河北省人事厅留学归国人员科技活动基金 作品数:15 被引量:72 H指数:4 相关作者: 李琪佳 甘洪全 郭力 于秀军 王志强 更多>> 相关机构: 河北医科大学第二医院 河北联合大学 河北联合大学附属医院 更多>> 发文基金: 日本文部科学省科学研究费补助金资助项目 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 交通运输工程 经济管理 更多>>
脑蛋白水解物注射液改善阿尔茨海默病认知功能的机理探究 被引量:3 2010年 目的通过研究脑蛋白水解物注射液(CL)对体外培养神经祖细胞(NPCs)增殖和分化的影响,探讨其改善阿尔茨海默病认知功能的机理。方法从成年大鼠脑不同区域原代及传代培养神经祖细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性,以免疫荧光染色法鉴定细胞性质,以蛋白印迹转移(Western blot)法检测蛋白质表达变化。结果CL处置明显增加神经祖细胞数及MAP2a/b、SynapsinⅠ表达水平。结论CL促进神经祖细胞增殖和向神经元分化,可能是其改善阿尔茨海默病认知功能的机理之一。 于秀军 楯林義孝 郭力关键词:脑蛋白水解物注射液 阿尔茨海默病 神经祖细胞 增殖 分化 小麦与叶锈菌互作过程中实时定量PCR内参基因的选择及TaSGR基因的表达分析 被引量:6 2015年 实时定量PCR(RT-q PCR)是确定基因功能的重要手段之一。为了量化基因表达水平,选择合适的内参基因是实验准确的先决条件。本文以小麦ACTIN1、ACTIN2、GAPDH、GAPDH2、ATUB、BTUB、EF1A1、EF1A2和TA共9个基因作为候选内参基因,在小麦(Triticum aesetrum)与叶锈菌(Puccinia triticina)互作过程中,利用RT-q PCR技术,检测这9个基因的表达情况。经ge Norm和Norm Finder软件分析可知,在小麦接种叶锈菌后不同时间点,GAPDH和TA基因的表达稳定性较高,可以作为RT-q PCR的内参基因。在此基础上,利用筛选得到的最适内参GAPDH对小麦与叶锈菌互作过程中,Ta SGR基因的相对表达量做了定量分析。结果显示,在亲和组合接种后中后期,Ta SGR基因的相对表达量迅速增加,达到了对照的近7倍水平,而在不亲和组合接种后不同时间点,Ta SGR基因的表达量与对照0 h相比差异均不明显。 李晖 牛宏伟 刘娜 陈琰 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 RT-QPCR 内参基因 GENORM NORMFINDER 骨关节炎患者关节软骨及滑膜中MMP-9、IL-6的表达 被引量:31 2011年 目的探讨骨关节炎中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、白介素6(IL-6)mRNA和蛋白的表达。方法采用免疫组织化学技术检测60例骨关节炎病例(OA组)及20例正常对照关节软骨及滑膜MMP-9、IL-6蛋白的表达水平;采用原位分子杂交技术检测30例OA及10例正常对照关节软骨及滑膜MMP-9、IL-6 mRNA的表达水平。结果 MMP-9 mRNA和蛋白在OA组阳性表达的积分光密度(IOD)值均高于正常对照组[(8.38±2.29)vs(3.52±1.36),P<0.01;(9.18±3.58)vs(3.83±1.48),P<0.01],OA中二者的表达正相关性(r=0.924,P<0.01);IL-6 mRNA和蛋白在OA组阳性表达的IOD值均高于正常对照组[(8.74±3.62)vs(5.91±1.53),P<0.01;(8.96±3.57)vs(6.87±1.43),P<0.01],OA中二者的表达亦正相关(r=0.917,P<0.01);MMP-9 mRNA、IL-6 mRNA及相应蛋白在OA中的表达均正相关(原位杂交r=0.426,P<0.05;免疫组化r=0.444,P<0.01)。结论 MMP-9、IL-6在OA关节软骨与滑膜中呈高表达,二者对OA的发生发展可能起促进作用。 郭静 闫冰 李琪佳 甘洪全 王志强关键词:骨关节炎 基质金属蛋白酶9 白介素6 原位杂交 成骨细胞及血管内皮细胞复合同种异体颗粒骨治疗大鼠股骨头坏死 被引量:3 2011年 目的探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)来源的大鼠同种异体成骨细胞(osteo-blast,OB)及血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VEC)与同种异体颗粒骨复合后治疗大鼠创伤性股骨头坏死(osteo-necrosis of the femoral head,ONFH)的可能性。方法 36只6月龄SD大鼠,分为模型组、同种骨组及OB+VEC+同种骨组(n=12)。同时取4周龄SD大鼠BMSCs体外分离培养,取第3代细胞复合同种颗粒骨;制备大鼠创伤性股骨头坏死动物模型(圆韧带离断法)并分别在术后1、2、4、6周处死动物并取材。扫描电镜观察两种细胞在支架上的生长情况;免疫细胞化学技术检测诱导后血管内皮细胞CD34、CD31的表达;碱性磷酸酶(ALP)染色及Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色鉴定成骨细胞;5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-deoxy Uridine,BrdU)体外标记成骨细胞及内皮细胞,动物体内示踪两种细胞动力学。光镜观察病理形态改变;通过骨形态计量学参数计算新骨生成量,包括骨小梁面积百分率(percent trabecular area,%Tb.Ar)、骨小梁厚度(trabecular bone thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(trabecular bone number,Tb.N)、骨小梁分离度(trabecular bone separation degree,Tb.Sp)。结果 BMSCs诱导来源的成骨细胞其ALP染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色均呈阳性反应;血管内皮细胞表达了其标志物CD31、CD34。两种细胞与同种骨有良好的组织细胞相容性,细胞在其表面及壁内平铺、伸展、生长状态良好。