国家自然科学基金(30170698)
- 作品数：24 被引量：322H指数：11
- 相关作者：雷连成韩文瑜杜锐韦旭斌褚秀玲更多>>
- 相关机构：吉林大学解放军军需大学河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 人参总皂苷及其衍生物抗Ⅰ型马立克氏病毒作用的电镜观察被引量：2
- 2007年
- 应用透射电镜负染技术,观察人参总皂苷及其衍生物对Ⅰ型马立克氏病毒(MDVⅠ)作用后病毒颗粒结构改变情况,旨在深入探讨人参总皂苷及其衍生物抗MDV的作用机理。结果显示,病毒颗粒变形,大小不均匀,核心缺损或均质化,包膜裸露或破损以及病毒颗粒凝集融合成块,结构模糊不清,在相同条件下衍生物比人参总皂苷对MDV的破坏作用强。提示人参总皂苷及其衍生物在体外对MDVⅠ(MDV-Ⅰ)病毒颗粒的形态结构、表面成分和分散均有破坏作用,而衍生物作用更加显著。
- 褚秀玲张煜苏建青靳书刚孙秀梅郭志廷王鲁伊鹏霏韦旭斌
- 关键词：人参总皂苷马立克氏病毒
- 金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性与NorA基因mRNA表达水平的关系被引量：5
- 2006年
- 提取金黄色葡萄球菌的总RNA，应用荧光定量RT-PCR对多药耐药转运蛋白NorA基因mRNA表达水平进行定量检测的结果表明：中度耐药（CIP）的菌株（4mg／L≤MIC≤64mg／L）NorA基因mRNA表达水平为敏感菌株的5～17倍．强耐药菌株（MIC≥128mg／L）为敏感菌的1～2倍。
- 杜锐韩文瑜雷连成
- 关键词：金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性MRNA表达水平
- 枯草杆菌多重耐药基因bmr的克隆及原核表达被引量：4
- 2005年
- 根据B enB ank上已公布的多重耐药基因bm r的编码序列设计1对引物,以枯草杆菌基因组为模板,扩增出1 170bp的DNA片段,将所得片段与pM D-18T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其扩增片段测序结果与文献报道序列同源性达98.81%。将该片段定向克隆到pET-28a(+)表达质粒中,提取质粒转化到BL 21(DE 3)中,经1 mm o l/L IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出bm r基因的表达产物。
- 宋战昀韩文瑜雷连成冯新
- 关键词：枯草杆菌克隆原核表达
- 金黄色葡萄球菌norA外输泵中药耐药抑制剂的筛选被引量：27
- 2007年
- 针对金黄色葡萄球菌与氟喹诺酮类药物耐药相关的外输泵基因norA,构建了含有norA基因的pUT-norA多重耐药载体及相应的金黄色葡萄球菌多重耐药菌株,以所构建菌株为试验菌株,应用浸渍法、煎煮法制备了64种中药提取物,经联合药敏试验,从无抑菌作用的50种中药提取物中筛选出对金黄色葡萄球菌耐药性有抑制作用的外输泵蛋白抑制剂:浙贝母、射干、穿心莲和菱角。
- 宋战昀冯新韩文瑜丁壮陈敖第雷连成
- 关键词：金黄色葡萄球菌外输泵中药
- 猪链球菌耐药性的检测被引量：17
- 2004年
- 采用药敏纸片扩散法、微量稀释法及双纸片扩散法对分离自长春地区的 2 2株猪链球菌进行了耐药性测定。结果表明 ,82 %～ 10 0 %的菌株对大环内酯 林克酰胺 链阳菌素B(MLSB)类、四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类、氨基糖苷类耐药 ,但对青霉素和氨苄青霉素不耐药 ,对利福平的耐药率为 5 % ;82 %的菌株为多重耐药 (MDR) ;91%的菌株为MLSB 型耐药 ,其中构成型耐药占95 %。除青霉素外 ,其他 5种抗生素的MIC50 和MIC90 高度集中 (≥ 12 8μg/mL)。
- 杨建江韩文瑜雷连成杜锐王兴龙江文正
- 关键词：猪链球菌抗生素耐药性
- 大肠杆菌耐药性抑制剂作用机制的初步研究被引量：31
- 2004年
- 20株人源和动物源性大肠杆菌在体外经黄连提取物(命名为耐药性抑制剂IT2)作用后,对氟喹诺酮类抗菌药、庆大霉素和多西环素的耐药性明显被抑制。选取经抑制剂IT2作用后耐药性变化显著的5对菌株进行质粒提取和电泳检测,发现J0、H004、J3、J2等4株菌作用前均有质粒带,与其相对应的耐药性抑制剂作用后的菌株ITJ0、ITH004、ITJ3、ITJ2质粒带全部消失,只有菌株J1经抑制剂IT2作用前后质粒带无变化。提取外膜蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,菌株J1、J3、J0缺少OmpF、OmpA,J2仅缺少OmpA,经耐药性抑制剂作用后,J1、J3、J0的OmpF均由缺失恢复为表达,OmpC的表达量呈显著增加,H004没有变化。结果表明耐药性抑制剂IT2对大肠杆菌的部分耐药性具有良好的抑制作用,其作用与阻碍耐药质粒拷贝、恢复外膜通道蛋白正常表达关系密切。
