山东省自然科学基金(ZR2010HQ010)
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 相关作者：姜笃银刘振中张基勋刘磊王魏更多>>
- 相关机构：山东大学第二医院中国医学科学院山东大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 深Ⅱ度烧伤皮肤构建复合皮移植模型的初步研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨利用深Ⅱ度烧伤皮肤(DBS)作为真皮替代物构建复合皮移植模型进行修复创面的可行性。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为深Ⅱ度烧伤真皮基质(DBDM)移植组(实验组)和无细胞真皮基质(ADM)移植组(对照组),每组10只。采用酶消化法,实验组取2只大鼠烫伤24 h后皮肤进行脱细胞等处理,制备DBDM;取新生24 h内乳鼠背部完整皮肤,修薄后与网状DBDM一次性重叠移植到大鼠背部约2 cm×2 cm全层皮肤缺损创面,14 d后观察复合皮生长情况。对照组采用Wistar大鼠正常皮肤制备的ADM替代DBDM,其他实验步骤同实验组。结果新鲜制备的DBDM呈浅黄白色,质地较柔软,有一定的韧性和伸展性,较ADM弱。镜下胶原纤维增粗和透明样变,排列紊乱、疏松,无细胞、血管和毛囊等成分存在。大鼠复合皮移植术后14 d,两组大鼠及移植物的成活率差异有统计学意义(P<0.05),双层复合皮与皮下组织紧密连接,深层DBDM或ADM呈粉红色,未见明显肿胀及炎性反应。与ADM相比,DBDM组移植物较早出现炎性细胞浸润和成纤维细胞、毛细血管长入;炎性细胞以中性粒细胞和巨噬细胞为主,新生胶原蛋白沉积较快,纤维排列规则、致密。结论 DBDM来源广泛、制备方法简单,移植物生物相容性好,无皮肤烧伤毒素样反应,可充当自体刃厚皮片的真皮替代物。本研究可为今后临床改造和利用烧伤皮肤提供新的思路。
- 朱绪国于冠英李耀南刘磊张基勋刘振中姜笃银
- 关键词：真皮基质复合皮
- 转化生长因子-β1噬菌体模拟肽促进成纤维细胞增殖的效果被引量：2
- 2015年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子β1(TGF-β1)噬菌体模拟肽,评估其促进人正常皮肤成纤维细胞增殖的效果。方法以人TGF-β1单克隆抗体为靶,生物淘选噬菌体模拟肽。选择其中一组与TGF-β1基因序列相似度最高的噬菌体模拟肽,设定4组,阴性对照组、噬菌体M13对照组、TGF-β1对照组和噬菌体模拟肽组。噻唑蓝(MTT)比色法定量测定活细胞数量以检测细胞的增殖。免疫荧光方法检测噬菌体模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞I型胶原蛋白(COL1)、Ⅲ型胶原蛋白(COL3)和结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽,选择与TGF-β1基因序列相似度最高的第一组噬菌体模拟肽进行实验。MTT结果显示,噬菌体模拟肽组能够促进成纤维细胞增殖(P<0.05)。免疫荧光结果显示,噬菌体上的模拟肽,而非噬菌体本身,能够与成纤维细胞结合;实时定量PCR的结果显示,48 h噬菌体模拟肽组COL1和COL3 mRNA的表达水平较阴性对照组和噬菌体M13对照组均明显增高(P<0.05),而CTGF的mRNA表达水平较阴性对照组和噬菌体M13对照组2 d时明显增高(P<0.05),3 d时表达有所降低(P<0.05)。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节CTGF的表达,调节成纤维细胞的增殖。
- 刘振中姜笃银王魏宗宪磊张基勋刘磊
- 关键词：成纤维细胞肽库噬菌体展示技术转化生长因子Β1细胞增殖
- 自噬相关基因Beclin1在大鼠深Ⅱ度烧伤皮肤中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的观察自噬相关基因Beclin1在大鼠深Ⅱ度烧伤皮肤中的表达,初步探讨自噬与烧伤皮肤之间的关系。方法 16只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(对照组)和烧伤组(实验组),每组各8只。实验组建立深Ⅱ度烧伤模型,烧伤后分别于1、3、7 d取材。组织学检查观察各组动物皮肤全层情况,免疫组化检测Beclin1在各组动物皮肤的表达,并行图像处理和统计学分析。结果 Beclin1基因在实验组表达阳性,对照组表达阴性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Beclin1基因在Wistar大鼠烧伤皮肤中的表达呈阳性,推测自噬参与深Ⅱ度烧伤皮肤的修复过程。
- 朱绪国刘磊姜笃银于冠英李川李耀南刘振中张基勋
- 关键词：自噬烧伤
- 转化生长因子β1噬菌体模拟肽抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究被引量：6
- 2011年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子（TGF）β1噬菌体模拟肽，评估其抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的作用。方法以人TGF—β1单克隆抗体为靶，生物淘选噬菌体模拟肽。噻唑蓝（MTT）比色法定量测定活细胞的数量。Annexin V—FITC／PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测对成纤维细胞的凋亡作用。免疫荧光测定检测模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞核因子κB（NF—κB），结缔组织生长因子（CTGF）的表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽，具有与TGF—β1、TGF—β2、TGF—β受体Ⅱ（TβRⅡ）、TGF—β诱导因子、NF—κB或细胞分裂原素活化蛋白激酶（MAPK）相似的序列。MTT比色测定结果显示4种（第7～10组）噬菌体模拟肽组能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖（P〈0．05）。免疫荧光测定显示是噬菌体上的模拟肽，而不是噬菌体本身，能够与瘢痕疙瘩成纤维细胞相结合；凋亡实验显示这4种噬菌体模拟肽能够轻度促使瘢痕疙瘩成纤维细胞发生轻度的晚期凋亡；实时定量PCR的结果显示这4种噬菌体模拟肽NF—κB的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．28、0．26、0．46、0．30倍，4种噬菌体模拟肽CTGF的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．26、0．60、0．34、0．17倍。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节NF—κB及CTGF的表达，调节瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。
- 刘振中姜笃银蔡景龙宗宪磊张基勋单菲王文婷王魏
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞肽库转化生长因子Β1细胞增殖
- 应用噬菌体随机十二肽库筛选TGF-β1相关模拟肽的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的应用噬菌体随机12肽库生物筛选获得转化生长因子-β1(TGF-β1)噬菌体模拟肽。方法以人TGF-β1单克隆抗体为靶,进行4轮生物淘选,随机挑取单克隆噬菌体,ELISA法检测单克隆噬菌体的结合力。对结合力较好的单克隆噬菌体提取噬菌体DNA,进行测序,行序列分析。结果经过4轮生物淘选,特异性噬菌体模拟肽获得了富集,ELISA检测结果显示,获得的一些噬菌体模拟肽具有较好的结合力,测序获得10个与促进成纤维细胞增殖或抑制细胞增殖有关的碱基序列。结论从噬菌体随机十二肽库中可淘选到与TGF-β1相关的噬菌体模拟肽。
- 刘振中姜笃银蔡景龙宗宪磊张基勋单菲王文婷王魏
- 关键词：测序
