国家自然科学基金(30872383)
- 作品数：13 被引量：9H指数：2
- 相关作者：方建培许吕宏翁文骏洪冬玲吴燕峰更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学附属第二医院哈佛医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 致敏血清干扰小鼠骨髓移植的作用研究
- 2009年
- 目的:研究致敏血清在小鼠骨髓移植中的作用,明确抗体介导的移植排斥作用。方法:在移植前1天将200μl致敏血清或非致敏血清注射到正常BALB/c小鼠中,移植受者经致死量照射后回输1×107 C57BL/6小鼠的骨髓细胞。应用补体依赖淋巴细胞毒性方法检测移植前受者的供者反应性抗体,并观察移植后受者的生存情况及植入分析。结果:致敏血清输注可促使供者反应性抗体存在于受者体内。骨髓移植后,接受致敏血清输注的受者80%于10天左右均死于骨髓衰竭,而接受非致敏血清输注的受者能长期存活。植入分析表明接受致敏血清输注的受者在移植后其血象及骨髓细胞随时间推移进行性下降,且供者细胞的嵌合百分比也进行性减少;与接受非致敏血清输注组相比,两组的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:致敏血清能介导小鼠的骨髓移植排斥,其中供者反应性抗体介导的体液免疫发挥重要作用。
- 许吕宏方建培翁文骏吴燕峰
- 关键词：骨髓移植
- 骨髓腔输注造血干/祖细胞在致敏模型应用的实验研究
- 2011年
- 本研究旨在致敏模型中通过骨髓腔输注异基因造血干/祖细胞方法探讨致敏移植的新策略。应用脾细胞输注方法建立的致敏BABL/c小鼠作为致敏模型,取正常BALB/c小鼠作为非致敏受者,通过骨髓腔输注同种异基因造血干/祖细胞,观察移植后受者的生存及血象恢复情况。同时分离致敏及非致敏小鼠的血清,应用补体依赖细胞毒性反应方法检查血清抗体对异基因造血干/祖细胞损伤的影响。结果显示:非致敏受鼠经骨髓腔输注造血干/祖细胞后能长期存活,血象随时间推移而逐渐恢复正常。而致敏移植受鼠中有1只小鼠于移植前由于麻醉意外而死亡,其余90%致敏受鼠(9/10)经骨髓腔注射骨髓细胞后于2周内死亡,血象随时间推移而逐渐下降。取濒死的致敏受鼠组织行病理切片检查,证实致敏受鼠死于骨髓衰竭。补体依赖细胞毒性反应实验结果显示,非致敏组和致敏组的造血干/祖细胞死亡细胞百分比分别为(7.80±1.93)%和(50.80±3.12)%,两组差异有明显统计学意义(p<0.05),提示致敏血清对异基因造血干/祖细胞具有损伤作用。结论:通过骨髓腔输注造血干/祖细胞的方法并不能促进异基因供者细胞在致敏受者体内植入。
- 许吕宏方建培翁文骏史沛杰
- 关键词：致敏模型
- 谷胺酰胺双肽保护小儿HSCT肠道外器官功能的临床研究
- 2009年
- 【目的】观察谷氨酰胺双肽[N（2）-L-alanyl—L-glutamine；dipeptide glutamine，DPT）保护接受造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation，HSCT）患儿肠道外器官功能的临床疗效。【方法】2004年3月～2007年11月，将56例拟接受HSCT的患儿按疾病种类作分层抽样分为两组：谷氨酰胺双肽使用组（DPT组，n=28）和对照组（n=28）。DPT组患儿除接受标准胃肠外营养支持外，每天给予谷氨酰胺（glutamine，Gln），剂量为1．5mL／（kg·d），共计21d。对照组采用不含Gln的标准化静脉营养支持。检测应用DPT前1d、第7、14、21d患儿体重、肝功生化、血常规，并分析造血干细胞植入和移植后30d内并发症发生情况。【结果】DPT组的呼吸道感染、泌尿道感染、长期发热（≥14d）发生率、咽痛咳嗽时间、尿频尿痛时间、发热总时间、最长连续发热时间、平均每天最高体温、静脉应用抗生素时间、入无菌层流房时间、体重下降幅度低于或少于对照组，差异有显著性（P〈0．05）；植入率、皮肤急性移植物抗宿主病（acute graft versus host disease，aGVHD）、肠道aGVHD、肝静脉闭塞病和出血性膀胱炎发生率、WBC植入时间、PLT植入时间、浓缩红细胞、血小板、注射用重组人IL-11、粒细胞集落刺激因子的输注次数及需要量，DPT应用第7d、第14d、第21d的肝功、血常规检测各项指标两组相比差异无显著性（P〉0．05）。【结论】DPT对造血重建或aGVHD无影响；但能改善HSCT状态，减少粘膜炎、呼吸道感染、泌尿道感染的发生率及症状持续时间，减少长期发热发生率及发热时间，缩短抗生素治疗时间及住无菌层流房时间。
