浙江省自然科学基金(Y204210)
- 作品数：11 被引量：32H指数：4
- 相关作者：张丽慧魏尔清赵建波陈文健李成檀更多>>
- 相关机构：杭州师范大学浙江大学浙江衢州职业技术学院更多>>
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- 5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯途径不参与大鼠C6胶质瘤细胞缺氧缺糖损伤被引量：3
- 2008年
- 目的：观察缺氧缺糖（OGD）是否损伤大鼠C6胶质瘤细胞,以及5-脂氧酶（5-LOX）/半胱氨酰白三烯（CysLT）途经是否参与OGD损伤。方法：在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞化学法观察5-LOX蛋白的细胞内分布;以RT-PCR法检测CysLT1和CysLT2受体mRNA表达;并观察白三烯D4（LTD4）对C6细胞的作用。结果：OGD4-8h并恢复24-72h后,可诱导C6细胞损伤;5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂对OGD损伤无明显作用。OGD未诱导5-LOX的核膜移位。C6细胞高表达CysLT2受体,但CysLT1受体表达很微弱,OGD不影响它们的表达。此外,LTD4对C6细胞没有明显作用。结论：OGD可诱导C6细胞损伤,但5-LOX/CysLT途径不参与OGD诱导的损伤。
- 黄雪琴黄晓佳张丽慧戚玲玲卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：白三烯拮抗剂
- 半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定被引量：6
- 2009年
- 目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。
- 陈丽萍赵春贞史文珍戚玲玲卢韵碧张咏梅张丽慧方三华鲍建芳沈建根魏尔清
- 关键词：受体半胱氨酰白三烯受体多克隆抗体
- Zileuton对脑缺血后空间学习记忆障碍的改善作用被引量：3
- 2011年
- 目的观察5-脂氧酶选择性抑制剂Zileuton对全脑缺血后空间学习记忆能力的改善作用。方法以两侧颈总动脉阻断合并低血压法诱导大鼠全脑缺血模型,Zileuton 30 mg/kg灌胃给药,共7天。应用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,海马切片观察CA1神经元病理变化。结果 Morris水迷宫实验表明,全脑缺血后大鼠活动总路径和逃避潜伏期明显延长,空间学习记忆能力下降(P<0.05或P<0.01);Zileuton 30 mg/kg提高全脑缺血大鼠Morris水迷宫实验学习记忆成绩(P<0.05)。海马病理切片观察显示,全脑缺血后海马CA1神经元损伤(P<0.01),Zileuton减轻脑缺血后神经元损伤(P<0.05)。结论 5-脂氧酶抑制剂Zileuton能改善大鼠全脑缺血后空间学习记忆障碍,其机制与药物对海马CA1神经元的神经保护作用有关。
- 郑小娟陈文健赵建波李成檀张丽慧
- 关键词：ZILEUTON脑缺血学习记忆
- 半胱氨酰白三烯受体与脑损伤关系的研究进展被引量：11
- 2008年
- 近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤。CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,介导星形胶质细胞损伤;新发现的GPR 17也与脑缺血损伤有密切关系。加深CysLT受体在脑损伤及神经保护中作用的认识,将为CysLT受体作为药物靶点筛选和开发防治脑损伤的药物提供新的途径。
- 张丽慧赵建波王艳芳张纬萍魏尔清
- 关键词：半胱氨酰白三烯受体脑疾病脑损伤
- 新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。
- 戚玲玲卢韵碧史文珍赵春贞张咏梅陈丽萍张丽慧方三华鲍建芳沈建根魏尔清
- 关键词：受体白三烯半胱氨酸半胱氨酰白三烯受体多克隆抗体
- 5-脂氧酶在全脑缺血海马CA1神经元损伤中的作用被引量：6
- 2013年
- 目的:观察全脑缺血后海马神经元损伤中5-脂氧酶(5-LOX)的表达变化,并探讨5-LOX选择性抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法:在双侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,Western blot方法检测脑缺血损伤中5-LOX的表达改变;免疫组织化学及免疫荧光双标染色方法观察5-LOX的分布特征。应用5-LOX选择性抑制剂zileuton(10、30、50 mg/kg,缺血前后2 h灌胃给药,以后每日2次,共3 d)观察脑缺血后海马神经元的损伤变化。结果:大鼠全脑缺血后3～14 d,海马CA1神经元产生迟发性神经元死亡;海马5-LOX表达在全脑缺血后1～7 d增高,并于3 d达高峰;在海马CA1区,5-LOX主要表达在神经元胞浆,脑缺血后5-LOX发生核移位现象。5-LOX抑制剂zileuton(30和50 mg/kg)能减少全脑缺血后海马CA1神经元的死亡。结论:5-LOX参与大鼠全脑缺血诱导的海马神经元损伤,5-LOX抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤有保护作用。
