广东省自然科学基金(10251007002000001)
- 作品数：11 被引量：171H指数：7
- 相关作者：朱红惠蔡卓平段舜山姚青冯广达更多>>
- 相关机构：广东省微生物研究所暨南大学华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 用于PCR扩增的细菌DNA提取方法比较被引量：79
- 2013年
- 以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍存在少数革兰阳性菌DNA提取失败的现象.因此,在菌株较多的情况下可先采用冻融法提取细菌DNA,对少数提取失败的菌株,弃冻融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA试剂盒的提取进行补充.采用该操作流程既能节省成本和时间,又减少了提取过程中有机废弃物的产生.
- 冯广达陈美标羊宋贞朱红惠
- 关键词：DNA提取RRNA基因PCR
- 氮和硅对三角褐指藻细胞增殖的交互作用研究被引量：6
- 2013年
- 设置氮质量浓度和硅质量浓度双因子试验,探讨其对三角褐指藻生长的影响及对藻细胞增殖的交互作用。结果发现,氮质量浓度对三角褐指藻生长有极显著的影响。不论是在低硅质量浓度,还是高硅质量浓度下,与高氮处理相比较,缺氮处理下藻细胞不能存活,低氮处理下藻细胞生长受严重抑制。试验结束时,低硅质量浓度下缺氮、低氮和高氮处理的藻细胞密度分别为0、5.0×105个/mL和7.37×106个/mL。硅质量浓度同样对三角褐指藻的细胞密度产生显著性影响,高硅质量浓度下的藻细胞密度显著高于低硅质量浓度下的藻细胞密度。双因素方差分析结果表明,试验前期,氮和硅对三角褐指藻细胞密度的交互作用不明显(P>0.05);但试验后期,氮和硅对三角褐指藻细胞密度有显著性的交互作用(P<0.05)。
- 蔡卓平段舜山朱红惠
- 关键词：氮硅三角褐指藻
- 海洋微藻对重金属镉胁迫的抗氧化应激适应性被引量：9
- 2012年
- 近海海域重金属镉污染已成为全球性的环境灾难。镉对有机体的氧化应激胁迫是引发有机体毒害效应的关键原因。海洋微藻是海域生态系统中初级生产者,研究其抵抗镉氧化应激毒害的过程和机理对海洋生态学具有重要科学意义。海洋微藻在长期进化发展过程中,形成了耐受重金属镉毒害的生长适应性反应,抵抗镉氧化应激胁迫是海洋微藻减轻或消除镉毒害的关键所在。文章概述当前近海重金属镉的污染现状,归纳重金属镉对海洋微藻的氧化应激毒害效应,提出海洋微藻对镉胁迫的抗氧化应激适应性,简介几种典型的抗氧化应激酶类与非酶类物质,最后指出该领域的关键问题并进行展望。
- 蔡卓平段舜山朱红惠
- 关键词：海洋微藻镉抗氧化应激适应性
- 球囊霉素相关土壤蛋白的提取条件被引量：11
- 2011年
- 球囊霉素是由丛枝菌根真菌分泌的一种含金属离子的糖蛋白,因被非专一性提取而称为球囊霉素相关土壤蛋白(GRSP)。由于提取条件能影响GRSP的测定值,因此研究了柑橘园土样前期灭菌、离心力和土样质量等3个提取条件对GRSP测定值的影响。结果表明,土样前期灭菌和较高的离心力(15,000×g)均能显著影响GRSP的测定值;在土样质量0.25-1.0g范围内,GRSP的测定值随着土样质量的提高而升高;经过3次和6次的连续提取,总球囊霉素相关土壤蛋白的累积量分别达到理论最大值的66.8%和92.1%以上。研究结果为GRSP测定的标准化提供了依据。
- 谢小林许朋阳朱红惠姚青
- 关键词：丛枝菌根真菌蛋白提取离心力灭菌
- 铅锌尾矿中耐重金属镉的丝状真菌的分离鉴定被引量：10
- 2013年
- 【目的】旨在从重金属污染地分离出耐重金属镉真菌,获得耐受重金属镉污染的高效菌株,为重金属污染微生物修复提供菌种资源。【方法】利用稀释平板涂布法,采用4种培养基对粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地9个样品进行分离,并结合形态学和ITS rDNA基因序列分析,鉴定分离到的耐镉真菌,最后对分离到的耐镉真菌进行最小抑制浓度(MIC)检测。【结果】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离出72株丝状真菌,经形态学和分子技术鉴定,它们主要属于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、枝孢属(Cladosporium)、油瓶霉属(Lecythophora)、拟青霉属(Paecilomyces)、镰刀孢属(Fusarium)等。MIC检测发现有4株丝状真菌耐镉浓度较高,Paecilomyces lilacinus(Thom)Samson(6-20p),Penicillium pinophilum Hedgcock(6-16p),Penicillium rolfsii Thom(6-16m)和Fusarium oxysporum Schlecht.(8-11p)分别为200、40、25和15 mmol/L。【结论】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离到的72株丝状真菌,不同程度耐受重金属镉,在重金属污染的治理中有可能发挥作用。本研究为镉污染环境的微生物修复提供了重要菌株。
- 隆美容谢小林冯广达姚青朱红惠
- 关键词：镉最小抑菌浓度
- 大宝山矿区耐Cd^(2+)细菌的分离鉴定及其生物学特性被引量：15
- 2012年
