国家自然科学基金(30972888)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 相关作者：龚建平刘作金李金政赖星李生伟更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院第三军医大学西南医院重庆医科大学附属永川医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 组蛋白去乙酰化酶11在诱导大鼠肝移植免疫耐受中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的通过观察组蛋白去乙酰化酶11（histone deacetylase 11,HDAC11）及IL-10表达水平在3种大鼠肝移植模型中的变化,探讨肝移植免疫耐受形成的相关机制。方法纯系Lewis和BN大鼠各30只,建立肝移植排斥模型后将受体分为排斥组（Lewis-BN）、免疫抑制剂干预组（Lewis-BN）、耐受组（BN-lewis）,每组10只。干预组于术后1~7 d以1 mg/kg肌肉注射他克莫司（FK506）;分别于术后7 d处死受体。移植物排斥反应程度采用Banff评分标准;免疫荧光组织化学观察HDAC11表达情况;实时荧光定量PCR及Western blot测定肝组织HDAC11 mRNA和蛋白表达水平;酶联免疫吸附法检测血清IL-10及IFN-γ的含量。结果术后7 d,排斥组为严重的急性排斥反应,Banff评分Ⅲ级,干预组为Ⅱ级,耐受组为0~I级。排斥组HDAC11 mRNA及蛋白表达的水平明显高于干预组和耐受组（P〈0.05）,耐受组表达量最低,与干预组有统计学差异（P〈0.05）。排斥组IL-10表达明显低于干预组和耐受组（P〈0.05）;而IFN-γ含量排斥组明显高于干预组和耐受组（P〈0.05）。结论 HDAC11通过对IL-10的调控促进或抑制肝移植免疫耐受的形成。
- 赖星连峥嵘陈勇李金政廖汪洋张玉君龚建平刘作金
- 关键词：肝移植免疫耐受
- 大鼠肝移植急性排斥反应中肿瘤坏死因子受体配体的表达及其意义被引量：1
- 2011年
- 目的观察肝移植排斥反应中移植肝脏内糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体（GITRL）的表达。方法采用Kamada’s二袖套法建立从Lewis到Brown Norway（BN）大鼠的肝移植排斥模型为排斥组（n=5），从BN到BN的肝移植模型为耐受组（n=5）。术后24h，抽取血液，取肝脏及分离库普弗（Kupffer）细胞，检测肝脏上GITRL及肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达，Kupffer细胞上GITRL的表达，检测血清及细胞上清液中TNF-仪的表达。免疫组织化学染色强度采用Image-Pro Plus6．0图像分析软件分析。结果免疫耐受组和排斥组肝脏内的GITRL的平均染色强度分别为0．113±0．007和0．270±0．018（P〈0．05），TNF-α平均染色强度分别为0．114±0．004和0．141±0．005（P〈0．05），耐受组和排斥组的Kupffer细胞GITRL平均染色强度分别为0．206±0．017和0．337±0．018（P〈0．05），Kupffer细胞的培养上清液中，耐受组和排斥组TNF-α的值分别为（68．66-α21．12）、（178．33±29．39）ng／L（P〈0．05）。结论在排斥的早期阶段肝脏及Kupffer细胞的GITRL表达增高，监测和干扰GITRL可能有益于肝移植急性排斥反应的早期诊断和处理。
- 黄中荣魏思东李金政刘作金龚建平余正
- 关键词：肝移植急性排斥反应KUPFFER细胞
- 组蛋白去乙酰化酶11与基因表达被引量：1
- 2009年
- 组蛋白去乙酰化酶11（histone deacetylases11，HDAC11）是最新发现的第Ⅳ类HDACs成员，是调节APC细胞IL-10转录的关键因子，对移植免疫耐受的产生起着负性作用。HDAC11还与中枢神经系统的发育有着紧密联系。拟通过对HDAC11在染色质中的作用靶点和作用机制进行综述，以期为移植免疫耐受的诱导和神经系统的功能的调节寻找到适宜的靶点。
- 赖星董家刚龚建平
- 关键词：免疫耐受
- HBsAg-树突状细胞疫苗对肝移植后免疫抑制状态大鼠抗-HBs产生的影响
- 2010年
- 目的 观察乙型肝炎表面抗原（HBsAg）冲击的树突状细胞（DCs）疫苗对肝移植（LT）术后处于免疫抑制状态大鼠的抗HBs产生的影响。方法Lewis大鼠LT术后（BN大鼠为供体）给予大剂量他克莫司（FK506，2mg／kg），建立LT术后免疫抑制状态的动物模型，并随机分为两组。术后14d及28d，经腹腔注入HBsAgDCs疫苗者为HBsAg—DCs组（15只），连续观察12周，注入HBsAg疫苗200ul者为HBsAg组（15只）；未子免疫抑制的LT术后Lewis大鼠为对照组（5只）。切取肝脏组织行光、电镜检查；RT—PCR检测脾脏白细胞介素（IL）2、干扰素（IFN）YmRNA表达水平；酶联免疫吸附法检测血清IL-2、IFNy及抗HBs水平。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果大剂量FK506使HBsAgDCs组及HBsAg组动物处于高度免疫抑制状态，肝脏无排斥反应、IL2及IFNY表达水平明显低于对照组，t值为21．35～48．74，P值均〈0．05；HBsAg—DCs组在疫苗注射后1、2、3个月均能检测到高滴度的抗HBs，分别为（255．24±34．16）IU／L、（145．11±12．37）IU／L、（185．43±17．18）IU／L，明显高于HBsAg组（抗-HBs几乎为0），t值分别为45．24、47．69、58．38，P值均〈0．05。结论在LT术后处于免疫抑制状态的大鼠体内，HBsAg—DCs疫苗仍能诱导出高血清滴度的抗HBs。
- 李钺陈先锋刘作金龚建平李生伟
- 关键词：免疫抑制肝炎病毒乙型树突状细胞
- HBsAg冲击的树突状细胞疫苗的制备及免疫活性研究被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨利用HBsAg冲击树突状细胞(Dendritic cells,DC)制备HBsAg-树突状细胞疫苗(HBsAg-DC疫苗)的基本方法并检测其免疫活性。方法:收集Lewis大鼠骨髓细胞,加入含rGM-CSF(4ng/ml)及rIL-4(8ng/ml)的RPMI1640培养7d后,加入HBSAg(100μg/ml)再培育48h,即获得HBsAg-DC疫苗。倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测其表型;单向混合淋巴细胞反应评价HBsAg-DC疫苗的细胞免疫活性。结果:采用该方法可诱导扩增出较多数量和较高纯度DCs。HBsAg冲击DCs后,明显增强DCs的T细胞刺激活性。同种异体和自体之间T淋巴细胞增殖功能没有显著差异(P>0.05)。经HBsAg冲击后第3d(培养第10d)的DCs在异体T淋巴细胞增殖反应中能够诱导出很强的增殖应答反应;MTT比色法分析显示不同密度的DCs和HBsAg-DCs经丝裂霉素C处理后,均能明显刺激同种异体T细胞增殖,且该效应随着DCs和HBsAg-DCs数量的增加而逐渐增强(P<0.01);同密度的HBsAg-DCs比DCs的刺激作用更强,差异有显著性(P<0.01)。结论:本方法可以诱导扩增出较多数量和较高纯度DC,HBsAg-DC具有较强的抗原递呈能力。
- 李生伟李钺刘作金龚建平
- 关键词：疫苗乙型肝炎病毒树突状细胞
