河南省基础与前沿技术研究计划项目(072300450300)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人肝脏胶原样凝集素1在中国仓鼠卵巢细胞内定位被引量：3
- 2008年
- 目的:使用已构建的真核表达载体pEGFP-CLL1转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,探讨CL-L1在CHO细胞内的定位。方法:使用免疫荧光标记技术和Western blot检测EGFP-CLL1融合蛋白在细胞内的表达部位。结果:融合蛋白主要存在于细胞质基质中,不存在于内质网、高尔基体和细胞核等部位。结论:CL-L1为已发现惟一存在于细胞质基质中的胶原样凝集素成员。
- 李付广杨桂枝王芳杜英
- 关键词：蛋白定位高尔基体
- 人CL-L1基因片段的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 2009年
- 目的获取重组人CL-L1颈区-糖识别区纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法采用PCR方法扩增人CL-L1颈区-糖识别区目的基因片段,构建原核表达载体,进行原核表达与蛋白纯化,然后免疫家兔,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,免疫印迹法检测蛋白纯度和抗体的特异性。结果成功构建了人CL-L1颈区-糖识别区原核表达载体pRSET-C/NECK-CRD△K,在E.coliBL21中表达,镍亲和层析柱纯化,得到相对分子质量19 200的融合蛋白,免疫家兔后收获抗血清,ELISA显示抗体效价为1/20 000,具有高度特异性,免疫印迹结果显示制备的多抗可以与重组人CL-L1颈区-糖识别区蛋白特异性结合。结论本研究获得了人CL-L1颈区-糖识别区纯化蛋白,制备了人CL-L1颈区-糖识别区多克隆抗体,为CL-L1的结构、组织表达谱和功能的研究奠定了基础。
- 李付广王芳杨桂枝杜英
- 关键词：原核表达蛋白质纯化抗体制备
