国家教育部博士点基金(20040159002)
- 作品数：9 被引量：26H指数：4
- 相关作者：方文刚马怡然陈誉华郭大文尚德淑更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部跨世纪优秀人才培养计划辽宁省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠海马内注射β淀粉样蛋白促进神经细胞增殖被引量：4
- 2008年
- 目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记细胞和doublecortin(DCX)阳性细胞。结果海马内注射Aβ_(1- 42)后引起海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)和侧脑室下层(subventricular zone,SVZ)Brdu标记细胞及DCX阳性细胞显著增加(P<0.01)。双免疫荧光分析表明许多Brdu标记细胞表达DCX。结论Aβ沉积可以促进脑内的神经细胞增殖,提示这种现象可能为阿尔茨海默病的一种代偿性应答。促进神经细胞增殖的措施对于治疗阿尔茨海默病具有重要的价值。
- 郭大文马怡然方文刚陈誉华
- 关键词：Β淀粉样蛋白神经细胞增殖阿尔茨海默病
- 巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。
- 尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华
- 关键词：人脑微血管内皮细胞血脑屏障
- 巨噬细胞炎症蛋白1α促进6T-CEM细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层被引量：1
- 2006年
- 有研究表明,T细胞可能参与阿尔茨海默氏病(AD)免疫过程,但T细胞如何穿过血脑屏障内皮细胞紧密连接,到达脑内还不清楚。我们研究曾发现,AD病人外周血T淋巴细胞穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)单层能力高于同龄正常人,其T淋巴细胞巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)表达明显增高。为进一步在体外研究促使T淋巴细胞穿过HBMEC单层的机制,选取重组人MIP-1α(rhMIP-1α)作用于HBMEC,同时选用高表达MIP-1α的人急性白血病T淋巴细胞(6T-CEM)作为模式细胞,与HBMEC共同温育。发现rhMIP-1α可促进6T-CEM细胞穿过HBMEC单层,并使HBMEC单层紧密连接结构发生改变。在6T-CEM细胞或rhMIP-1α与HBMEC单层单独温育过程中,均引起HBMEC单层CCR5表达变化。提示MIP-1α可能通过与HBMEC单层上CCR5相互作用介导T淋巴细胞穿过HBMEC单层。
- 尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华宋今丹
- 关键词：巨噬细胞炎症蛋白1Α人脑微血管内皮细胞
- CCR5介导6T-CEM细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层能力分析被引量：1
- 2008年
- 目的为进一步研究T细胞在阿尔茨海默病(AD)患者脑内发挥的作用,探讨CCR5在6T-CEM穿过人脑微血管内皮细胞(HBMECs)过程中所发挥的生物学功能。方法应用免疫荧光和Western blot等技术,集中探讨了HBMECs膜受体CCR5在6T-CEM细胞穿过HBMECs过程中作用。结果在6T-CEM细胞与HBMECs单层单独孵育过程中,引起HBMECs膜受体CCR5表达变化;HBMECs膜受体CCR5的高表达使6T-CEM细胞穿过HBMECs单层能力增强。结论HBMECs膜受体CCR5参与了6T-CEM细胞穿过HBMECs单层过程。
- 马怡然尚德淑赵伟东方文刚陈誉华
- 关键词：趋化因子受体5人脑微血管内皮细胞
- 大鼠海马内注射β淀粉样蛋白诱导外周血T细胞MIP-1α过表达及其穿过血脑屏障被引量：5
- 2006年
- 为观察脑内β淀粉样蛋白(amyloidbeta,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障的影响,通过立体定位仪将Aβ1～42肽注射到大鼠双侧海马(以Aβ42～1反序列肽为对照),实时定量PCR(RT-qPCR)检测发现,Aβ1～42上调了外周血T细胞中巨嗜细胞炎症蛋白(macrophageinflammatoryprotein-1α,MIP-1α)的表达,同时免疫荧光分析显示,脑内的Aβ1～42也引起了脑微血管内皮上MIP-1α受体(CCR5)的表达增加,以及伴随的脑实质内T细胞数量的增加.然而,大鼠腹腔内注射抗MIP-1α中和抗体则阻断了Aβ1～42所致的脑内T细胞数量的增加.提示脑内Aβ沉积能诱导外周血T细胞MIP-1α依赖性迁移入脑.
