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5-Aza-CdR对人喉鳞癌Hep2细胞凋亡及蛋白质表达的影响: 2011年; 目的:探讨5-Aza-CdR对人喉鳞癌Hep2细胞凋亡及蛋白质表达的影响。方法:Hep2细胞分别经10-7mol/L 5-Aza-CdR和DMSO处理72h,应用Hoechst33258染色及流式细胞仪检测5-Aza-CdR对Hep2细胞凋亡的影响。抽提各组Hep2细胞总蛋白质,行双向电泳,采用PDQuest-7.0.1软件及MALDI-TOF质谱技术筛查5-Aza-CdR对Hep2细胞蛋白表达的影响,并通过Western blot对显著性差异蛋白质进行验证。结果:人喉鳞癌Hep2细胞在10-7mol/L 5-Aza-CdR处理72h后出现明显的细胞核致密浓染,Hep2细胞的凋亡率由对照组的(2.70±0.28)%增加到(13.96±0.41)%,具有统计学意义(P<0.05)。双向电泳筛查了包括S100A4在内的5种表达显著差异的蛋白质,Western blot进一步验证了5-Aza-CdR能明显上调喉鳞癌Hep2细胞中S100A4的表达,进而证明了双向电泳结果的可信性。结论:5-Aza-CdR介导的Hep2细胞部分蛋白质表达改变,直接或间接地参与了5-Aza-CdR诱导的Hep2细胞凋亡的发生,为5-Aza-CdR在喉鳞癌探讨性治疗中的机制研究奠定基础。; 郭艳尚超刘佳孙开来富伟能; 关键词：喉鳞癌双向电泳

microRNA-24对人喉鳞癌Hep2细胞增殖及侵袭的影响: 2011年; 目的探讨microRNA-24(miR-24)对喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep2细胞增殖、侵袭的影响。方法应用LipofectamineTM2000瞬时转染上调Hep2细胞中miR-24的表达,并通过荧光定量PCR验证;然后采用相差显微镜观察和MTT法分析miR-24对Hep2细胞增殖情况的影响;Transwell小室法检测miR-24对Hep2细胞侵袭能力的作用。结果 pre-miR-24转染Hep2细胞36h时miR-24表达明显增强。与转染control miR组和空白对照组相比,转染pre-miR-24能明显降低Hep2细胞的增殖能力;同时,转染pre-miR-24能明显抑制Hep2细胞的局部侵袭能力,Hep2细胞的跨膜细胞数由转染pre-miR-24组的(12.37±0.52),降低至转染control miR组的(32.48±0.95)和空白对照组(34±1.25),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-24异常表达与LSCC Hep2细胞的生物学行为密切相关。; 郭艳尚超孙开来钟鸣富伟能; 关键词：喉鳞癌细胞增殖

HLA-B对喉癌Hep2细胞生物学行为的影响被引量：4: 2011年; 目的探讨人类白细胞组织相容抗原(HLA)-B在喉癌发生、发展中的作用。方法采用RNA干涉技术下调Hep2细胞中HLA-B基因表达。用干涉效应最明显、转染siRNA的细胞作为观察组,转染PBS及无义siRNA的细胞作为对照1组及对照2组。采用流式细胞仪、MTT和细胞体外侵袭力分析方法检测各组细胞凋亡率、增殖情况、细胞周期及局部侵袭能力。结果 RNA干涉7 d观察组细胞凋亡率明显高于两对照组,细胞周期阻滞于S期;细胞增殖能力及局部侵袭能力明显强于两对照组,P均<0.05。结论 HLA-B表达降低或缺失在喉癌的发生、发展中起促进作用。; 郭艳富伟能尚超钟鸣孙开来; 关键词：RNA干涉生物学行为

喉癌Hep2细胞凋亡调控中HLA-B的作用机制被引量：2: 2011年; 目的:探讨人类白细胞抗原B(HLA-B)在喉癌Hep2细胞凋亡调控中的作用机制。方法:免疫共沉淀结合蛋白质印迹技术鉴定HLA-B与S100结合蛋白A8(S100A8)、S100A8与S100A9及HLA-B与S100A9在体外发生相互作用的情况,免疫细胞化学对HLA-B、S100A8和S100A9在Hep2细胞中的表达进行定位,同时验证三者之间可能的关系;进一步应用RNA干涉技术,通过Real-ti mePCR及蛋白质印迹评估相互作用基因的表达情况。结果:Hep2细胞中HLA-B和S100A8蛋白在体外存在相互作用,而S100A8和S100A9并没有以异源二聚体的形式存在。免疫细胞化学结果显示,Hep2细胞中S100A8蛋白主要表达于细胞质中,HLA-B主要定位于细胞质和细胞膜上,而S100A9蛋白主要分布于细胞核中。另外,与转染PBS及无义小分子干扰(si RNA)组相比,RNA干涉HLA-B基因能明显下调S100A8 mRNA和蛋白的表达水平,F值分别为553.024、603.582,P值均为0.000;而RNA干涉S100A8基因对HLA-B mRNA和蛋白表达变化无显著影响,F值分别为1.266、1.087,P值分别为0.348、0.395。结论:HLA-B与S100A8相互作用,部分通过调节S100A8/Bcl-2的表达而激发喉癌Hep2细胞凋亡发生。; 郭艳富伟能钟鸣孙开来; 关键词：喉肿瘤细胞凋亡 HLA抗原免疫沉淀法

MYCT1-TV在喉癌中的表达及功能研究: MYCT1(myc target 1,Gene ID:80177)是本课题组克隆的喉癌候选肿瘤抑制基因,曾命名MTLC(myc target from laryngeal cancer cells)。前期工作中,我们利用...; 符爽富伟能; 关键词：喉癌; 文献传递

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辽宁省自然科学基金(20092110)