河北省秦皇岛科技局转基因动物生产基因工程药物研究项目
- 作品数：21 被引量：292H指数：9
- 相关作者：李青旺李凤林高大威冯彩宁李健更多>>
- 相关机构：燕山大学西北农林科技大学西北农业大学更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 蕨菜总黄酮对宫颈癌作用的研究被引量：16
- 2009年
- 为了研究蕨菜中总黄酮含量及其对宫颈癌的抑制作用,试验通过建立小鼠宫颈癌U14模型及腹水瘤模型,研究蕨菜总黄酮体内抗宫颈癌活性及对小鼠免疫功能的影响,并测与肿瘤发生相关联的总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽还原酶指标来确定药物是否对肿瘤具有治疗作用。结果表明蕨菜总黄酮能够显著抑制实体瘤生长,提高U14腹水瘤模型小鼠的生命延长率,同时能够增强小鼠的抗氧化能力和清除自由基的能力,这很可能是蕨菜黄酮抗肿瘤作用的机制之一。
- 闫鑫李青旺李健
- 关键词：宫颈癌超氧化物歧化酶丙二醛谷胱甘肽还原酶总抗氧化能力
- 猪未成熟卵母细胞玻璃化冷冻的研究被引量：1
- 2007年
- 研究了乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)和甘油(GLY)这4种渗透性冷冻保护剂及其两两组合对玻璃化冷冻未成熟(GV期)猪卵母细胞的影响;比较了3种不同冻前预处理方法和2种不同的解冻方法。结果表明:EG组卵母细胞所取得的成熟率为12.90%,与DMSO组(8.62%)及EG和DMSO混合组(9.61%)差异不显著(P>0.05),但明显好于其他各组(P<0.05);6步预处理法和3步预处理法所取得的卵母细胞存活率和成熟率显著高于1步预处理法(P<0.05),成熟率分别为12.33%和11.11%;3步和4步解冻法取得的成熟率要显著好于1步解冻法,成熟率分别达12.70%、10.47%。
- 黄晶李青旺陈晓宇秦绪光李文烨吴淑云王翠玲
- 关键词：卵母细胞玻璃化冷冻体外成熟
- 天然黄酮类化合物分离纯化研究进展被引量：17
- 2008年
- 为了进一步分离纯化天然黄酮类化合物,综述了黄酮类化合物的分离纯化常用的方法有柱层析法、重结晶法、铅盐沉淀法及高效液相色谱法等方法,旨在为黄酮类化合物的研究、开发和应用提供借鉴。
- 李凤林李青旺高大威冯彩宁郜俊杰
- 关键词：黄酮类化合物分离纯化
- 马齿苋多糖对四氧嘧啶糖尿病小白鼠的降糖作用被引量：13
- 2008年
- 范玉生李青旺高大威李瑛支旭勃张婷冯波
- 关键词：马齿苋科抗糖尿病降糖作用四氧嘧啶多糖一年生草本植物
- 重组人神经生长因子β腺病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2008年
- [目的]克隆带有His标签的人神经生长因子β基因(human nerve growth factor beta,hNGF"β),并构建hNGF"β与EGFP基因复制缺陷型腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤的应用研究奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取人胎肝总RNA,应用RT-PCR方法以自行设计的带有His标签的引物来扩增NGF"β基因;将所扩增的NGF"β基因经酶切、纯化,与IRES-EGFP片段共同插入到Pshuttle-cmv载体中,测序后,利用基因同源重组技术构建hNGF基因的复制缺陷型腺病毒载体AdNGF"β,经鉴定,转染HEK293细胞,观察EGFP表达并检测重组腺病毒的病毒滴度。[结果]克隆的hNGF基因序列与GenBank中的hNGF基因序列完全一致并在3′端携带上His标签;重组腺病毒载体AdNGF-β经PacⅠ酶切得到大于23.0和4.5或2.9kb大小的2个片段,表明同源重组成功。2种重组腺病毒经脂质体介导转染293细胞后,均可观察到绿色荧光蛋白。收获病毒并测定感染滴度分别为1.00×109和0.99×109pfu/ml。[结论]克隆了带有His标签的hNGF"β基因,并成功构建了重组腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤研究奠定基础。
- 冯波李青旺肖波韩增胜支旭勃
- 关键词：基因克隆腺病毒
- 败酱草总皂甙抗小鼠宫颈癌活性研究被引量：5
- 2011年