- 郭大文马怡然方文刚陈誉华
- 关键词：MIP-1Α血脑屏障
- 小胶质细胞的活化对其Aβ吞噬能力的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究活化的小胶质细胞对β淀粉样蛋白吞噬能力的影响。方法以Aβ1-42直接作用于小胶质细胞系细胞BV-2,NO检测试剂盒检测培养液中NO含量;CyQuent增殖试剂盒检测小胶质细胞BV-2的增殖情况,以及共聚焦显微镜观察小胶质细胞BV-2的Aβ吞噬能力。结果在Aβ1-42作用下,小胶质细胞BV-2释放的NO增加,小胶质细胞BV-2增殖能力增强,并且小胶质细胞BV-2的Aβ吞噬能力增强。结论Aβ沉积诱导小胶质细胞BV-2NO释放和细胞增殖,从而使其从静止态转为活化状态,最终导致活化的小胶质细胞Aβ吞噬能力增强。
- 马怡然郭大文孙伟方文刚
- 关键词：Β淀粉样蛋白
- 大鼠海马内注射β淀粉样蛋白对脑内小胶质细胞活化和神经元凋亡的影响
- 2007年
- 目的 观察脑内β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法 通过立体定位技术将Aβ1-42注射至大鼠双侧海马，对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后3、7、14d，用免疫组织化学和免疫荧光法检测CD11b、MHCⅡ及活化caspase-3的表达。结果 海马内注射Aβ1-42后3d，大鼠脑内CD11b和MHCⅡ阳性小胶质细胞数量[分别为（345．22±75．86）和（200．22±42．88）]，较PBS组[分别为（98．61±20．79）和（35．43±12．46）]和Aβ42-1组[分别为（103．44±22．13）和（43．41±15．63）3明显升高（P〈0．01），7d达到高峰[分别为（486．22±81．51）和（223．62±66．99）]，表现为明显的激活状态。注射后3d，大脑皮质、海马的活化caspase-3阳性细胞数量（132．42±31．80）比PBS组（4．41±3．13）和AB㈨组（4．85±3．70）明显升高（P〈0．01），7d后更明显（165．24±33．95），以海马更为显著。结论 海马内注射A？可以诱导小胶质活化和神经细胞凋亡，有可能作为研究阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）发病早期的动物模型。
- 郭大文马怡然方文刚陈誉华
- 关键词：淀粉样Β蛋白小神经胶质细胞
- 细胞紧密连接的结构组成及其调控的研究进展被引量：9
- 2010年
- 紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的信号调节、组成蛋白间的相互作用调控机制以及在生命活动中意义,为寻找某些疾病的治疗方案提供一定的理论基础。
- 马怡然尚德淑方文刚陈誉华
- 关键词：细胞紧密连接蛋白质组成信号调节细胞间隙内皮细胞
- 小胶质细胞和外周血T细胞对大鼠海马内β-淀粉样蛋白沉积的应答反应被引量：2
- 2006年
- 目的观察海马内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障及脑内小胶质活化的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42合成肽注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后7天,用免疫荧光和免疫组织化学法检测CD3、CD11b及MHCⅡ类分子的表达。结果海马内注射Aβ1-42后7天大脑皮质深部和海马区出现大量CD3阳性T细胞,比对照组明显增多(P<0.01);CD11b和MHCⅡ类分子阳性小胶质细胞数量也显著高于对照组(P<0.01),表现为明显激活状态。结论大鼠海马内Aβ沉积引起外周血T细胞穿过血脑屏障进入脑内增多,并影响了小胶质细胞增生、活化。
- 郭大文马怡然方文刚陈誉华
- 关键词：Β-淀粉样蛋白小胶质细胞血脑屏障
