国家自然科学基金(30170298)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
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- 激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其免疫学特性研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究新克隆的激活素受体相互作用蛋白3(ActR IP3)的免疫学特性和其介导Ser/Thr激酶型受体胞内信号传导的作用。方法:以酵母双杂交法发现的ActR IP基因片段作为探针,从小鼠脑cDNA文库中克隆ActR IP3基因。EIA法分析其与激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)结合能力,W estern b lot杂交检测成熟蛋白在组织中的表达,免疫组化染色分析其在脑组织中的分布,采用pcDNA-ActR IP3与CAGA-lux报告基因质粒共转染HEK293细胞分析信号传导作用。结果:克隆的Ac-tR IP3基因全长1 197 bp,编码101个氨基酸残基,EIA分析显示ActR IP3与ActRⅡA具有特异性结合作用,这种作用与Ac-tR IP3的N末端氨基酸序列有关。W estern b lot杂交显示天然ActR IP3相对分子质量约为14 000,在多种组织表达,免疫组化染色显示其在脑组织中的分布以海马及下丘脑为主。通过表达ActR IP3可促进激活素诱导的特异性基因转录活性。结论:ActR IP3属于ActR IP家族新成员,具有特异结合ActRⅡA的能力,并具有促进激活素信号传导的作用。
- 徐桂月张鹏宇王奭骥台桂香劳凤学杨煜崔雪玲柳忠辉
- 关键词：受体相互作用蛋白信号传导免疫组化
- 激活素受体相互作用蛋白2a的全长基因克隆及其与ActRIIA的相互作用
- 2007年
- 为了研究激活素受体介导的信号传导调控机制,从小鼠脑cDNA文库中克隆了新的激活素受体相互作用蛋白2a(ARIP2a)全长基因;并通过序列分析与已发现的ARIP2进行了同源性比较;用RT-PCR方法检测了小鼠ARIP2a及ARIP2 mRNA的组织分布以及激活素刺激RAW264．7细胞后ARIP2a及ARIP2 mRNA表达的差异;同时应用哺乳细胞双杂交、Pull-down实验分析了ARIP2a和激活素IIA型受体(ActRIIA)的相互作用．结果表明,克隆的ARIP2a基因全长1008bp,编码153个氨基酸残基,与ARIP2编码蛋白仅第99位氨基酸不同;ARIP2a mRNA在大脑、垂体、睾丸中表达较高,胰腺、卵巢组织中表达较弱,而在其他组织中未见表达;ARIP2 mRNA则在多种组织内均有表达．激活素刺激RAW264．7细胞后ARIP2a mRNA表达明显降低,而ARIP2 mRNA表达升高．哺乳细胞双杂交和Pull—down实验均证实ARIP2a可与ActR II A相互作用．上述结果提示ARIP2a与ARIP2在组织学分布以及对激活素应答上均存在差异,两者属于ARIP2同源分子．ARIP2a属于ARIP家族新成员,同样可与激活素Ⅱ型受体相互作用．
- 崔雪玲台桂香张红军方琳柳忠辉
- 关键词：激活素受体相互作用蛋白