- 雷连成韩文瑜段艳
- 关键词：大肠杆菌耐药性抑制剂质粒抗菌药
- 长春地区猪链球菌对大环内酯和林克酰胺类耐药的分子机制研究被引量：12
- 2004年
- 目的 分析长春地区猪链球菌耐大环内酯类和林克酰胺类的分子机制。方法 采用微量稀释法和双纸片扩散法分别测定相关抗生素的耐药谱和红霉素耐药型 ,并以猪链球菌的染色体DNA为模板 ,PCR扩增ermB基因和mefA/E基因 ,然后将其克隆到pMD18-T载体中 ,用双脱氧链末端终止法测定DNA序列后进行序列分析。结果 2 2株猪链球菌的临床分离菌株均扩增出ermB基因 ,而未扩增出mefA/E基因 ;对四环素、环丙沙星和大环内酯和克林霉素有高的耐药率和耐药水平 ;红霉素的耐药型以CR型为主。同源性分析显示 ,ermB基因的差异为 36 %～ 10 0 % ,与GenBank中的肺炎链球菌、粪肠球菌等的erm基因有 98%～ 10 0 %的同源性。结论 长春地区猪链球菌对MLSB 的耐药是红霉素甲基化转移酶所介导的 ,以CR型为主的耐药 ,编码该类耐药的是ermB基因 ,并与人源及动物源性的耐药基因可能存在着广泛的交换。
- 杨建江韩文瑜雷连成杜锐王兴龙江文正
- 关键词：猪链球菌大环内酯耐药分子机制
- 金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药性与gyrA、gyrB突变的关系研究被引量：6
- 2006年
- 为了探讨金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮耐药性与gyrA、gyrB突变的关系,本研究对氟喹诺酮敏感金黄色葡萄球菌进行耐药诱导,获得一系列不同氟喹诺酮耐药水平的人工诱导耐药菌,应用PCR扩增野生菌和人工诱导菌的gyrA、gyrB基因并测序,经核苷酸和氨基酸序列分析表明:氟喹诺酮耐药菌的gyrB基因无突变,氟喹诺酮耐药菌的gyrA有Ser85→Leu和Ser84→Pro的突变。实验结果表明:gyrA突变是金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药水平增高的主要原因。
- 杜锐韩文瑜雷连成
- 关键词：金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性GYRA突变
- 动物源性大肠杆菌药物敏感性检测及耐药性分析(英文)被引量：32
- 2005年
- 用2000～2003年自兽医临床分离的393株大肠杆菌,对9种常用抗生素的敏感性进行了检测.依据菌株采集时间、菌株来源对菌株耐药性的变化及耐药性产生之间的相关性进行了较全面的统计分析,并随机选出39株典型的多重耐药菌株观察了对小鼠的致病性.结果显示,393株分离菌对四环素、庆大霉素、氯霉素、氨苄青霉素、利福平、卡那霉素、呋喃妥因、链霉素和环丙沙星的耐药率分别为93.89%, 57.76%,78.63%, 77.86%,92.11%, 47.33%,46.82%, 76.84%,74.81%;按照耐药种类可将分离菌株分为8类,最多耐药9种,最少耐药2种,约80%以上的菌株耐受7种所试药物.猪源大肠杆菌对庆大霉素、氨苄青霉素、卡那霉素的耐药率高,而鸡源大肠杆菌对四环素、氯霉素、链霉素和环丙沙星的耐药率显著高于猪源大肠杆菌.2000年和2003年分离菌株的耐药率相比,氯霉素从67.33%上升到90.58%,氨苄青霉素从71.29%上升到84.81%,链霉素从73.76%上升到80.10%,环丙沙星从61.88%上升到88.48%,庆大霉素却从61.39%下降到53.92%.95%的菌株(37/39)可直接在72 h内致死感染小鼠(2.0×107CFU·鼠-1).5%不能直接致死小鼠的菌株经小鼠体内2～3次传代,可直接致死感染小鼠.试验表明,兽医临床分离菌株普遍存在多重耐药性,并随分离时间、寄主种类等耐药率出现动态变化,耐药类型间具有一定的相关性.耐药菌株对小鼠仍具有很强的致病性,少数菌株致病性出现暂时减弱,但在体内几次传代即可恢复.
- 雷连成郑丹韩文瑜吉风涛徐卫东
- 关键词：大肠杆菌药物敏感性耐药性
- 金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药性与grlA、grlB突变的关系被引量：4
- 2007年
- 为了探讨金黄色葡萄球菌的氟喹诺酮耐药性与grlA、grlB基因突变的关系,从52株野生型金黄色葡萄球菌中筛选出1株对氟喹诺酮敏感的金黄色葡萄球菌,对其进行耐药诱导,获得一系列不同氟喹诺酮耐药水平的金黄色葡萄球菌,并对其grlA、grlB基因进行PCR扩增、测序及序列分析。结果表明,金黄色葡萄球菌的氟喹诺酮耐药性与grlB基因突变无关,而与grlA的丝氨酸(Ser)80→苯丙氨酸(Phe)和谷氨酸(Glu)84→赖氨酸(Lys)突变密切相关。金黄色葡萄球菌grlA的80位氨基酸和84位氨基酸双突变是其氟喹诺酮耐药性提高的标志之一。
- 杜锐韩文瑜雷连成
- 关键词：金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性基因突变
