辽宁省科技厅自然科学基金(201202053)
- 作品数：9 被引量：64H指数：5
- 相关作者：孙文平罗红杨光陈晨高小平更多>>
- 相关机构：大连医科大学大连医科大学附属第二医院大连市友谊医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlM的体外抗菌效应初步探讨被引量：2
- 2013年
- 目的通过基因工程技术获取金黄色葡萄球菌（ATCC25923）自溶素片段AflM重组蛋白（rAtlM），初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank中金黄色葡萄球菌atlM基因序列（AC：D17366）设计合成特异引物，采用PCR技术扩增相应的序列并构建重组表达质粒pET．32a（＋）／atlM，经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的rAtlM；采用微量肉汤稀释法测定rAtlM对ATCC25923及其苯唑西林诱导耐药株的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）；体外试验测定rAtlM对ATCC25923菌株及其耐药株的抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32a（＋）／atlM，表达的重组蛋白AtlM对ATCC25923标准株和耐药株的MIC分别为8μg／ml和64μg／ml。体外抑菌试验显示rAtlM作用于ATCC25923标准株和耐药株1h后即对细菌生长具有抑制作用（P值分别为0．004和0．026），对标准株作用持续到5h测定点（P=0．012），对苯唑西林耐药株作用持续到3h测定点（P=0．001），5h后与未加药物的对照组相比差异无统计学意义（P=0．102）。结论50μg／ml的rAtlM对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）及苯唑西林耐药株初步显示出一定的抑菌作用，具有作为抗菌药物的可能性。
- 邓燕燕张寒罗红孙文平杨光陈晨
- 关键词：金黄色葡萄球菌自溶素抗菌药基因表达
- 肺炎链球菌自溶素LytA研究进展被引量：5
- 2014年
- 自溶素是一种内源性酶,广泛存在于细菌表面,参与细菌分裂、细胞黏附、细菌自溶以及细胞壁的更新等重要生理活动。本文对肺炎链球菌自溶素LytA结构、功能、调控及应用研究现状进行了综述。
- 邹琴罗红
- 关键词：肺炎链球菌自溶素抗菌药
- 尿培养病原菌分布及耐药性分析被引量：6
- 2014年
- 目的了解医院门诊和住院患者尿培养中病原菌分布及耐药性，为临床治疗提供参考依据。方法651株病原菌分离自2011年1月－2012年12月医院门诊和住院患者的尿液标本，采用MicroScan WalkAway-plus全自动微生物鉴定和药敏分析系统进行菌株鉴定和药敏试验，采用WHONET5．6软件进行统计分析。结果共分离病原菌651株，检出排前3位依次为大肠埃希菌、粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌，分别占46．2％、16．6％、8．5％；301株大肠埃希菌中有219株产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs），占72．8％；大肠埃希菌对阿莫西林／克拉维酸、阿米卡星、亚胺培南较为敏感，耐药率为12．0％、9．O％和1．3％；132株肠球菌属中发现2株耐万古霉素肠球菌（VRE），均为粪肠球菌，万古霉素对这两株VRE的MIC为32～326mg／L，粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素和利奈唑胺的耐药率均较低；分离的凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中，最常见的是表皮葡萄球菌占50．9％；55株CNS中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率为65．5％，CNS对呋喃妥因、克林沙星、利奈唑胺、利福平、万古霉素较敏感。结论临床应根据尿培养药敏结果合理应用抗菌药物，控制耐药率的上升。
- 邓燕燕唐之俭王芳于晓然费凤英
- 关键词：尿培养病原菌耐药性
- 肺炎链球菌自溶素对感染性肺炎的诊断价值被引量：9
- 2015年
- 目的通过基因原核表达技术获取肺炎链球菌自溶素LytA重组蛋白(rLytA),探讨其对感染性肺炎患者的血清学诊断价值。方法根据Genbank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物;采用PCR技术以肺炎链球菌基因组DNA为模板扩增lytA基因序列;构建重组表达质粒pET32a(+)/lytA,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性;以rLytA为抗原,建立ELISA反应模式,测定2013年3-6月36例临床诊断为CAP并经细菌学确定的患者血清标本中相应IgG和IgM抗体,评价对肺炎链球菌感染性肺炎的诊断价值。结果成功构建原核表达质粒pET32a(+)/lytA,表达的rLytA具有较好的抗体结合活性;CAP患者血清IgM和IgG类抗LytA的抗体滴度均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其诊断的敏感性均高于常规的痰培养和血培养(P<0.01)。结论以重组蛋白LytA为抗原建立ELISA反应模式可用于肺炎链球菌感染的血清学诊断,快速、客观,具有一定的应用价值。
- 邹琴孙文平杨光周杰罗红
- 关键词：肺炎链球菌自溶素原核表达酶联免疫吸附试验
- CCP、AKA、APF联合RF检测对类风湿性关节炎的诊断意义被引量：22
- 2019年
