四川省应用基础研究计划项目(无)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
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- 鸭肝炎病毒鸡胚化弱毒MY株VP1基因克隆、原核表达及抗原性分析被引量：5
- 2010年
- 应用巢氏PCR(nested-PCR)扩增出1型鸭肝炎病毒鸡胚化弱毒MY株结构蛋白VP1基因片段,将VP1克隆到pMD18-T载体上,测序结果为714 bp,GenBank登录号:GU363950。对MY株VP1基因编码蛋白的主要抗原位点进行预测,aa208-aa222氨基酸区段表现很高的亲水性、抗原指数和表面可及性。VP1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆至pET32a(+)原核表达载体,获得重组质粒pET-VP1,转入BL21 PLyss(DE3)细胞中,IPTG诱导后SDS-PAGE检测结果表明,在大肠杆菌中表达了1个相对分子质量为47 ku的融合蛋白。Western blotting分析结果表明,该重组蛋白可与鸭肝炎标准阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
- 向毅勇罗薇靳艳玲刘内生刘群龙虎
- 关键词：鸭肝炎原核表达BLOTTING