- 为研究败酱草总皂甙抗小鼠宫颈癌活性,对败酱草粗提物采用AB-8型大孔吸附树脂分离纯化得到总皂甙,按照A(阴性对照)、C(250 mg/kg)、D(1 000 mg/kg)3个试验组对建立的小鼠U14宫颈癌模型进行灌胃试验,B(阳性对照)腹腔注射环磷酰胺(CTX),15 d后检测肿瘤生长抑制率,生命延长率,机体免疫器官(胸腺和脾脏)功能,抗氧化能力(过氧化氢酶CAT,超氧化物歧化酶SOD,总抗氧化能力T-AOC)等指标。结果显示,败酱草皂甙高、低剂量组瘤重显著降低(P<0.05);生命延长率显著提高(P<0.05);极显著促进免疫器官的生长(P<0.01);显著提高抗氧化能力(P<0.05)。表明败酱草总皂甙具有抑制U14宫颈癌小鼠生长作用,且该皂甙通过提高机体免疫功能和抗氧化能力来发挥抗肿瘤作用。
- 张永强耿果霞李青旺李健玮罕
- 关键词：败酱草总皂甙宫颈癌小鼠
- 一种构建全长cDNA文库的方法被引量：3
- 2007年
- 建立了一种以LD-PCR为基础的cDNA文库的快速构建方法。以人胎盘组织为材料获得总RNA,利用引物F1、R2在逆转录酶M-MLV的作用下合成cDNA第1链,进而利用引物F3、R4在DNA聚合酶的作用下通过LD-PCR方法合成cDNA第2链;双链cDNA经SfiⅠ酶切,通过T4 DNA连接酶连接到经相同酶切的JG45质粒载体后构建成cDNA文库,并对文库的容量、重组率以及多样性进行了分析。结果表明,通过该方法构建的cDNA文库容量约为7.01l×05个/μgds-cDNA,重组率为96%;对随机提取的100个克隆质粒的插入序列进行分析,共获得80个不同的cDNA序列,且未见重复序列。该法构建的cDNA质粒文库具有快速、简单的特点,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的基因分析。
- 刘红军李青旺吴淑云韩增胜刘智华李文烨
- 关键词：全长CDNA文库
- 人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响被引量：4
- 2009年
- 为了研究人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡、p53蛋白表达和Caspase-3活性的影响,试验采用MTT方法检测细胞的生长抑制率、DNA片段化试验检测细胞凋亡、流式细胞术测定细胞周期、Western-blot检测p53蛋白表达、Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性。结果表明:人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的抑制呈现时间和剂量依赖性,有73%的Hela细胞停滞在G0G1期;Western-blot检测结果显示人乳铁蛋白可以上调p53蛋白的表达;人乳铁蛋白作用48 h后Caspase-3的活性是0小时时的5.5倍,二者差异极显著(P<0.01)。结果说明人乳铁蛋白能显著抑制宫颈癌Hela细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡、调控细胞周期、上调p53表达、活化Caspase-3有关。
- 吴国芳李青旺李健韩增胜张勇宁国柱王磊
- 关键词：人乳铁蛋白细胞凋亡细胞周期P53CASPASE-3
- 四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型中体重与剂量关系的研究被引量：12
- 2007年
- 目前，糖尿病已严重威胁人类健康，其发病率已占世界人口的5％，并呈逐年上升趋势。四氧嘧啶（alloxan）是一种有效的致高血糖模型的化学药物，但研究者普遍反映建模的成功率不高，存在小剂量无效、大剂量致死的现象。燕山大学生物工程实验室经过多次重复试验发现，四氧嘧啶剂量与体重存在相关性。为了找出四氧嘧啶剂量与体重的规律性而设计了此次试验，以摸索适合不同体重小鼠糖尿病模型的最佳建模剂量。
- 刘智华李青旺高大威李瑛刘红军冯涛
- 关键词：四氧嘧啶小剂量糖尿病体重小鼠
- 天然黄酮类化合物含量测定方法研究进展被引量：36
- 2008年
- 为大规模地研究、开发和应用天然黄酮类化合物,综述了目前天然黄酮类化合物含量的测定方法,主要有紫外分光光度法(直接测定法、比色法、差示分光光度法及双波长和导数分光光度法)、薄层扫描法、高效液相色谱法、荧光光度法、超临界流体色谱法和毛细管电泳法等几种主要的方法。
- 李凤林李青旺高大威冯彩宁郜俊杰
- 关键词：黄酮类化合物