- 翁文骏方建培陈纯周敦华黄科郭海霞黎阳徐宏贵夏焱
- 关键词：谷氨酰胺造血干细胞移植肠道外
- 抗CD20单抗在致敏受者造血干细胞移植中应用的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:寻找促进异基因造血干细胞在致敏受者植入的策略研究,探讨抗CD20单抗在致敏受者造血干细胞移植的作用。方法:分别于移植前第14d及第7d予BALB/c小鼠输注C57BL/6小鼠的脾细胞建立致敏模型。实验组于移植前第11d经尾静脉输注抗CD20单抗(美罗华)2mg/mouse,对照组于移植前第11d予输注RPMI-1640培养液0.2mL/mouse。于第0d(移植当天)取部分小鼠分离得血清及脾细胞,并检测供者反应性抗体及CD19+B细胞;部分小鼠予[^(60)Co]致死量照射,4h后予1×107C57BL/6小鼠骨髓细胞进行移植,观察生存情况及血常规恢复情况。结果:实验组与对照组血清细胞毒性指数分别为(37.00±3.46)%和(51.80±3.49)%,差异显著(P<0.01);2组的脾细胞CD19+B细胞百分比分别为(17.32±3.02)%和(34.26±2.87)%,差异显著(P<0.01)。照射移植后2组受者均于14d左右全部死亡,生存中位数分别为第13d及第11d,Log-rank检验2组间的差别无显著(P>0.05)。濒死动物血常规结果示三系减少,提示受者死于造血衰竭。结论:抗CD20单抗能杀伤受者B细胞,降低致敏程度,但实验中该单抗并不能有效促进异基因造血干细胞在致敏受者的植入。
- 许吕宏方建培Le Yi洪冬玲翁文骏魏菁
- 关键词：致敏受者抗CD20单抗造血干细胞移植
- 吲哚胺2,3二氧化酶在造血干细胞移植的研究进展
- 2011年
- 吲哚胺2,3二氧化酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)通过诱导色氨酸分解,调节树突状细胞(dendritic cells,DCs)及T细胞等途径实现造血干细胞移植(hematopoietic stemcell transplantation,HSCT)后诱导T细胞免疫耐受,防止移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的发生及提高移植物存活率。调控吲哚胺2,3二氧化酶已成为提高造血干细胞移植成功率的治疗靶点。
- 叶启翔方建培
- 关键词：造血干细胞移植免疫耐受移植物抗宿主病
- 全不相合与全相合骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入被引量：1
- 2011年
- 【目的】探讨全不相合与全相合供者骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入情况。【方法】以异基因脾细胞输注致敏的BALB/c小鼠作为移植受者,致敏模型经8 Gy 60Co照射后分别经尾静脉移植1×107 C57BL/6或BALB/c供者的骨髓细胞。予CFSE标记供者骨髓细胞,并分别在移植后不同时间点(2、12及48 h),通过病理切片及组织细胞悬液动态示踪供者细胞在致敏受者各组织的分布。移植后记录各组的生存情况,每周监测造血重建与骨髓恢复情况。【结果】归巢实验表明C57BL/6骨髓细胞在致敏受者股骨的分布随时间推移先增加而后减少,在脾脏的分布随时间推移呈进行性减少。BALB/c骨髓细胞在致敏模型股骨及脾脏的分布均随时间推移而增加。接受C57BL/6骨髓细胞的致敏模型于移植第12～15天内全部死亡,血象及骨髓象呈进行性下降;而接受BALB/c骨髓细胞的能长期存活,血象及骨髓象能迅速恢复。【结论】全不相合的供者骨髓细胞在致敏模型中完全被排斥,而全相合供者的骨髓细胞能在致敏模型中能进行有效的归巢与植入。
- 许吕宏方建培翁文骏叶启翔
- 关键词：骨髓移植致敏模型植入归巢
- 致敏小鼠骨髓间充质干细胞体外培养及多向分化功能的测定被引量：2
- 2010年
- 目的:评价异基因脾细胞输注致敏的小鼠骨髓源性间充质干细胞(MSCs)的体外培养生长能力及其多向分化功能。方法:应用贴壁培养法体外培养间充质干细胞,流式检测其表面标志以及检测其成骨、成脂和成肌多向分化状况;结果:致敏小鼠骨髓源性MSCs与非致敏小鼠骨髓源性MSCs比较,形态学无差异且均表达CD29+、CD105+、CD44+和Sca-1+;CD34-、CD11b-;同时在相应的诱导条件下具有向成骨、成脂、成肌多向分化的能力。结论:异基因脾细胞输注致敏的小鼠,其骨髓源性MSCs的形态学和功能与正常小鼠的MSCs比较评估未见异常。
- 洪冬玲吴燕峰许吕宏方建培
- 关键词：致敏小鼠间充质干细胞细胞分化