- 目的探究抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角质蛋白(AKA)抗体、抗核周围因子(APF)抗体联合类风湿因子(RF)检测对类风湿性关节炎(RA)的临床诊断价值。方法检测94例RA患者和69例非RA自身免疫疾病患者血清中该4项指标,并将该4种指标的敏感度、特异度、阳性预测值以及阴性预测值进行比对分析。结果 RA组患者该4项指标的阳性率均明显高于非RA组(P<0.05)。RA组中CCP、AKA、APF和RF的敏感度分别为79.79%、45.74%、48.94%、75.53%,特异性分别为95.65%、94.20%、91.30%、79.71%,其中抗CCP与RF比较差异有统计学意义(P<0.05)。RA组中CCP、AKA、APF和RF阳性预测值分别为96.15%、91.49%、88.46%、83.53%。4项指标联合检测中,任一指标阳性即判定RA阳性的敏感度为89.36%,4项指标均为阳性即判定RA阳性的特异度高达98.55%,阳性预测值达96.77%。结论抗CCP抗体具有较高的灵敏度和特异性。4项指标联合检测可提高RA诊断的准确性,有利于RA患者早期诊断和治疗。
- 孙文平宋来玉綦霞陈艳君高小平
- 关键词：CCP抗体类风湿性关节炎
- 金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlG体外抗菌效应探讨被引量：1
- 2013年
- 目的通过基因原核表达技术获取金黄色葡萄球菌(ATCC25923)自溶素片段AtlG重组蛋白,初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank中的atlG基因序列设计合成特异引物,采用PCR技术以金黄色葡萄球菌的基因组为模板扩增相应atlG基因序列;分别构建克隆载体PMD19-T-atlG和表达载体pET-32а(+)/atlG;构建的表达载体经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的重组蛋白AtlG;采用微量肉汤稀释法测定AtlG对金黄色葡萄球菌及其苯唑西林耐药株的最低抑菌浓度(MIC),动态测定金黄色葡萄球菌及其耐药株对AtlG的药物敏感性,初步探讨重组蛋白AtlG的体外抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32а(+)/atlG,表达的重组蛋白AtlG对金黄色葡萄球菌标准株和苯唑西林耐药株的MIC分别为16μg/ml和64μg/ml;相比于未加药物的对照组,rAtlG对标准株作用1h后细菌数显著降低(P=0.045),抑菌效果持续到5h测定点(P=0.006);对苯唑西林耐药株作用3h后显示出抑菌效果(P=0.003),5h后与对照组相比差异无统计学意义。结论 50μg/ml的rAtlG对金黄色葡萄球菌标准株抑菌作用发生快、持续时间长,对苯唑西林耐药株也有一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性。
- 王运铎邓燕燕罗红孙文平杨光
- 关键词：金黄色葡萄球菌自溶素抗菌药物最低抑菌浓度
- 伏立康唑联合两性霉素B治疗曲霉菌性脓胸1例报道被引量：5
- 2013年
- 目的分析1例曲霉菌性脓胸合并支气管胸膜瘘患者的诊治情况,为临床诊治提供参考。方法使用伏立康唑联合两性霉素B治疗1例曲霉菌性脓胸合并支气管胸膜瘘患者。结果伏立康唑静脉使用69d、口服10d,与两性霉素B联合使用53d,脓胸好转。结论全身使用伏立康唑联合两性霉素B胸腔灌注是安全、可靠的,也取得了良好的治疗效果。
- 徐健刘春芳王运铎许凝韩雪任丽娜高岩孔庆龙张力强
- 关键词：脓胸曲霉菌病伏立康唑两性霉素B
- 自身抗体检测对自身免疫性肝炎的临床诊断价值被引量：10
- 2018年
- 目的通过对肝炎患者多种自身抗体检出率的比较,探讨其在自身免疫性肝炎中的临床诊断价值。方法对75例自身免疫性肝炎(AIH)患者,64例非AIH肝炎患者和78例健康体检者进行自身抗体检测。采用免疫印迹法检测抗线粒体抗体-M2(AMA-M2)、抗肝肾微粒体-1抗体(LKM-1)、抗肝细胞胞质抗原-1抗体(LC-1)、抗可溶性肝抗原/肝-胰抗原抗体(SLA/LP);采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA),并对各检测指标进行比对分析。结果AIH组患者ANA、AMA-M2、LKM-1、LC-1、SLA/LP检测阳性率分别为100.0%、28.0%、9.3%、1.3%、10.7%均高于非AIH组患者的56.2%、3.1%、0.0%、0.0%、0.0%,且除LC-1外其余差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测ANA、AMA-M2、LKM-1、LC-1及SLA/LP对诊断自身免疫性肝炎具有重要的临床意义。
- 高小平郭连英陈晨陈艳军孙文平
- 关键词：自身免疫性肝炎自身抗体
- 肺炎链球菌重组蛋白LytA体外抗菌效应探讨被引量：8
- 2015年
- 目的构建肺炎链球菌(ATCC49619)自溶素lytA基因的原核表达载体,并在大肠埃希菌表达系统中表达,获取LytA重组蛋白(rLytA),初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank中的肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物,采用PCR技术从肺炎链球菌ATCC49619标准株基因组中扩增lytA基因序列,分别构建克隆载体PGM-T/lytA和表达载体pET32a(+)/lytA,将pET32a(+)/lytA转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后用透析袋等电点洗脱技术纯化目的蛋白rLytA;采用微量肉汤稀释法测定rLytA和青霉素G对肺炎链球菌及其青霉素G耐药株的最低抑菌浓度(MIC),动态测定肺炎链球菌及其耐药株对rLytA和青霉素G的药物敏感性,评价rLytA的体外抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET32a(+)/lytA,获得的rLytA对肺炎链球菌标准株和青霉素G耐药株的MIC分别为8μg/ml和16μg/ml;以rLytA对标准株及耐药株MIC的3倍浓度,分别作用于标准株及耐药株,与未加药物的对照组相比,rLytA作用于标准株3h后细菌数显著减少(P<0.05),且效果持续至7h(P<0.05);对青霉素G耐药株作用3h时显示具有抑菌效果(P<0.01),且抑菌作用持续至7h(P<0.01)。结论一定浓度的rLytA对肺炎链球菌标准株和耐药株均显示出抑菌作用,且持续时间长,具有作为抗菌药物的可能性。
- 谢兴凤吕明睿罗红孙文平杨光陈晨
- 关键词：肺炎链球菌自溶素抗菌药物基因表达
