Survivin）基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMM...
- 杨巍孙婷
- 关键词：乏氧诱导因子-1Α生存素
- 沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应
- 为探讨RNA干扰（RNA interference,RNAi）乏氧诱导因子-1α（Hypoxia inducedfactor 1α,HIF-1α）和生存素（Survivin）基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC...
- 杨巍孙婷
- 关键词：乏氧诱导因子-1Α生存素
- 文献传递
- miR-210反义慢病毒对乏氧人肝癌细胞放射敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 为探讨miR-210表达下调对乏氧人肝癌SMMC-7721细胞放射敏感性的影响,利用分子生物学技术构建miR-210反义和随机寡核苷酸慢病毒载体,经慢病毒转染建立稳定转染miR-210反义和随机寡核苷酸的人肝癌SMMC-7721细胞株。以实时定量RT-PCR检测乏氧SMMC-7721细胞HIF-1αmRNA表达和miR-210表达,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,克隆存活实验检测细胞放射敏感性变化。结果表明:SMMC-7721细胞乏氧培养后,HIF-1α和miR-210表达随时间逐渐增加,稳定转染miR-210反义寡核苷酸能明显下调miR-210在乏氧细胞的表达;下调miR-210表达明显抑制乏氧SMMC-7721细胞体外增殖活性(P<0.05;P<0.01),诱导G1期阻滞(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.01),提高乏氧SMMC-7721细胞放射敏感性,放射增敏比约为1.21。结果提示,下调miR-210表达可抑制乏氧SMMC-7721细胞体外增殖,诱导凋亡,增强其放射敏感性。
- 杨巍孙婷朱巍曹建平刘芬菊
- 关键词：MIR-210乏氧肝细胞癌
- Egr-IFNγ基因治疗联合^125Ⅰ-脱氧尿嘧啶核苷治疗抑瘤效应的实验研究
- 2008年
- 目的探讨Eg-IFNγ基因治疗联合放射性核素^125Ⅰ-脱氧尿嘧啶核苷治疗方案在荷H22肝癌细胞小鼠体内抑瘤效应及机制。方法小鼠肿瘤局部注射脂质体包裹的质粒，注射后48h，肿瘤局部注射370kBq ^125Ⅰ-UdR。观察各组小鼠治疗后不同时间肿瘤生长率；治疗后第3天，检测肿瘤胞浆蛋白中IFNγ的表达和脾脏CTL细胞毒活性。结果基因-放射核素治疗后第6～15天，pcDNAEg-IFNγ＋^125Ⅰ-UdR组肿瘤生长率明显低于对照组、^125Ⅰ-UdR组及pcDNAEgr-1＋^125Ⅰ-UdR组；基因-放射性核素治疗后第3天，pcDNAEgr-IFNγ＋^125Ⅰ-UdR组肿瘤胞浆蛋白中可检测到IFNγ的表达，其余组肿瘤胞浆蛋白中未检测到IFNγ的表达；pcDNAEgr-IFNγ＋^125Ⅰ-UdR组小鼠脾脏CTL细胞毒活性明显高于其余组（P〈0．01）。结论pcDNAEgr-IFNγ基因治疗联合放射性核素^125Ⅰ-UdR治疗抑瘤效应明显优于单纯^125Ⅰ-UdR放射性核素治疗。
- 赵敬国倪彦君孙婷宋享福马庆杰李修义高凤彤杨巍
- 关键词：Γ干扰素H22细胞碘放射性同位素
- 沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应被引量：3
- 2010年
- 为探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)乏氧诱导因子-1α(Hypoxia induced factor1α,HIF-1α)和生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应,肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向HIF-1α和/或Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射。观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、HIF-1α、增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果表明,治疗开始后第9-21天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤体积显著小于单干扰联合放疗组,且平均生存时间明显延长。治疗结束后1天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤组织Survivin、HIF-1α、PCNA表达和肿瘤间质微血管密度明显低于对照组和放疗组,双干扰联合放疗组移植瘤凋亡细胞百分数较其它组明显升高。结果提示,双干扰联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和单干扰联合放疗。
- 杨巍孙婷曹建平刘芬菊朱巍陈秋
- 关键词：乏氧诱导因子-1Α生存素
- 沉默生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应被引量：1
- 2010年
- 目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应。方法肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射,观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、增殖细胞核抗原(Proliferation Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果 治疗后第3～21d,RNA干扰联合放疗组肿瘤体积明显低于对照组、RNA干扰组和放疗组。RNA干扰联合放疗组裸鼠平均存活时间明显长于对照组、RNA干扰组和放疗组。治疗结束后第1天,RNA干扰联合放疗组裸鼠肿瘤增殖活性和微血管密度明显低于RNA干扰组和放疗组,且凋亡细胞百分数明显升高。结论 RNA干扰Survivin基因联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和RNA干扰治疗。