- 骨髓间充质干细胞在血液系统疾病中的研究和应用
- 2011年
- 间充质干细胞是一群有多向分化潜能的非造血细胞，并具有免疫调节及促进造血生成作用。血液系统疾病的骨髓间充质干细胞在形态和功能上有所异常。骨髓间充质干细胞已广泛应用于造血干细胞移植领域，具有促进造血重建及治疗移植物抗宿主病作用。本文就骨髓间充质干细胞在血液系统疾病中的最新研究进展和应用进行综述。
- 许吕宏方建培
- 关键词：骨髓间充质干细胞血液系统疾病造血干细胞移植
- 骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内的示踪归巢实验被引量：1
- 2011年
- 【目的】了解骨髓间充质干细胞在以异基因脾细胞输注致敏小鼠体内的归巢情况。【方法】正常同种异基因小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及鉴定后,体外予羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯荧光染料标志,经尾静脉注射到致敏组和非致敏组小鼠体内(每组10只),在6 h、24 h和48 h处死动物,分别应用冰冻切片和流式检测方法了解骨髓间充质干细胞在各个脏器的分布情况。【结果】冰冻切片和流式检测结果均表明骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内迅速和持久在脾、肝脏聚集,而非致敏动物却没有明显聚集到肝脾等脏器,而是最终归巢到了骨髓。其中流式细胞仪定量结果表明:6 h时致敏小鼠脾脏荧光阳性细胞为(3.78±0.66)%,与同期正常小鼠脾脏结果比较P<0.05,有统计学意义;而在48 h时致敏小鼠骨髓荧光阳性细胞为(0.43±0.35)%,同期正常小鼠骨髓为(5.40±1.58)%,两者比较P<0.05,有统计学意义。【结论】应用异基因脾细胞致敏的小鼠体内肝脾等免疫脏器明显受到致敏影响,其对骨髓间充质干细胞体内归巢的定位具有很高的趋化吸附作用,中止了骨髓间充质干细胞正常状态下向骨髓的归巢。
- 洪冬玲吴燕峰许吕宏方建培
- 关键词：致敏小鼠骨髓间充质干细胞
- 谷氨酰胺双肽对接受造血干细胞移植患儿肠道保护作用的临床研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究谷氨酰胺双肽[N(2)-L-alanyl-L-glutamine;dipeptide grutamine;dipeptiven, DPT]对造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)患儿并发症及恢复的影响。方法选取2004年3月至2007年11月,在中山大学附属第二医院儿科接受造血干细胞移植的56例患儿为研究对象,将其按疾病种类作分层抽样分为谷氨酰胺双肽组(DPT组,n=28)和对照组(n=28)(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试患儿监护人的知情同意,并与其签署临床研究知情同意书)。DPT组患儿除接受全胃肠外营养(total parenteral nutrition; TPN)支持外,每天给予谷氨酰胺双肽,剂量为1.5 mL/(k·d),共计21 d。对照组采用不含谷氨酰胺(glutamine,Gln)的全胃肠外营养支持。检测DPT组和对照组应用谷氨酰胺双肽前1天、第7、第14、第21天患儿体重、肝功生化、血常规,并对造血干细胞植入和移植后30 d内并发症发生情况进行分析。结果DPT组发生肠炎为12例,对照组为26例,两组比较,DPT组发生率低于对照组,且差异有显著意义(P<0.05)。DPT组患儿的腹泻、腹痛、呕吐、口腔溃疡持续时间,腹泻、腹痛、呕吐次数均短于或少于对照组,两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。两组患儿发生鹅口疮、肛裂等持续时间比较,DPT组短于对照组,且差异无显著意义(P<0.05)。DPT组患儿长期发热(≥14 d)为2例,对照组为10例,两组比较,DPT组的发热总持续时间、最长持续发热时间短于对照组,平均每天最高体温低于对照组,且差异有显著意义(P<0.05)。DPT组患儿发生口腔溃疡为14例、鹅口疮为4例、肛裂为3例、血真菌培养呈阳性为0例、血细菌培养呈阳性为6例,而对照组分别为19例、5例、1例、1例和7例,两组比较,差异无显著意义(P>0.05)。DPT组患儿静脉应用抗生素时间为(20.0±7.1)d、入无菌层流室治疗时间为(20.2±6.7)d,对�
- 翁文骏方建培陈纯周敦华黄科郭海霞薜红漫黎阳
- 关键词：谷氨酰胺造血干细胞移植儿童
