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国家自然科学基金(31371325)

作品数:10 被引量:28H指数:4
相关作者:吴传芳李佳李骞兰洋刘涛更多>>
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文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 9篇生物学

主题

  • 6篇非编码
  • 6篇非编码RNA
  • 2篇细胞
  • 2篇基因
  • 2篇POLY(A...
  • 2篇纯化
  • 2篇RNAS
  • 1篇蛋白
  • 1篇低表达
  • 1篇调控基因
  • 1篇调控基因表达
  • 1篇信使
  • 1篇信使RNA
  • 1篇增殖
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇诊断标志物
  • 1篇直肠
  • 1篇直肠癌
  • 1篇人凝血因子

机构

  • 7篇四川大学

作者

  • 7篇吴传芳
  • 2篇李佳
  • 1篇宋旭
  • 1篇兰洋
  • 1篇陈金武
  • 1篇陈红军
  • 1篇李骞
  • 1篇肖燕
  • 1篇刘涛

传媒

  • 6篇四川大学学报...
  • 1篇生命科学
  • 1篇Genomi...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 1篇2018
  • 3篇2017
  • 1篇2016
  • 3篇2015
  • 1篇2013
10 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
人凝血因子Ⅶ在CHO/DG44细胞中的表达被引量:1
2015年
PCR法扩增FⅦ基因,构建重组表达质粒FⅦ-pOptiVEC,酶切、测序鉴定.脂质体法将FⅦ-pOptiVEC质粒转入CHO/DG44细胞,并用氨甲喋呤(MTX)进行分级加压筛选,获得高表达重组FⅦ蛋白的阳性细胞克隆.亲和层析法纯化FⅦ,并通过Western-blot检测蛋白表达情况.采用FⅦ促凝活性检测试剂盒(凝固法)检测FⅦ的凝血活性.结果表明筛选出的细胞克隆能稳定表达目的蛋白,MTX加压使其表达量明显升高.促凝活性检测结果证明获得的FⅦ蛋白具有凝血活性.
马登佼陈金武吴传芳
关键词:真核表达凝血活性
一种改进的小非编码RNA cDNA文库构建方法
2017年
本文使用RNA Antisense Purification(RAP)技术富集纯化sncRNA,有效去除了5S、5.8SrRNA.联合使用Tobacco Acid Pyrophosphatase(TAP)和RNA 5′Polyphosphatase处理sncRNA,将5′-端为非单磷酸结构的sncRNA转变成单磷酸结构,增加了文库覆盖率.在sncRNA3′-端添加poly(A)尾结构以及使用oligo(dT)16VN-adapter锚定引物进行逆转录,间接解决了sncRNA 3′-端接头定向连接问题,不再使用价格昂贵的腺苷化接头.改进后的sncRNA cDNA文库容量为3×105cfu,重组率为95%,且测序结果显示,获得的cDNA序列具有较好的完整性.使用这种成本低且行之有效的改进方法,为深入研究sncRNA奠定了基础.
杜光石罗发涛肖燕陈红军吴传芳
关键词:CDNA文库POLY(A)
长非编码RNA LINC00941在结直肠癌中的表达及对细胞增殖的影响被引量:5
2017年
为了研究与细胞分化相关的长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00941在肿瘤发生发展中的作用,通过实时荧光定量PCR技术检测LINC00941在6种不同类型的人类癌细胞和正常胚胎肾细胞HEK-293细胞中的表达水平,结果表明,LINC00941在结直肠癌细胞HCT116和HCT116p53-/-、肺癌细胞A549和NCI-H1299、黑素瘤细胞Stilling中均有较高的表达水平,在结直肠癌细胞中表达水平最高.以结直肠癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织为材料,实时荧光定量PCR检测LINC00941的表达水平发现,肿瘤组织中LINC00941RNA的表达水平显著高于癌旁组织.通过shRNA(short hairpin RNA)干扰技术降低HCT116细胞中的LINC00941 RNA水平,导致细胞增殖速度下降,说明LINC00941与结直肠癌的发生发展相关.
王承恩罗玉贺正池肖雪薇李宗鑫兰洋吴传芳
关键词:结直肠癌SHRNA细胞增殖
G9a对TMS1基因表观调控作用的研究被引量:3
2015年
为探究组蛋白H3K9me2催化酶G9a对甲基化诱导静止基因1(Target of Methylation-induced gene Silencing 1,TMS1)的表观调控作用,通过染色质免疫共沉淀实验检测G9a在TMS1基因启动子区域的结合情况,然后构建shRNA表达载体转入细胞敲低G9a,检测TMS1启动子区域组蛋白H3K9me2修饰程度与TMS1 mRNA表达水平.研究结果显示G9a在TMS1基因启动子区域有结合,敲低G9a后,TMS1基因启动子区域H3K9me2抑制性修饰程度降低,TMS1mRNA表达水平上升.此结果表明G9a可能通过在TMS1基因启动子区域产生H3K9me2抑制性修饰的方式参与了TMS1基因的表观调控.
衡鉴刘涛高江苓吴传芳
关键词:组蛋白
利用eIF4E分离纯化非编码RNA的新方法
2016年
人翻译起始因子eIF4E是特异性识别并结合mRNA帽结构的蛋白质.该文通过克隆人源基因eIF4E,并利用原核细胞大肠杆菌BL21成功表达了具有帽结合功能的eIF4E蛋白,利用该蛋白亲和纯化分离得到了具有帽子结构的RNA.通过对比用oligo(dT)分离得到的非编码RNA,eIF4E法得到了更多种类的非编码RNA.本研究为非编码RNA的分离与发现提供了一个重要的工具.