- 陈文健李成檀赵建波张晓燕韩华阳魏尔清张丽慧
- 咖啡酸对氧化应激诱导的PC12细胞5-脂氧酶激活的抑制作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨咖啡酸是否通过抑制氧化应激诱导的5-脂氧酶（5-LOX）激活而减轻细胞损伤。方法稳定转染绿荧光蛋白（GFP）-5-LOX的PC12细胞,预先给予咖啡酸0.001~10μmol.L-1和对照药MK886,30min后观察缺氧缺糖/恢复（OGD/R）及过氧化氢（H2O2）160μmol.L-1处理后的变化。MTT法和碘化丙啶染色法分析细胞存活率和死亡率;荧光显微镜观察OGD 2 h/R2 h和H2O2处理40 min时5-LOX的核膜移位;ELISA法测定OGD 2 h/R 3 h时5-LOX代谢产物的生成;DCF法检测OGD 2 h/R 0.5 h细胞内活性氧（ROS）的产生。结果 OGD 2 h/R 24 h GFP-5-LOX转染和GFP-转染PC12细胞的存活率分别为（63.1±6.6）%和（70.7±6.9）%;H2O2处理24 h细胞存活率分别为（62.5±7.7）%和（75.7±9.5）%。在GFP-5-LOX转染的PC12细胞中,咖啡酸和对照药MK886可使OGD/R细胞存活率从（63.1±6.6）%分别增加到（87.3±2.0）%和（89.9±6.3）%,细胞坏死率从（31.4±1.5）%降低到（10.1±2.0）%和（11.7±1.3）%（P〈0.01）;使H2O2处理细胞存活率从（62.51±7.65）%增加到（92.59±4.02）%和（75.31±6.60）%;使OGD/R细胞CysLTs的生成从261.1±33.7降低到108.5±16.7和（90.6±19.5）ng.g-1蛋白（P〈0.01）。此外,咖啡酸抑制OGD/R诱导PC12细胞的ROS产生,IC50值为8.021μmol.L-1;抑制OGD/R诱导的GFP-5-LOX转染的PC12细胞5-LOX核膜移位,IC50值为0.974μmol.L-1;抑制H2O2诱导的GFP-5-LOX转染的PC12细胞5-LOX核膜移位,IC50值为0.501μmol.L-1;MK886无上述作用。结论咖啡酸可抑制氧化应激诱导的PC12细胞5-LOX激活,对缺血损伤的PC12细胞具有保护作用。
- 李成檀张丽慧赵建波方三华张纬萍魏尔清
- 关键词：咖啡酸氧化应激PC12细胞5-脂氧酶
- 5-脂氧酶与脑缺血炎症反应的关系被引量：3
- 2009年
- 炎症反应在脑缺血损伤中发挥重要作用。5-脂氧酶是代谢花生四烯酸产生炎症介质白三烯类的关键酶,其产物中半胱氨酰白三烯可诱导强烈的外周及中枢炎症性病变。因此,深入了解5-脂氧酶与脑缺血后炎症损伤的关系,对脑缺血损伤机制及新型抗脑缺血药物研究均有积极意义。
- 陈文健张丽慧
- 关键词：5-脂氧酶脑缺血炎症半胱氨酰白三烯受体
- CysLT受体与脑缺血
- 2008年
- 在脑缺血病变中,CysLT受体中起重要作用。在缺血损伤脑组织,CysLT受体mRNA和受体蛋白表达增加,CysLT受体拮抗剂可抑制缺血诱导的CysLT受体表达并保护脑缺血损伤。CysLT受体是脑缺血病理途径中的关键因子,在脑缺血的治疗及抗脑缺血药物研制中具有重要意义。本文就上述脑缺血损伤过程中的CysLT受体作用机制进行综述。
- 张丽慧魏尔清袁汇宁倪建芬
- 关键词：半胱氨酰白三烯受体脑缺血
- CysLT_1受体拮抗剂montelukast对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用被引量：2
- 2012年
- 目的观察全脑缺血后海马神经元损伤及半胱氨酰白三烯1(cysteinyl leukotriene 1,CysLT1)受体表达变化,评价CysLT1受体选择性拮抗剂montelukast对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法两侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,海马切片检查CA1神经元病理改变。免疫组化染色观察CysLT1受体的表达变化,montelukast缺血前后多剂量灌胃给药,评价其对全缺血后CA1神经元损伤的影响。结果全脑缺血后2～3 d,海马CA1区神经元损伤、CysLT1受体表达上调,Montelukast(0.5和1.0 mg/kg)剂量依赖性地减轻全脑缺血后海马神经元损伤(P<0.05和P<0.01);montelukast(0.5 mg/kg,连续给药5 d)在缺血后30 d对CA1神经元损伤仍有保护作用(P<0.05)。结论 CysLT1受体参与全脑缺血后海马神经元损伤,CysLT1受体拮抗剂montelukast对全脑缺血CA1神经元损伤有剂量依赖性和长期的保护作用。
- 赵建波林晓霞陈文健张詹明朱伟荣李成檀张丽慧
- 关键词：全脑缺血半胱氨酰白三烯海马
