国家自然科学基金(81272278)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 相关作者：胡俊波李小兰邹声泉杨锐王桂华更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院潍坊市人民医院更多>>
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- hSav1在结直肠癌组织中的表达及其意义
- 2014年
- hSavl（human Salvadorl）是Salvador在人类的同源蛋白,参与了细胞内的许多事件,近年来其在肿瘤发生发展中的作用引起研究者的关注.本研究应用Realtime-PCR、Western blot及免疫组织化学的方法检测hSavl在结直肠癌组织中的表达情况,并探讨其与结直肠癌临床病理特征之间的关系.
- 杨锐李小兰王桂华邹声泉胡俊波
- 关键词：直肠癌组织肿瘤发生发展临床病理特征同源蛋白BLOT结直肠癌
- 磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基3在非小细胞肺癌上皮-间充质转化及迁移中的作用被引量：9
- 2015年
- 目的 观察磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基3（PIK3R3）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,及PIK3R3对NSCLC细胞株A549和PC-9上皮-间充质转化（EMT）及迁移的影响.方法 分别提取22对NSCLC患者的肿瘤组织和癌旁组织中的总RNA及和7对标本中总蛋白,分别检测PIK3R3mRNA水平和蛋白表达;在A549和PC-9中通过感染慢病毒高表达或抑制PIK3R3后,通过Transwell迁移实验检测其对细胞迁移的影响,通过Western blot法检测上皮细胞钙黏蛋白（CDH1）、波形蛋白（VIM）、蜗牛族锌指1（SNAI1）及蜗牛族锌指2（SNAI2）等EMT相关蛋白的变化,并通过染色质免疫共沉淀法检测SNAI1及SNAI2结合于CDH1启动子的能力,通过双荧光素酶报告系统检测CDH1的转录活性变化.结果 在NSCLC临床标本中,PIK3R3在肿瘤组织中的表达水平高于癌旁组织;在A549和PC-9中高表达PIK3R3后,穿膜细胞数增加[A549 Control：（46 ±3）个,PIK3R3：（92±5）个;PC-9 Control：（25±2）个,PIK3R3：（53±3）个],细胞的迁移能力增强,同时EMT相关的上皮标志蛋白CDH1表达降低,而间质标志蛋白VIM、SNAI1及SNAI2的表达升高,SNAI1及SNAI2结合于CDH1启动子的能力分别增强9.0倍及3.8倍,同时CDH1的转录活性降低70％;而抑制HK3R3的表达后,穿膜细胞数[A549 sh-Control：（58±5）个,sh-HK3R3：（13±3）个;PC-9 sh-Control：（28±5）个,sh-PIK3R3：（10±3）个],细胞的迁移能力减弱,伴随CDH1表达增高,而VIM、SNAI1及SNAI2的表达降低,同时SNAI1及SNAI2结合于CDH1启动子的能力分别降低70％,相应CDH1的转录活性增高3.6倍.结论 在NSCLC标本中PIK3R3的表达增高,在NSCLC细胞株中高表达PIK3R3可诱使其发生EMT,并促进其迁移能力,而抑制PIK3R3的表达可逆转上述过程.
- 杨熹胡福清李海杰兰静芩罗学来龚建平胡俊波
- 关键词：非小细胞肺癌迁移上皮-间充质转化
- p55PIK上调血管内皮生长因子促进结肠癌细胞血管的生成的作用被引量：3
- 2014年
- 目的 观察p55PIK对结肠癌细胞（HT29）的血管内皮生长因子（VEGF）分泌及其对成瘤的影响,探讨肿瘤中p55PIK与血管生成之间的关系.方法 以携带有p55PIK基因的腺病毒感染肿瘤细胞,用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测空白组以及感染空腺病毒和p55PIK腺病毒的肿瘤细胞中VEGF mRNA水平表达差异;用Western blot的方法检测肿瘤细胞VEGF蛋白水平的表达差异;并以感染空腺病毒和感染p55PIK腺病毒的HT29细胞种植裸鼠,观察p55PIK对成瘤性的影响;以移植瘤行免疫组织化学染色,比较p55PIK、VEGF和CD31在组织中表达水平的差异.结果 细胞内过表达p55PIK后,VEGF mRNA表达水平较对照组和空腺病毒组增高2.7倍（P＜0.01）,蛋白表达水平也明显增高（P＜0.01）;成瘤性明显增强,移植瘤的生长速度增快,3组肿瘤重量分别为（0.057 ±0.040）、（0.060±0.030）、（0.225 ±0.070） g（P ＜0.01）.过表达p55PIK组的肿瘤组织中VEGF和CD31的表达水平明显增高.结论 过表达p55PIK的肿瘤细胞成瘤性的增强可能是通过提高VEGF的表达,从而促进肿瘤血管的生成来实现的.