- 【目的】从Cd2+污染土壤中分离获取强耐Cd2+微生物,研究其生物学特性。【方法】采用选择性培养基TSA对广东省大宝山重金属污染土壤中耐镉(Cd2+)细菌进行分离筛选,结合细菌形态观察、生理生化检测、16S rRNA基因序列分析等方法确定了它们的分类地位,并开展了细胞形态、Cd2+耐受性、Cd2+吸附性、对不同pH和盐度适应性、以及对抗生素的抗性等生物学特性的研究。【结果】从土壤中分离到8株具有强耐Cd2+能力的细菌(YN-6、YN-7、YN-8、YN-9、YN-16、YN-17、YN-18、YN-19),初步鉴定其分别属于Rhizobium、Roseateles、Cupriavidus、Methylobacterium、Variovorax、Rhizobium、Achromobacter和Leifsonia属。细菌生物学特性研究表明,8株耐Cd2+细菌的形态存在一定的差异,其中YN-6、YN-8、YN-9、YN-16、YN-17和YN-18菌体为短杆状,而YN-7和YN-19菌体为长杆状。它们对Cd2+的最低抑制浓度均在3 mmol/L以上,且每克细胞吸附1 mg以上的Cd2+。其中,菌株YN-8对Cd2+的耐受性最强(9 mmol/L),菌株YN-9对Cd2+的吸附能力最强(316.7 mg Cd2+/g cells)。不同pH、盐度和抗生素对8株细菌生长的影响存在较大差异。【结论】菌株YN-8和YN-9对环境的适应性较强,可以作为较好的试验材料应用于生物修复重金属Cd2+污染土壤的研究。
- 陈美标郭建华姚青段锦梅冯广达蔡卓平朱红惠
- 关键词：生物学特性
- 三角褐指藻在多波长下藻液吸光度与细胞密度的关系研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究具潜在药用价值的三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum在不同波长下,其藻液吸光度与细胞密度的关系。方法取对数生长后期的三角褐指藻藻液进行梯度稀释,利用显微镜观测微藻细胞密度,利用分光光度计分别测定藻液在8个波长下的吸光度,分析各波长下微藻细胞密度与吸光度的相关性。结果 6个稀释梯度下的细胞密度分别为923×104、453×104、207×104、94×104、47×104、22×104个/mL;不同波长下藻液吸光度有差别。8个波长下,细胞密度与吸光度均存在显著性相关关系,在680、663、420和450 nm波长处相关系数r值较大,分别为0.999 0、0.998 1、0.997 2和0.996 3。结论利用吸光度法检测三角褐指藻细胞生长是一种快速、简便、可行的方法;本试验条件下,在680、663、420和450 nm波长处测定三角褐指藻藻液的吸光度较为适宜。
- 蔡卓平段舜山朱红惠
- 关键词：三角褐指藻波长吸光度细胞密度
- 钙、镉和钙离子通道抑制剂对根内球囊霉孢子萌发和菌丝生长的影响被引量：3
- 2011年
- 在含有1 mmol/L磷酸的培养基中设置不同浓度的钙离子、镉离子和钙离子通道抑制剂Verpam il,对根内球囊霉Glomus intraradices孢子萌发、菌丝极性生长以及菌丝分支进行了研究.结果表明:钙离子促进了孢子萌发、菌丝极性生长和菌丝分支;镉离子起到了强烈的抑制作用;然而钙离子没有减弱重金属对孢子萌发和菌丝生长的抑制;与此同时钙离子通道阻断剂抑制了菌丝生长和分支,并没有减弱重金属的毒害作用,镉离子并不是主要通过钙离子通道进入AMF的菌丝内.
- 杨瑞恒姚青郭俊龙良鲲黄永恒朱红惠
- 关键词：孢子萌发率
- 光密度法与计数法测定3种能源微藻细胞生长的相关性及其验证(英文)被引量：15
- 2012年
- 【目的】探讨3种能源微藻细胞数量和藻液光密度之间的相关性,验证以光密度法测定细胞生长密度的可行性,为能源微藻的生长和生理生化研究提供简便方法与参考依据。【方法】选取三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum、亚心形扁藻Platymonas subcordiformis和海洋小球藻Chlorella vulgaris 3种能源微藻为生物材料,以添加f/2营养液的人工海水为培养介质,在植物培养箱中利用三角瓶进行一次性培养试验。利用显微镜计数法观测微藻的细胞密度,测定各藻液在680 nm处的光密度值,并进行线性拟合获取回归方程,比较两种测定方法所得的藻细胞密度值。【结果】3种能源微藻的细胞密度与藻液光密度有显著的线性正相关,其回归方程分别为:三角褐指藻细胞密度(104个/mL)=1405OD680-59.745,R2= 0.9942;亚心形扁藻细胞密度(104个/mL)=216.94 OD680+0.9743,R2=0.9947;海洋小球藻细胞密度(104个/mL)=2170.1 OD680+18.569,R2=0.9927。在各微藻生长第5、7和9 d中,利用显微镜计数法所得细胞数目和光密度法换算所得细胞数目没有明显差别。【结论】光密度法是一种可测定微藻细胞生长的快速、简便、有效的方法,可广泛应用于能源微藻的生长、生理生化研究。
- 蔡卓平段舜山朱红惠
- 关键词：光密度细胞计数
- 微生物细胞中的聚磷酸及研究方法被引量：1
- 2011年
- 聚磷酸是一种由多个磷酸基通过高能磷酸键连接而成的线性聚合分子,存在于所有生物体中,具有重要的生理功能。由于缺少特异的研究方法,为聚磷酸代谢和生理功能的研究带来很大的困难。对迄今为止的相关文献进行了综述,主要介绍微生物细胞内的聚磷酸,其中包括参与生物合成和降解过程的几种重要的酶、聚磷酸生物学功能、胁迫作用下调节聚磷酸以及聚磷酸对基因表达的调控模型和工业应用;还从分离技术、定位技术、定量分析技术3个方面重点概述了聚磷酸的研究方法。
- 杨瑞恒姚青郭俊龙良鲲朱红惠
- 关键词：聚磷酸细胞定位
