河北省卫生厅科研基金(20110111)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 相关作者：李英刘茂东迟雁青张涛李亚更多>>
- 相关机构：河北医科大学第三医院河北医科大学更多>>
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- 尿酸对人肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤与凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 目的观察尿酸对人肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤及相关凋亡途径的影响，探讨其可能作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2），分别加入不同浓度的尿酸（480μmol/L、720μmol/L）进行干预，于0h、24h、48h收集细胞；应用MitoSOX染色检测活细胞线粒体中ROS的产生；JC-1染色检测线粒体膜电位的变化；Western印迹和免疫荧光化学法对凋亡诱导因子（AIF）和抗增殖因子（prohibitin）蛋白表达进行细胞亚定位及半定量分析；AnnexinV-FITC及PI双染法检测细胞凋亡。结果480μmol/L尿酸刺激细胞24h，线粒体ROS产量较正常对照组升高（P＜0．05），且随尿酸刺激浓度升高和时间延长逐渐上调，线粒体膜电位则逐渐降低。480μmol/L尿酸刺激细胞24h，细胞凋亡率和AIF蛋白表达均较正常对照组无明显变化（P，0．05），而刺激48h时两者升高且其差异有统计学意义（Pc0．05）；720μmol/L尿酸干预24h时，AIF蛋白表达和细胞凋亡率已较正常对照组升高（Pc0．05），干预48h时升高更为显著。480μmol/L尿酸刺激细胞24h，prohibitin蛋白表达较正常对照组下降（P〈0．05），720μmol/L尿酸干预48h，降低最为明显。结论尿酸可诱导HK-2细胞线粒体ROS合成增多，膜电位下降，线粒体相关蛋白prohibitin表达下调，激活线粒体途径导致细胞凋亡。
- 张涛李英迟雁青任韫卓刘茂东牛洪琳
- 关键词：尿酸细胞凋亡线粒体肾小管上皮细胞
- 别嘌醇对2型糖尿病小鼠肾小管间质细胞表型改变的保护作用与机制被引量：1
- 2014年
- 目的探讨别嘌醇对2型糖尿病db/db小鼠肾小管间质转分化的抑制作用及其可能机制。方法将db/m小鼠作为正常对照组(db/m组),将2型糖尿病db/db小鼠随机分为db/db小鼠对照组(db/db组)和db/db小鼠别嘌醇50 mg·kg-1·d-1干预组(db/db+A组),共干预12 w。疗程结束后检测小鼠血糖、血尿酸、血尿素氮、血肌酐、血甘油三酯和24 h尿蛋白水平;采用PAS及Masson染色观察肾脏组织病理学变化;免疫组化染色观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)、转化生长因子β(TGF-β)、抗增殖因子(prohibitin)的表达分布;Western印迹检测肾皮质TGF-β、prohibitin的蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,db/db组血糖、血尿酸、血尿素氮、血肌酐、血甘油三酯和24 h尿蛋白水平均显著增高(P<0.01);肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达水平明显上调(P<0.01);而prohibitin、E-cadherin蛋白表达明显下降(P<0.01)。db/db+A组血尿酸、血尿素氮、24 h尿蛋白水平均较db/db组明显降低(P<0.01)。肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达水平也较db/db组有所下降;prohibitin、E-cadherin蛋白表达有所升高(P<0.01)。肾组织病理检查显示:db/db组肾小管上皮细胞空泡样变、肾小管管腔扩张、肾间质纤维增生等肾小管间质损伤明显,db/db+A组上述病变程度较db/db组减轻。结论别嘌醇对2型糖尿病小鼠肾小管间质损伤具有保护作用,其机制可能与恢复肾组织prohibitin含量、抑制TGF-β过度表达、进而抑制肾小管间质细胞转分化有关。
- 张涛李亚迟雁青刘茂东李英
- 关键词：糖尿病肾病转化生长因子Β别嘌醇
- 别嘌醇对2型糖尿病小鼠肾小管间质prohibitin表达与细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨抑制尿酸药物别嘌醇对2型糖尿病db/db小鼠肾小管上皮细胞prohibitin表达及细胞凋亡的影响。方法将T2DM db/db小鼠随机分为:db/db小鼠对照组(db/db组)、db/db小鼠+别嘌醇50 mg·kg-1·d-1治疗组(db/db+A组);将db/m小鼠作为对照组(db/m组),干预12 w后检测血糖、血尿素氮、血尿酸、血甘油三酯、24 h尿蛋白定量水平;电镜下观察肾小管上皮细胞病理改变;Western印迹及免疫组化法检测肾皮质抗增殖因子(prohibitin)、凋亡诱导因子(AIF)的定位与表达水平;分光光度计检测肾皮质丙二醛(MDA)的含量;原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL法)检测肾小管间质细胞凋亡情况。结果①12 w末,db/db组小鼠血糖、血尿酸、血甘油三酯、血尿素氮、24 h尿蛋白定量、肾组织匀浆MDA含量较db/m组均有不同程度的升高(P<0.05),而db/db+A组血尿酸、血尿素氮、24 h尿蛋白定量、肾组织MDA含量均较同时期db/db组降低(P<0.05)。②免疫组化与Western印迹检测结果均提示,db/db组肾皮质prohibitin蛋白表达量较db/m组明显降低(P<0.01),db/db+A组表达比db/db组有所增强(P<0.01)。db/db组肾皮质AIF蛋白表达明显高于db/m组(P<0.01),db/db+A组表达比db/db组有所降低(P<0.01)。③电镜下db/db组小鼠肾小管上皮细胞线粒体可见肿胀、空泡变,嵴结构消失等病变,db/db+A组上述病变减轻。④TUNEL检测结果:db/db组小鼠肾小管上皮细胞及间质细胞凋亡数量较db/m组明显增多,db/db+A组肾小管上皮细胞凋亡率较db/db组降低。结论别嘌醇可抑制T2DM小鼠肾小管间质细胞凋亡,其机制可能与其降低血尿酸水平后提高肾组织prohibitin的表达,减少局部氧化应激反应,抑制AIF增多并向核内转位有关。
- 张涛迟雁青李亚刘茂东李英
- 关键词：糖尿病肾病凋亡诱导因子凋亡肾小管上皮细胞别嘌醇
