国家高技术研究发展计划(2004AA626110)
- 作品数：2 被引量：16H指数：1
- 相关作者：沙珍霞陈松林任国诚叶寒青更多>>
- 相关机构：中国海洋大学中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 漠斑牙鲆胚胎细胞系的建立与鉴定被引量：15
- 2007年
- 漠斑牙鲆（Paralichthyslethostigma）是中国近年新开发的重要海水养殖鱼类，本研究以漠斑牙鲆囊胚期胚胎为材料，探索了鱼类胚胎细胞分离和培养的条件，建立了漠斑牙鲆胚胎细胞培养技术。建立的漠斑牙鲆胚胎细胞系（SFEC）至今已经培养了240多天，传至80多代。SFEC的完全培养基采用添加抗生素、胎牛血清（FI强）、花鲈血清（sPS）、成纤维生长因子（bF（正）的DMEM。SFEC形态小而呈圆形、多边形，在培养基中生长迅速。本实验检测了温度、胎牛血清浓度、成纤维生长因子对SFEC生长的影响。在24--30℃之间SFEC生长良好，但当温度低于18℃时细胞生长速度明显减慢。在含15％FBS的培养基中，SFEC生长速度明显比在含7．5％FBS的培养基中快，在培养基中添加bFGF可以使细胞生长速度显著提高。SFEC的二倍体核型为2n=6st＋42t。将GFP报告基因通过脂质体介导的方法转入SFEC中并成功地获得了表达，转化率为20％。[中国水产科学，2007，14（4）：579—583]
- 任国诚陈松林沙珍霞
- 关键词：胚胎细胞系漠斑牙鲆核型GFP报告基因
- 三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较被引量：1
- 2006年
- 通过3种脂质体(genejammer,genejuice和metafectene)介导绿色荧光蛋白基因转化花鲈胚胎干细胞,探讨不同脂质体介导的花鲈胚胎干细胞(LJES1)的转化效率,以及影响外源基因转化效率的因素,如细胞接种时间、初始接种密度、DNA和脂质体用量以及它们之间的比例等。实验发现,genejammer转化LJES1细胞效率最高,适合于该细胞系的转化。对于同一种脂质体,DNA与脂质体用量的比例对于绿色荧光蛋白基因转化LJES1最为重要,DNA与genejammer的比例为1∶6时,转化效率最高,为27.3%;DNA与genejuice的比例为1∶4时,转化效率最高,为12.1%;而DNA与metafectene的比例为1∶3时,转化效率达到最高,为5.3%。随着DNA、脂质体量的增加,转化效率有所提高,但达到一定的用量后,转化效率反而下降。
- 叶寒青陈松林沙珍霞
- 关键词：脂质体绿色荧光蛋白胚胎干细胞