- 孙婷杨巍曹建平刘芬菊
- 关键词：生存素肝癌
- ^(125)I-脱氧尿嘧啶核苷对重组质粒pcDNAEgr-IFNγ体外辐射诱导表达的作用被引量：3
- 2007年
- 目的研究125I-脱氧尿嘧啶核苷对重组质粒pcDNAEgr-IFNγ在体外培养B16细胞中的辐射诱导表达作用。方法以脂质体介导法将pcDNAEgr-IFNγ重组质粒转染B16细胞,48h后,于培养液中加入125I-UdR,使其终放射性浓度分别为0(空白对照)、1、5、10、20、50kBq/ml,24h后,采用ELISA法定量检测细胞上清中IFNγ。结果转染组细胞IFNγ蛋白表达随着细胞培养液中125I-UdR浓度的增高而增高,放射性浓度为5、10、20、50kBq/ml组IFNγ的蛋白表达明显高于0kBq/ml组(P<0.05~0.001),其中50kBq/ml组表达量最高,为0kBq/ml组的3.66倍;加入50kBq/ml125I-UdR后6h上清中IFNγ表达量即明显升高(P<0.05~0.001),并随时间延长逐渐增加,照后48h达峰值,表达量为未加入125I-UdR时的6.51倍。结论pcDNAEgr-IFNγ重组质粒在125I-UdR诱导下可有效表达IFNγ,并且其辐射诱导IFNγ基因表达增强特性具有一定的量效和时程规律。
- 赵敬国杨巍孙婷张巨李勇高凤彤
- 关键词：B16细胞基因-放射治疗碘放射性同位素
- 乏氧调控因子miR-210的研究进展被引量：7
- 2011年
- 乏氧是实体肿瘤发展过程中的普遍现象,肿瘤乏氧细胞的存在使肿瘤对放化疗的抗性增加,更容易侵袭和转移。乏氧诱导因子(hypoxia-induciblefactors,HIF)调控能量代谢、细胞周期进程和凋亡等相关基因表达使细胞更加适应缺氧微环境,在相关酶或因子的变化过程中起中枢纽带作用。miR-210也参与调控乏氧细胞的生物学功能,在乏氧条件下的表达变化显著,无细胞特异性,已被证实在不同种类的乏氧肿瘤细胞和正常细胞中均以依赖HIF-1的方式表达上调。
- 杨巍
- 关键词：微小RNA乏氧乏氧诱导因子基因表达
- 沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合X射线照射对乏氧细胞的体外抑瘤效应被引量：4
- 2009年
- 为探讨RNA干扰(RNAinterference,RNAi)沉默乏氧诱导因子-1α(Hypoxia induced factor 1α,HIF-1α)和生存素(Survivin)基因联合X射线照射对乏氧人肝癌细胞SMMC-7721的体外抑瘤效应,利用双靶向HIF-1α和Survivin基因载体,采用阳离子脂质体介导法转染SMMC-7721细胞,经乏氧培养36h后,分别以RT-PCR和Western blot法检测HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达,分别以四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术检测细胞存活分数及细胞凋亡。结果表明,转染质粒pGenesil-Survivin-HIF的SMMC-7721细胞中,HIF-1α和Survivin基因mRNA表达水平与对照和阴性干扰组相比明显降低(p<0.05),也未检测到HIF-1α和Survivin蛋白的表达。单、双干扰联合放疗组存活分数较照射组明显降低(p<0.01),双干扰联合放疗组存活分数较其它组也明显降低(p<0.01)。单、双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较对照组明显升高(p<0.01),双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较其它组也明显升高(p<0.01)。结果提示,质粒pGenesil-Survivin-HIF可有效地干扰乏氧SMMC-7721细胞HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达。双干扰联合放疗组对乏氧SMMC-7721细胞的体外抑瘤效应明显优于单干扰联合放疗组。
- 杨巍李艳博赵敬国龚守良曹建平刘芬菊
- 关键词：X射线乏氧诱导因子-1Α生存素
- 化学乏氧人肝癌细胞SMMC-7721中HIF-1α和miR-210的表达被引量：1
- 2011年
- 目的探讨不同浓度CoCl2对人肝癌细胞SMMC-7721乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和miR-210表达的影响以及RNA干扰HIF-1α基因对miR-210表达的影响。方法采用Western blot法检测不同浓度CoCl2培养24 h后SMMC-7721细胞HIF-1α蛋白表达变化,实时定量PCR检测miR-210相对表达量。脂质体介导靶向HIF-1α基因的RNA干扰质粒pGenesil-HIF转染SMMC-7721细胞后,乏氧培养24、48和72 h,分别采用Western blot法和实时定量PCR检测细胞HIF-1α蛋白表达变化和miR-210相对表达量。结果 50和100μmol/L CoCl2培养24 h后细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量与0μmol/L组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05);150和200μmol/L CoCl2培养24 h后细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量均显著高于0μmol/L组(P<0.05或P<0.01)。转染质粒pGenesil-HIF后乏氧培养24、48和72 h,细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量显著低于阴性干扰组(均P<0.01)。结论化学乏氧人肝癌细胞SMMC-7721中HIF-1α和miR-210表达明显上调,RNA干扰HIF-1α基因可明显下调乏氧细胞miR-210表达。
- 杨巍朱巍曹建平刘芬菊
- 关键词：乏氧诱导因子-1ΑMIR-210肝癌RNA干扰
