国家自然科学基金(30972707)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG抗原肽的制备及免疫原性观察
- 2011年
- 目的制备髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）抗原肽,并观察其免疫原性。方法采用改进的Fmoc固相合成法制备MOG35~55抗原肽;以合成的MOG35~55抗原肽加完全弗氏佐剂（CFA）免疫C57BL/6小鼠,观察小鼠发病情况,并对小鼠脊髓和脑组织进行病理学检查。结果成功制备了MOG35~55抗原肽,精肽产率13.58%,纯度95%;MOG35~55抗原肽免疫后15 d起,小鼠开始陆续出现自身免疫性脑脊髓炎（EAE）临床症状,至第21天8只小鼠均发病,光镜下观察EAE小鼠脊髓和脑组织可见典型的炎性细胞浸润。结论采用改进的Fmoc固相合成法可制备具有良好免疫原性的MOG35~55抗原肽,用以制备C57BL/6小鼠EAE模型,发病率高,模型稳定。
- 李黎周晴晴王艳静闫红霞石雨刘喜龙康巧珍
- 关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白自身免疫性脑脊髓炎
- 细胞膜骨架蛋白4.1R对光动力效应的影响
- 2014年
- 目的 探讨细胞膜骨架蛋白4.1R对光动力效应的影响.方法 将4.1R基因敲除型（4.1R-/-）和野生型（4.1R＋/＋）小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）分别以0.25、0.50、1.00、1.50、2.00mmol/L浓度的5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）孵育,72、96、120、180、240mJ/cm2剂量的450 nm蓝光照射进行光动力处理,细胞增殖检测试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率;经不同浓度5-ALA孵育的细胞,以荧光分光光度法检测胞内光敏剂原卟啉的荧光强度;以1.00 mmol/L的5-ALA孵育细胞后激光共聚焦显微镜观察胞内产生的原卟啉在细胞中的定位;Western印迹法检测原卟啉合成限速酶亚铁螯合酶（FECH）与胆色素原脱氨基酶（HMBS）蛋白表达水平.结果 5-ALA光动力处理均能杀伤两种细胞,其杀伤作用与5-ALA的浓度、孵育时间及光照射剂量相关,但两者PDT杀伤效果不同.当1.00mmol/L的5-ALA孵育4.0h且光照射剂量为120mJ/cm2时,4.1R-/-MEF存活率显著高于4.1R＋/＋MEF[（46.9±7.1）％比（12.5±2.1）％,P＜0.001].5-ALA孵育细胞后产生的原卟啉分布于整个胞质中,但两种细胞中原卟啉的浓度不同,在1.00 mmol/L的5-ALA孵育4.0h时,4.1R＋/＋MEF内原卟啉荧光值显著高于4.1R-/-MEF（124.2±3.5比34.6 ±3.8,P＜0.001）.Western印迹结果表明FECH与HMBS在两种细胞中的表达水平差异无统计学意义.结论 蛋白4.1R的缺失造成细胞内原卟啉合成量降低,PDT效果下降,但并未影响ALA代谢过程,推测蛋白4.1R影响了5-ALA的跨膜转运,进而影响细胞内原卟啉的合成,最终影响了PDT杀伤效应.
- 范丹丹李懿李建辉宁姝威禹丽娜张立果范天黎杨小静裘一兵康巧珍汲振余
- 关键词：光化学疗法成纤维细胞胚胎
- 蛋白4.1家族在不同乳腺癌细胞株中的表达与定位被引量：1
- 2010年
- 背景与目的:目前,已在多种人类肿瘤中发现蛋白4.1家族成员表达异常。本研究旨在通过检测蛋白4.1家族成员(4.1R/B/G/N)在3株转移能力不同的人乳腺癌细胞株MCF-7、T-47D和MDA-MB-231中的表达和定位,探讨蛋白4.1家族成员与乳腺癌细胞转移能力之间的关系。方法:采用Westernblot检测蛋白4.1家族成员在MCF-7、T-47D和MDA-MB-231细胞中的表达;免疫荧光标记对蛋白4.1家族成员在3株细胞中的表达进行定位。结果:4.1R/B/G在3种细胞系中均有表达,在T-47D细胞中的表达量均明显高于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.05);但在高转移性的MDA-MB-231细胞中它们的表达水平转而下降。4.1N在T-47D细胞中的表达量明显低于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.01),而在MDA-MB-231细胞中的表达则几乎检测不到,提示4.1N表达下调或缺失与乳腺癌细胞转移能力密切相关。4.1R/B/G/N在MCF-7和T-47D细胞中均主要定位于细胞膜及胞间连接处,同时4.1B在细胞核中也有表达;而在高转移的MDA-MB-231细胞中蛋白4.1家族成员均定位于细胞质中,提示蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变可能是乳腺癌细胞转移过程中的重要事件。结论:4.1N表达缺失和蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变与乳腺癌细胞MDA-MB-231的高转移性密切相关。
- 闫红霞时晓芳孔超郭欢高艳锋祁元明汲振余陈鲤翔安秀丽康巧珍
- 关键词：MCF-7MDA-MB-231
