河北省自然科学基金(C2005000741)
- 作品数：4 被引量：62H指数：4
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- 相关机构：河北医科大学河北师范大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 影响虎杖毛状根高频诱导的因素探讨被引量：21
- 2005年
- 利用发根农杆菌ATCC 15834对虎杖(R eynoutria jap on ica Hou tt.)进行遗传转化,探讨影响其毛状根高频诱导的因素.结果表明:成熟叶片是转化效率较高的外植体,感染10 d左右可形成毛状根,平均诱导率为55.66%,诱根密度为4.30.经PCR检测,证实农杆菌R i质粒中的rolB及tm s基因全部转入毛状根中.改良YEB培养液活化菌种后对出根作用不显著;叶片未经预培养而直接进行感染,其出根效果要明显好于经过M S0或利用TDZ预培养处理(P<0.01),毛状根平均诱导率可达到81.84%,诱根密度为7.04;稀释菌液浸泡、超声振荡或微波辐射处理均可促使叶片提前出根,其中以超声处理30 s效果最显著(P<0.01);感染叶片上表皮向上放置进行共培养有利于毛状根形成.在优化各种转化条件后,虎杖毛状根平均诱导率可提高到97.1%,诱根密度达到11.3.
- 于树宏赵丽丽王伟张嫡群
- 关键词：虎杖毛状根
- TDZ和CPPU在虎杖组织培养中的应用被引量：17
- 2006年
- 将高活性细胞分裂素类物质TDZ和CPPU应用于虎杖的组织培养研究.经实验筛选发现,虎杖茎段比叶柄、叶片更容易诱导愈伤组织的形成,其诱导愈伤组织较适的培养基组成为MS+0.5mg/LCPPU+0.2mg/LNAA,适宜的愈伤组织增殖培养基为SH+0.05mg/LTDZ+1.0mg/LNAA;诱导芽分化的适宜培养基为MS+0.05mg/LTDZ+0.5mg/LNAA;促进幼苗生长的培养基为MS+0.1mg/LCPPU+1.0mg/LNAA+0.5%活性炭;快速生根及壮苗的培养基为1/2MS+1.0mg/LNAA+0.5%活性炭.TDZ和CPPU在愈伤组织的诱导、不定芽的分化及组培苗的生长等方面表现出不同的效果.以此方式进行虎杖人工快速繁殖,繁殖系数可达到5～7,繁殖时间缩短为2～3wk.
- 于树宏张嫡群杨双革
- 关键词：虎杖TDZCPPU
- 虎杖野生植株及组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷含量的比较被引量：15
- 2006年
- 目的:比较白藜芦醇和虎杖苷在不同来源的虎杖材料中含量积累的差异,以期筛选出适宜的培养材料用于进一步的代谢调控研究。方法:采用反相高效液相色谱法对不同样品中白藜芦醇及虎杖苷的含量同时进行检测。结果:在多年生野生植株和室内人工栽培幼苗中,白藜芦醇和虎杖苷均在植物根及根茎部特异性累积,其含量要远远高于叶片和茎段。其中,以室内人工栽培3个月的幼苗中有效成分含量较高,虎杖苷的积累量为1.27%,是野生植株的1.25倍,白藜芦醇含量(0.401%)则接近野生植株水平。从虎杖的各种组织培养物中也可检测到白藜芦醇和虎杖苷的存在,但是二者含量的高低与培养物的生长速度、生理状况及发育时期密切相关。在几种培养物中,以毛状根的培养最具潜力,离体培养30 d后,其干重增长率为8.29,分别是自然根和悬浮细胞的8.4倍和192.8倍,而且还可积累一定量的虎杖苷(0.037%)和白藜芦醇(0.007%)。结论:所建立的分析检测方法,具有快速、简便和准确的特点,尤其适于大批量生物样品的同时测定。在几种不同来源的虎杖材料中,毛状根是适宜大规模培养并可持续收获有效成分的培养物。
- 于树宏查建蓬詹文红张嫡群
- 关键词：虎杖白藜芦醇虎杖苷反相高效液相色谱法
- 利用基因转化提高虎杖毛状根中活性成分的含量被引量：13
- 2007年
- 通过转白藜芦醇合酶（resveratrol synthase，RS）基因提高虎杖毛状根中主要活性成分——白藜芦醇（resveratrol，RE）和白藜芦醇苷（polydatin，PD）的含量。用改进的高盐低pH法提取葡萄基因组DNA，通过PCR扩增获得RS基因序列，构建表达载体pCAMBIA1300—35S—RS，然后采用冻融法转化发根农杆菌ATCC11325，继而浸染划伤的虎杖无菌幼苗叶片，PCR和RT—PCR法鉴定RS基因在虎杖毛状根中的整合与表达，高效液相色谱（highly effective liquid chromatography，HPLC）法测定转基因毛状根中RE及PD的含量。首次成功诱导获得转RS基因虎杖毛状根，经鉴定该基因已在虎杖毛状根中得到整合与表达，RE和PD的含量分别为17～187μg·g^-1DW和836～1970μg·g^-1 DW，而未转基因虎杖毛状根中RE和PD的含量分别为0～130μg·g^-1 DW和190～320μg·g^-1 DW。在所选取的不同根系中，转基因毛状根PD的含量均得到显著提高，最高含量是未转基因毛状根的5倍，而RE含量提高不显著。
- 苗晓燕于树宏沈银柱黄占景
- 关键词：虎杖毛状根RESVERATROL白藜芦醇白藜芦醇苷