李佳丁沐然吴传芳
关键词:非编码RNA
低表达长非编码RNA MALAT1对人宫颈癌HeLa细胞体外生长和迁移的影响被引量:5
2015年
设计3个针对MALAT1不同靶序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出有效的siRNA序列,设计并构建短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰质粒,转染到HeLa细胞中,构建低表达MALAT1的稳定细胞株.通过细胞的生长曲线和细胞划痕实验验证降低MALAT1对HeLa细胞增殖和迁移的影响.结果显示MALAT1表达水平在HeLa细胞中得到有效地降低,低表达MALAT1的HeLa细胞生长速度和迁移速度减小.表明MALAT1在HeLa细胞中具有调控细胞增殖和迁移的能力.
齐文川李骞吴传芳
Long non-coding RNA-guided regulation in organisms被引量:3
2013年
It is clear that RNA is more than just a messenger between gene and protein.The mammalian genome is pervasively transcribed,giving rise to tens of thousands of non-coding transcripts.Whether all of these transcripts are functional remains to be elucidated,but it is evident that there are many functional long non-coding RNAs(lncRNAs).Recent studies have set out to decode the regulatory role and functional diversity of lncRNAs.Here we organize these studies to highlight the significant involvements of lncRNAs in regulation of gene expression and human physiological and pathological processes,which are achieved by their interaction with DNA,RNA or protein.
QI WenChuanSONG XuLI Ling
关键词:非编码RNA调控基因表达信使RNARNAS
长非编码RNA与肿瘤
2018年
长非编码RNA的广泛存在,在改变人们对分子生物学认知的同时,也改变了对肿瘤等疾病发生机制的看法。肿瘤全基因组突变测序分析发现,非编码区域的突变比遗传密码子区域的突变更能影响疾病的发生。因为长非编码RNA发挥着精准的调控功能,它们可与各种调控因子相互作用,促进肿瘤等疾病的发生,因此,长非编码RNA可作为临床诊断的标志物和治疗靶点。现将从基因的表达与调控的角度出发,介绍长非编码RNA影响肿瘤发生发展的分子机制。
李佳陈娇宋旭吴传芳
关键词:肿瘤诊断标志物
Non-coding Transcripts from Enhancers:New Insights into Enhancer Activity and Gene Expression Regulation被引量:5
2017年
Long non-coding RNAs(lncRNAs) have gained widespread interest in the past decade owing to their enormous amount and surprising functions implicated in a variety of biological processes.Some lncRNAs exert function as enhancers,i.e.,activating gene transcription by serving as the cis-regulatory molecules.Furthermore,recent studies have demonstrated that many enhancer elements can be transcribed and produce RNA molecules,which are termed as enhancer RNAs(eRNAs).The e RNAs are not merely the by-product of the enhancer transcription.In fact,many of them directly exert or regulate enhancer activity in gene activation through diverse mechanisms.Here,we provide an overview of enhancer activity,transcription of enhancer itself,characteristics of e RNAs,as well as their roles in regulating enhancer activity and gene expression.
Hongjun ChenGuangshi DuXu SongLing Li
关键词:RNAS基因激活
共1页<1>
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