OB+VEC+同种骨组新骨生成量均多于模型组及同种骨组,各项新骨形成参数均高于模型组及同种骨组(P<0.01)。结论 OB+VEC+同种骨支架材料在治疗实验性大鼠ONFH中其促成骨能力优于单纯同种异体颗粒骨。 李琪佳 郭静 甘洪全 宋会平 白俊清 王志强关键词:骨髓基质干细胞 成骨细胞 血管内皮细胞 同种异体骨 股骨头坏死 血小板源生长因子和脑源性神经营养因子促进NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞向神经元分化 2009年 目的探讨血小板源生长因子(PDGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)分化的作用。方法根据文献方法从成年大鼠海马原代培养NG2细胞,7d后添加10~40ng/mlPDGF和/或BDNF继续培养7d,以免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果10ng/mlPDGF和BDNF联合处置明显增加Map2a/b、GAD67和GABA表达水平。结论PDGF和BDNF联合处置促进NG2细胞向神经元(特别是GABA能抑制性中间神经元)分化。 于秀军 楯林義孝 郭力关键词:血小板源生长因子 脑源性神经营养因子 神经祖细胞 分化 脑蛋白水解物注射液对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞增殖的影响 被引量:2 2009年 目的探讨脑蛋白水解物注射液(Cerebrolysin,CL)对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)增殖的作用。方法根据文献从成年大鼠海马原代及传代培养NG2细胞,以免疫荧光染色法鉴定细胞性质,以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性,以原位缺口末端标记技术(即TUNEL法)观察细胞凋亡,5'-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法鉴定新生细胞。结果CL处置明显增加NG2细胞数,并显著减少TUNEL阳性细胞数,但对BrdU阳性细胞数无明显影响。结论CL能抑制NG2细胞凋亡,从而促进NG2细胞的增殖。 于秀军 楯林義孝 郭力关键词:脑蛋白水解物注射液 神经祖细胞 增殖 凋亡 高应力深部巷道破碎围岩锚壳喷支护技术研究 高应力深部巷道围岩稳定性控制是国内外采矿及岩石力学界研究的重点和焦点。随着矿山工程开采规模的扩大和井巷工程延伸的增多,高应力深部巷道围岩维护问题日益突出。在国内外大采深巷道支护现状的分析及对我国大采深巷道维护状况的现场调... 李金奎 王金安 李大屯 李鸿雷 王金喜关键词:深部巷道 破碎围岩 文献传递 TRAIL、Ki-67蛋白在人骨肉瘤中表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系 被引量:3 2011年 目的:通过观察TRAIL、Ki-67在人骨肉瘤组织中的表达规律及其相互关系,探讨二者与骨肉瘤细胞增殖、凋亡的相关性。方法:用免疫组织化学方化法检测TRAIL、Ki-67蛋白在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达,用TUNEL方法通过激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤组织中的细胞凋亡分布情况并计算增殖和凋亡指数。结果:骨肉瘤组织TRAIL蛋白表达强度低于骨软骨瘤(t=-5.51,P<0.05);而Ki-67蛋白表达高于骨软骨瘤(t=17.69,P<0.05)。TRAIL和Ki-67在骨肉瘤中的表达呈负相关(r=-0.8444,P<0.01)。骨肉瘤中细胞凋亡指数(AI)显著低于骨软骨瘤(P<0.01);而增殖指数(PI)显著高于骨软骨瘤(P<0.01)。骨肉瘤中Ki-67蛋白表达与细胞凋亡指数之间呈负相关(r=-0.562 2,P<0.01);而TRAIL蛋白表达与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.635 0,P<0.01),而与增殖指数呈负相关(r=-0.5530,P<0.01)。结论:TRAIL参与细胞凋亡的调控,可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础之一;Ki-67在肿瘤细胞的增殖与凋亡中具有重要作用,骨肉瘤组织中Ki-67明显过表达,而TRAIL蛋白表达明显下调,表明两者在骨肉瘤的发生、发展中起拮抗作用。如能抑制Ki-67的表达,促进TRAIL的表达,有可能提高骨肉瘤细胞的凋亡敏感性。 付文娟 李琪佳 甘洪全 孙芳初 王连立关键词:骨肉瘤 TRAIL 从成年大鼠海马分离培养NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞的新方法 被引量:3 2009年 目的探索建立从成年大鼠海马分离培养高纯度NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)的简便方法。方法从成年雌性大鼠解剖出海马,经木瓜蛋白酶消化和Optiprep不连续梯度离心,从离心产生的组织细胞密集带,用含B27添加剂和碱性成纤维细胞生长因子2(FGF2)的NeurobasalA培养液,分离培养出增殖性细胞,免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果应用上述方法,可从成年大鼠海马简便地培养出纯度大于90%的NG2细胞,此细胞具有神经干细胞(NSCs)潜能,在FGF2作用下可迅速增殖并传代。结论此方法在纯度、产出率和简便性等方面改进了成体NG2细胞的原代培养技术。 于秀军 楯林義孝 郭力关键词:海马 NG2 原代培养 神经祖细胞 脑内定位系统的发现及意义 2015年 位置感知和导航是大脑最基本的功能,然而多年来,科学家一直未能揭示这一功能的机制。约翰·奥·基夫和莫泽夫妇的研究成功解决了这个难题,他们分别发现了定位系统的位置细胞和网格细胞,发现了大脑如何创建周围空间的"地图",以及如何在复杂环境中定位的路径。这一成果对于研究人脑的定位系统及神经系统的相关疾病提供了理论基础,因此获得了2014年的诺贝尔生理学或医学奖。 王利鹏 常彦忠关键词:内嗅皮层