安徽省优秀青年科技基金(04043075)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：宋礼华王荣海戎隆富陈金武魏练平更多>>
- 相关机构：安徽大学安徽省生物医学研究所安徽安科生物工程(集团)股份有限公司更多>>
- 发文基金：安徽省优秀青年科技基金国家科技攻关计划安徽省“十五”重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 聚乙二醇修饰天花粉蛋白的初步研究被引量：5
- 2006年
- 目的:研究聚乙二醇(PEG)修饰天花粉蛋白(TCS)的条件、纯化方法、生物活性及致过敏反应程度。方法:用SDS-PAGE检测反应条件对产物成分的影响,利用离子交换和分子筛凝胶层析对修饰产物进行分离纯化,通过SDS-PAGE和HPLC检测聚乙二醇化天花粉蛋白(PEG-TCS)的纯度,小鼠引产实验测定PEG-TCS体内生物学活性,用TCS和PEG-TCS作为抗原对豚鼠进行致敏和攻击。结果:在PEG修饰TCS的反应中,PEG与TCS的投料(质量)比和pH值是影响修饰效率的主要因素,修饰反应一般在24～48h内达到平衡;纯化的PEG-TCS经SDS-PAGE检测纯度大于95%,HPLC显示单一峰;小鼠引产实验表明,经过PEG修饰后的TCS,引产活性加强;豚鼠过敏反应实验表明,PEG-TCS具有极低的全身性过敏反应。结论:PEG修饰TCS的最佳反应条件为:TCS与PEG投料比为1:6,pH6．0,反应时间为48h,催化剂氰基硼氢化钠浓度为40mmol·L^(-1);PEG-TCS纯度大于95%; PEG-TCS体内活性能较好的保留,且全身性过敏反应降低。
- 许培戎隆富王荣海宋礼华
- 关键词：天花粉蛋白聚乙二醇修饰全身性过敏反应
- 聚乙二醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究聚乙二醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学。方法用rhGH及其两种mPEG修饰物PGH1、PGH2免疫家兔,检测兔血清中的抗体滴度;对家兔单次背部皮下给药,定时取血清,建立rhGH及其修饰物的ELISA双抗夹心检测法,检测血清中的药物浓度,并计算药动学参数。结果经过mPEG修饰后,明显降低了rhGH的抗体滴度,缩短了抗体持续时间。在药动学研究中发现,其t1/2β从3.1h显著延长到PGH1的9.9h和PGH2的22.5h,其AUC也有很大的提高。结论mPEG修饰后可明显降低rhGH的免疫原性,延长药物在动物体内的半衰期,降低清除率,改善其药动学性质。且改善程度随mPEG相对分子质量的增大而增强。
- 陈金武王荣海戎隆富宋礼华
- 关键词：重组人生长激素聚乙二醇免疫原性ELISA药动学
- 高效液相色谱法检测PEG-rhGH注射液中rhGH残留
- 2007年
- 孙梦希王荣海戎隆富宋礼华
- 关键词：高效液相色谱法RHGH重组人生长激素注射液生长激素缺乏蛋白质合成
- ELISA法研究聚乙二醇化重组人生长激素小鼠体内的药动学被引量：2
- 2007年
- 建立了双抗夹心ELISA法检测小鼠血清中聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-GH)的浓度。结果表明,PEG-GH和重组人生长激素(rhGH)浓度均在1～150ng/ml范围内呈良好的线性关系。PEG-GH以静脉注射与皮下注射两种途径给药,所得t1/2β分别为静注rhGH的34.8倍和39.8倍,清除率明显下降。表明PEG-GH具有长效作用。
- 陈金武王荣海戎隆富宋礼华
- 关键词：药物动力学
- 聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性被引量：5
- 2005年
- 目的 研究聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性。方法 通过分子筛高效液相 (SizeexclusionHPLC)、毛细管等电聚焦 (CIEF)、圆二色谱 (CD)以及荧光光谱等方法检测单聚PEG- GH的纯度、等电点、二级结构以及分子构象 ;采用妊娠兔肝细胞放射受体分析法 (RRA)检测单聚PEG GH的体外受体亲和力 ,采用未成年去垂体大鼠体重增加法检测体内生物活性。结果 分子筛高效液相图谱上仅出现一个峰 ,表明样品纯度很高 ,等电点范围为 5 .1～ 5 .2 ,与未修饰的rhGH的等电点相一致 ;CD谱与荧光光谱均表明单个mPEG ALD的修饰对rhGH的二级结构以及分子构象没有明显影响 ;与未修饰的rhGH相比 ,单聚PEG GH体外受体亲和力明显降低 ;但体内作用时间更长 ,且更加有效。结论 此结果为进一步研究和开发长效重组人生长激素提供了理论依据。
- 魏练平王荣海戎隆富宋礼华
- 关键词：GH重组人生长激素聚乙二醇化PEC等电点分子构象
