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短日照处理对墨西哥玉米开花与种子成熟的影响被引量：7: 2006年; 试验结果表明:短日照处理可以诱导墨西哥玉米在7月份提前开花,收获到成熟的种子。在自然条件下,墨西哥玉米在山东9月下旬开花散粉,10月上旬不能获得完全成熟的种子,10月下旬可以获得部分成熟种子,成熟种子所占百分率为44.23%。经萌发试验表明,10月上旬收获的种子发芽率为7.25%,10月下旬收获的为34.92%,这说明部分未完全成熟种子的胚发育成熟,具有萌发能力。春播、夏播、秋播的8个玉米骨干自交系的散粉期在7月上旬、8月上旬和9月下旬。因此,在人工诱导或自然条件下,普通(转基因)玉米与一年生墨西哥玉米的花期是可以相遇的,存在转基因玉米与墨西哥玉米间基因漂移的可能。; 连丽君李朝霞王雷伦君张可炜; 关键词：短日照墨西哥玉米基因漂移

农杆菌介导的玉米自交系愈伤组织的转化被引量：14: 2003年; 以农杆菌LBA4 4 0 4介导将外源基因导入玉米骨干自交系齐 319、掖 5 15、掖 5 0 2等胚性愈伤组织 ,并由筛选出的抗性愈伤组织再生出可育植株。农杆菌浓度、共培养时间和玉米的基因型显著影响农杆菌介导的玉米愈伤组织的转化率。农杆菌的浓度OD60 0 0 5～ 0 7,共培养时间 3～ 4天时转化率较高。在相同条件下不同基因型的玉米胚性愈伤组织的转化率为 3 3%～ 10 %。; 权瑞党尚梅张举仁; 关键词：玉米自交系愈伤组织农杆菌介导基因转化转化率

小盐芥(Thellungiella salsuginea)CBF1基因的克隆被引量：17: 2005年; CBFs(CRT/DREbinding factor)是结合DNA顺式元件CCGAC的转录因子.拟南芥中CBFs由一个小的基因家族编码,包括3个成员:CBF1、CBF2和CBF3,它们在植物抗逆性调控中起重要作用.为了获得高度耐盐耐旱的转基因植物,我们以盐生植物小盐芥为材料,依据拟南芥中CBF1的序列信息设计引物,扩增出小盐芥中CBF1的部分序列,然后使用SMARTTMRACE等方法,从小盐芥中克隆到全长的CBF1cDNA序列,进而重组到植物表达载体中,为植物抗逆基因工程提供了有用基因.; 高峰高强岳桂东杨爱芳张举仁; 关键词：小盐芥 CBF基因克隆快速扩增CDNA末端

单子叶植物的FLP/frt位点特异性重组系统的构建被引量：3: 2006年; 来自于啤酒酵母2μm质粒的FLP/frt位点特异性重组系统可用于转基因植物(细胞)筛选完成后去除选择标记基因.水稻肌动蛋白actin基因启动子和玉米泛素ubiquitin基因启动子可有效驱动单子叶植物中外源基因的转录.为培育去除选择标记基因的抗盐耐旱单子叶转基因植物,构建了适合于单子叶植物的FLP/frt位点特异性重组系统.该系统由含有FLP重组酶基因的植物表达载体pCAMBIA3300-Ubi-FLP-bar和含有frt位点的植物双抗(抗除草剂、抗盐耐旱)表达载体pCAMBIA1300-Ubi-TsPPasef-rt-alsf-rtm以及pCAMBIA1300-Actin1-AtNHX1f-rt-alsf-rtm组成.; 李蓓单晓尹小燕张举仁; 关键词：位点特异性重组系统 UBI 单子叶植物

农杆菌介导的玉米自交系愈伤组织转化条件的优化被引量：43: 2003年; 采用农杆菌介导法 ,将外源基因导入玉米骨干自交系掖 5 15和掖 5 0 2胚性愈伤组织并再生玉米植株。在农杆菌浸染玉米胚性愈伤组织过程中 ,采取真空渗入、部分酶解和超声波处理 ,可以显著提高转化率。农杆菌浸染玉米胚性愈伤组织时 ,在 5 0kPa下真空渗入 5min ,掖 5 15和掖 5 0 2胚性愈伤组织的转化率分别从 6 .3%和 4 .5 %提高到 8.7%和 7.8%。愈伤组织在农杆菌浸染前 ,以 0 .2 %离析酶酶解 10min ,掖 5 15和掖 5 0 2胚性愈伤组织的转化率分别提高到 8.3%和 8.9%。在农杆菌浸染时 ,以功率 10 0W超声波处理 90～ 12 0s,掖5 15和掖 5 0 2胚性愈伤组织的转化率最高可达 9.1%和9.4 %。; 权瑞党尚梅张举仁; 关键词：农杆菌玉米愈伤组织酶解超声波

莴苣1-FFT基因的克隆及其功能分析: 2007年; 利用反转录PCR技术和cDNA末端快速扩增（RACE）技术从莴苣中分离出1-FFT（果聚糖：果聚糖1-果糖基转移酶）候选全长cDNA,序列分析表明该基因的开放阅读框中具有β-果糖苷酶单元（蔗糖结合框）、RDP域和EC域三个活性中心域。Southern杂交分析表明该基因在莴苣基因组中以单拷贝形式存在。利用农杆菌介导的叶盘转化法将该基因转入无1-FFT基因的烟草细胞,获得了转基因植株。体外酶反应证实转基因叶片提取物中具有1-FFT活性,该基因编码1-FFT。; 李慧娟张学成岳桂东张举仁; 关键词：莴苣 RACE 转基因烟草

利用FLP/frt重组系统产生无选择标记的转基因烟草植株被引量：29: 2006年; 在植物转基因植株产生过程中,对转化细胞进行抗性筛选是通用程序,转化细胞的抗性一般是抗生素抗性或除草剂抗性,将赋予转化细胞抗性的选择标记基因删除是提高转基因植物生物安全性的重要措施。来自于啤酒酵母的FLP/frt位点特异性重组系统可有效删除同向定点重组位点frt之间的基因。通过多步骤重组,建立了可在植物中广泛应用的FLP/frt位点特异性重组系统。该系统包括含有frt位点的植物表达载体pCAMBIA1300-betA-frt-als-frt和含有由热诱导启动子hsp启动的FLP重组酶基因的植物表达载体pCAMBIA1300-hsp-FLP-hpt。利用二次转化的方式将二者先后转入烟草植株,热激处理后,热诱导型启动子hsp调控的重组酶FLP基因的表达催化位于选择标记基因als两侧同向frt位点间的重组反应,有效地删除了选择标记基因als。41%的经热激处理的二次转化植株发生了选择标记基因的删除,表明该系统在获得无选择标记基因的转基因植株中有很好的应用价值。; 单晓映李蓓张举仁; 关键词：选择标记基因位点特异性重组系统

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国家高技术研究发展计划(2002AA212071)