- 杨锐王桂华李小兰邹声泉胡俊波
- 关键词：血管内皮生长因子血管生成结肠肿瘤
- 低氧诱导因子-1α通过调控组蛋白去甲基化酶4B影响结直肠肿瘤细胞的增殖能力被引量：2
- 2019年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对结直肠肿瘤细胞增殖活性的影响及其机制.方法数据库分析组蛋白去甲基化酶4B(KDM4B)和HIF-1α表达相关性;蛋白质印迹法(Western blot)检测HIF-α、KDM4B在常氧、乏氧中的表达;在乏氧和常氧条件下低表达KDM4B,分别通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活性,碘化丙锭(PI)染色后流式细胞术检测细胞周期变化,应用SPSS 19.0统计软件分析,采用One-way ANOVA及t检验.结果数据库分析HIF-1α和KDM4B表达呈正相关,Western blot实验表明HIF-1α在乏氧模型中高表达,同时可使KDM4B高表达;在常氧(N)、乏氧(H)条件下,CCK-8结果表明siKDM4B组24h吸光度(A)值(N:0.793±0.008,H:0.529±0.021)与对照组A值(N:1.077±0.017,H:0.826±0.019)差异有统计学意义(t=3.452,P<0.05),在48、72 h实验组A值均低于对照组(P<0.05);流式细胞术结果表明,siKDM4B组S期细胞比例(N:40.64%,H:35.50%)显著低于对照组(N:56.68%,H:45.64%).结论HIF-1α能通过增强KDM4B的表达影响结直肠肿瘤细胞增殖活性.
- 郭凯旋李海杰陶德定李小兰罗学来
- 关键词：低氧诱导因子-1Α增殖活性
- 低表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X1对人结肠癌细胞增殖的影响
- 2019年
- 目的观察低表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X1(HAX1)对结肠癌细胞增殖的影响。方法利用HAX1特异性低表达小干扰RNA(siHAX1)瞬时转染结肠癌细胞SW48,通过Western blot验证低表达成功,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验观察HAX1对SW48细胞的影响,利用Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin) D1表达。结果Western blot证实在结肠癌细胞中低表达HAX1模型的成功建立,CCK-8实验结果表明,对照组(siCon)48 h结肠癌细胞吸光度(A)值(1.264±0.020)较各实验组(siHAX1)A值(1.122±0.057、1.021±0.033、0.989±0.049)差异有统计学意义(P<0.05),即实验组增殖能力降低。72 h时,对照组A值(1.332±0.019),各实验组A值(1.199±0.040、1.081±0.022、1.068±0.026),组间比较差异有统计学意义(P<0.05),说明72 h时实验组增殖能力仍降低。克隆形成实验显示,对照组(siCon)克隆形成数目[(713±40)个]明显多于各实验组克隆形成数目[(422±33)、(558±37)、(505±23)个],且差异有统计学意义(P<0.05),说明实验组克隆形成能力降低。Western blot证实在细胞低表达HAX1蛋白后,可明显降低Cyclin D1蛋白的表达。结论在结肠癌细胞中,低表达HAX1可通过抑制Cyclin D1的表达抑制肿瘤细胞增殖。
- 韩才顺李海杰吴安定周宗进罗学来来森艳
- 关键词：结肠癌细胞增殖
