国家自然科学基金(30170608)
- 作品数：2 被引量：21H指数：2
- 相关作者：李怀方燕照玲邓丛良程玉琴韩丽娟更多>>
- 相关机构：中国农业大学北京出入境检验检疫局更多>>
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- 甘蔗花叶病毒HC-Pro基因原核表达及表达产物抗血清制备被引量：6
- 2006年
- 采用RT-PCR方法自甘蔗花叶病毒北京玉米分离物(SCMV-BJ)的基因组中分离出其HC-Pro基因,通过T4DNA聚合酶连接到原核表达载体pET-22b(+)上,获得的重组子pETHC转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG在37℃进行诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,HC-Pro基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生分子量约为52kDa的融合蛋白。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性的抗血清并提取了抗体IgG。ACP-ELISA测定抗血清的效价为1/8192。结果表明,该血清可用于SCMV-BJ的检测,并为进一步分析HC-Pro的功能奠定基础。
- 梁新苗范在丰李怀方
- 关键词：甘蔗花叶病毒原核表达抗血清ELISA
- 白草花叶病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：15
- 2005年
- 将白草花叶病毒(Penn isetum mosaic virus,PenMV)的外壳蛋白(CP)基因连接到表达载体pET22b(+)上,获得重组子pET-PCP。SDS-PAGE和W estern b lotting分析表明,经IPTG诱导后,含pET-PCP的大肠杆菌BL21(DE3)pLys产生分子量为36 kDa的融合蛋白。以N i2+亲和层析柱纯化该蛋白,并以其为抗原免疫德国大白兔制备了特异性较强的抗血清。微量免疫沉淀法测其效价为1∶1 024,酶联法(enzym e-linked immunosorbant assay,ELISA)测定的效价为1∶8 192。该血清可替代常规病毒粒子所制备的抗血清,用于检测PenMV。
- 邓丛良韩丽娟燕照玲程玉琴周涛李怀方
- 关键词：外壳蛋白原核表达抗血清ELISA
- 北京玉米矮花叶病毒原的分子变异
- ＜正＞ 玉米矮花叶病近年在华北各地流行,导致玉米大面积减产、品质降低,造成了严重的经济损失。近二十年有关北京玉米矮花叶病的病原研究结果表明:它与马铃属Y病毒属（Potyvirus）的玉米矮花叶病毒B株系（MDMV-B）亲...
- 范在丰陈红运蔡三山李怀方
- 文献传递
