国家自然科学基金(10490193)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 假激酶结构域的结构与功能
- 2005年
- 近年来在多种蛋白质结构中发现一个特定的结构域,假激酶结构域。假激酶结构域由于缺少一些对于激酶催化活性绝对必要的氨基酸残基而不具有激酶催化活性。以往同源建模的结果表明,一些假激酶结构域与激酶催化结构域的结构相似。已有的研究表明,蛋白质假激酶结构域一般可通过与激酶催化结构域相互作用而调节激酶的活性。
- 邹先琼陈春靖季朝能毛裕民
- 关键词：蛋白激酶
- 人口腔癌症缺失相关蛋白(DOC-1R)的表达、纯化和晶体生长
- 2006年
- 口腔癌缺失(DeletedinOralCancer-1,DOC-1)基因是近年来被证实的口腔癌中具有抑癌作用的基因。1999年,研究人员通过酵母双杂交实验又发现了与DOC-1相关的另一候选抑癌基因DOC-1R(DOC-1related)。以往的很多实验表明,这两个蛋白无论序列还是功能上都非常相似。然而,其三维结构以及与其他重要蛋白相互作用的机制一直还不清楚,PDB库中也未见其相关同源结构的报道。作者将人DOC-1R基因的cDNA片段克隆至原核表达载体pET-22b(+)中,通过IPTG诱导获得高效表达,再经过Ni-NTA亲和层析和Superdex75层析柱纯化,获得了纯度达到96%以上的蛋白。质谱分子量测定显示DOC-1R的分子量为14091.23Da,与理论分子量基本一致;动态光散射实验显示蛋白均一性高达99.0%,可用于晶体生长;采用悬滴气相扩散法筛选,在多个条件下得到了DOC-1R的微晶。为DOC-1R的三维结构解析奠定了坚实的基础。
- 王杰程中军龚为民
- 关键词：DOC-1R纯化质谱动态光散射晶体生长
