广东省高校优秀青年创新人才培养计划项目(LYM11104)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：侯宁罗健东张根水宜全袁文常更多>>
- 相关机构：广州医学院兰州军区乌鲁木齐总医院更多>>
- 发文基金：广东省高校优秀青年创新人才培养计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：文化科学医药卫生更多>>
- 大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体及在乳鼠心肌细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 背景:过氧化物酶体增生因子活化受体α是调节心脏脂肪酸氧化的重要核转录因子,利用基因工程技术构建其重组腺病毒载体对研究心脏能量代谢障碍机制具有重要意义。目的:构建大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体,评价其在原代培养的乳鼠心肌细胞中的表达效率。方法:采用RT-PCR法自SD大鼠肝脏扩增过氧化物酶体增生因子活化受体α基因,将其克隆至带有增强型绿色荧光蛋白的穿梭质粒载体pAd-Track-CMV。线性化重组穿梭质粒载体并转化入含有腺病毒骨架质粒pAd-Easy-1的感受态大肠杆菌BJ5183构建重组腺病毒载体质粒。用脂质体将线性化的重组腺病毒载体质粒转染于人胚肾293细胞以包装、扩增,纯化病毒后计算滴度。用纯化的重组腺病毒转染心肌细胞,荧光显微镜观察转染效率;荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增生因子活化受体αmRNA、蛋白表达。结果与结论:成功构建携带大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为3.5×1011pfu/L。重组腺病毒转染心肌细胞的效率达90%以上,被转染细胞目的基因mRNA、蛋白表达显著增高。该载体的成功构建为研究过氧化物酶体增生因子活化受体α基因在心肌能量代谢障碍中的作用奠定基础。
- 侯宁袁文常罗承锋刘启才罗健东
- 关键词：重组腺病毒心肌细胞能量代谢
- PBL教学法在药理学教学中的实践和应用体会被引量：10
- 2012年
- PBL教学法是一种基于问题,以学生为主体的先进教学模式。近年来广州医学院药理教研室将PBL教学模式引入药理学理论教学中,实践证明PBL教学法能激发学生对药理学的学习兴趣,有助于自主学习、创新能力的培养和综合素质的提高,为深化医学教育改革、探索优秀医学教育模式奠定基础。
- 侯宁宜全张根水罗健东
- 关键词：PBL教学法药理学教学实践
