国家自然科学基金(30971370)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 相关机构：广东医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湛江市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 4种新型蛋白激酶C同工酶在不同肾小球疾病中的表达被引量：2
- 2017年
- 目的探讨4种新型蛋白激酶C同工酶(PKC-δ、-ε、-η、-θ)在肾小球疾病中的作用。方法收集50例肾小球疾病(肾小球轻微病变、膜性肾病、局灶节段性肾小球硬化症、IgA肾病、狼疮性肾炎)患者肾活检标本及6例正常肾组织,免疫组化检测PKC-δ、-ε、-η、-θ表达。结果病变肾组织中PKC-δ、-ε、-η、-θ表达部位与正常肾组织相同。PKC-δ在狼疮性肾炎肾小球中表达高于正常肾组织(P<0.01),而病变肾组织中PKC-ε、-η、-θ表达与正常肾组织差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PKC-δ、-ε和-θ可能参与肾小球损伤和肾小管间质纤维化,而PKC-η可能仅参与肾小球损伤。
- 安宁李志航黄统生吴洪銮杨陈刘华锋
- 关键词：蛋白激酶C同工酶肾小球疾病
- 环孢菌素A对肾小管上皮细胞自噬-溶酶体通路的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨环孢菌素A（CsA）对肾小管上皮细胞（TEC）自噬．溶酶体通路的影响。方法不同浓度（3、5、10μmol／L）CsA刺激人近端肾小管上皮（HK-2）细胞24h。用MTT法检测细胞活力；AnnexinV—PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；免疫荧光法检测细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ和p62表达；共聚焦显微镜下观察mRFP—GFP串联荧光标记LC3（tfLC3）质粒转染HK．2细胞后自噬体与溶酶体融合及降解情况；用流式细胞术检测HK-2细胞溶酶体对DQ-卵清蛋白的消化能力。结果与对照组相比，5、10μmol／LCsA组细胞活力下降（均P〈0．01）；细胞凋亡数增多（均P〈0．05）。与对照组相比，3、5、10μmol／LCsA组细胞LC3-II和p62表达增加（均P〈0．05）；自噬体降解受阻；细胞溶酶体消化DQ-卵清蛋白能力下降（均P〈0．01）。结论CsA通过损害溶酶体功能而阻滞肾小管上皮细胞自噬通路，可能是CsA肾病的发生机制之一。
- 安宁李志航杨陈潘庆军刘华锋
- 关键词：环孢菌素A上皮细胞肾小管自噬溶酶体
- 非经典型蛋白激酶C在尿蛋白诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用
- 2017年
- 目的:探讨非经典型PKC同工酶(PKC-ζ和PKC-ι)在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)转分化中的作用。方法:首先免疫组化法检测PKC-ζ和PKC-ι在人正常及不同类型肾小球疾病患者肾组织的表达并分析其表达量的变化。接着应用不同浓度的尿蛋白(0 mg/ml、0.5 mg/ml、1.0 mg/ml、2.0 mg/ml、4.0 mg/ml及8.0 mg/ml)处理体外培养的HK-2细胞,应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin和α-SMA的表达以观察HK-2细胞转分化情况,选择诱导HK-2细胞转分化适宜的尿蛋白浓度进行后续试验。将HK-2细胞分对照组和尿蛋白组,分别给予无血清培养基和尿蛋白(4.0 mg/ml)刺激,分别用免疫荧光及Western Blot法检测各组细胞内PKC-ζ和PKC-ι在细胞膜及细胞浆的活化易位情况。结果:(1)两种非经典型PKC同工酶PKC-ζ和PKC-ι在正常和肾小球疾病肾组织肾小球和RTECs均有表达,在肾间质均无表达,表达量不尽相同。PKC-ζ在肾小球疾病肾组织肾小球中的表达量均较正常肾组织显著减少(P<0.05),在MCD和FSGS的RTECs中的表达量较正常肾组织显著减少(P<0.05)。PKC-ι在FSGS的肾小球和RTECs中的表达量均显著减少(P<0.05),在Ig AN肾组织RTECs中表达显著增高(P<0.05),在肾小球表达无明显差别。(2)不同浓度的尿蛋白刺激HK-2细胞48 h后,当尿蛋白的浓度逐渐升高时,HK-2细胞随之转变为类似成纤维细胞形态,细胞E-cadherin表达下调及α-SMA表达上调。尿蛋白浓度为4.0 mg/ml诱导HK-2细胞转分化最明显。(3)尿蛋白诱导HK-2细胞转分化时,PKC-ζ和PKC-ι无明显活化易位。结论:两种非经典型PKC同工酶均在人类肾组织表达,提示PKC-ζ和PKC-ι均参与肾脏的生理过程,但PKC-ζ和PKC-ι在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞转分化中并未发挥相关作用。
- 安宁罗玉婷李亚宁吴洪銮杨陈潘庆军刘华锋
- 关键词：尿蛋白肾小管上皮细胞转分化
