山东省自然科学基金(Y2005C39)
- 作品数：9 被引量：37H指数：3
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- 三氧化二砷和曲古抑菌素A协同诱导HL-60细胞凋亡的作用及分子机制研究
- 2008年
- 目的探讨三氧化二砷（As2O3）和曲古抑菌素A（TSA）在体外诱导急性早幼粒白血病细胞HL-60凋亡过程中的协同作用。方法采用MTT法检测As2O3和（或）TSA对HL-60细胞增殖的影响，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达。结果As2O3和TSA联用较单独用药能明显抑制细胞，引起细胞周期阻滞和凋亡，Bax基因表达升高，Bcl-2基因表达降低，Bax／Bcl-2比值升高。结论As2O3和TSA均能够引起HL-60凋亡，二者具有协同效应，其机制是引起细胞周期阻滞，且上调Bax与Bcl-2比值。
- 杨炜华温培娥谢超乔高娟任霞任海泉唐天华姜国胜
- 关键词：HL-60细胞砷剂组蛋白脱乙酰基酶类细胞凋亡
- 条件免疫反应对小鼠支气管哮喘的作用机制研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨条件免疫反应对小鼠支气管哮喘的机制。方法选4—6周龄的雌性BALB／C小鼠，用卵清蛋白（OVA）腹膜下注射致敏，OVA雾化吸入激发，建立支气管哮喘模型，健康对照组用磷酸盐缓冲溶液进行相同操作。将模型小鼠随机分为7组，每组15只：（1）条件免疫反应1组（CIR1）组，以声音为条件刺激，布地奈德加沙丁胺醇雾化吸人为非条件刺激，两者结合7次（7d）后可建立条件免疫反应，此后每日再现条件刺激，每周条件刺激再与非条件刺激结合1次，共20周；（2）CIR：组，以糖精水为条件刺激，其余操作同CIR，组；（3）常规治疗组，给予布地奈德和沙丁胺醇雾化吸入治疗，1次／d，共20周；（4）常规治疗减量组，给予布地奈德和沙丁胺醇雾化吸入，1次／d，共7d，之后1次／周，共20周；（5）单纯声音刺激组，单纯给声音刺激20周；（6）单纯糖精水刺激组，单纯给糖精水刺激20周；（7）空白对照组，PBS雾化吸入20周。以上7组每天给予哮喘激发1次，各治疗组在治疗间隔1h以后给予激发；（8）健康对照组，用PBS激发20周。治疗20周后，分离小鼠脾脏单个核细胞，加入CD4＋磁珠，利用分选器、分离柱分选出CD4＋T淋巴细胞，经PMA、离子霉素和莫能霉素刺激培养6h后，流式细胞技术检测CD4＋T细胞胞膜上烟碱型乙酰胆碱受体胡（nAChRα7）与胞浆内IL-4、IFN-1及IL-17表达量，分析nAChRot7与IL-4、IFN-γ及IL-17的相关性。结果（1）CIR1组（8．7±1．2）、CIR2组（9．1±1．0）、常规治疗组（8．4±1．1）及健康对照组（0．8±0．7）比空白对照组（16．2±1．3）肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞占白细胞的百分数均明显减少（P〈0．01），在CIR，组、CIR2组及常规治疗组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）CIR1组、CIR2组、常规治疗组及健康对照组与空白对照组相比较，CD4
- 李化兵韩秀珍冯益真王金荣孙妍孙立峰伊迎春李志鹏
- 关键词：受体烟碱CD4阳性T淋巴细胞白细胞介素17
- 三氧化二砷与HMBA对白血病K562细胞增殖抑制作用及其分子机制的研究被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨诱导分化剂对K562细胞增殖抑制的作用与分子机制。方法:通过MTT试验和细胞形态学观察K562细胞增殖的改变和分化情况。通过流式细胞仪实验检测细胞周期改变,RT-PCR检测EVI1、TGF-β1和WT1基因表达的变化。结果:K562细胞经六亚甲基二乙酰胺(HMBA)和(或)三氧化二砷(As2O3)作用后增殖明显受到抑制,并向不同方向分化,细胞被阻滞在G1期。K562细胞的增殖抑制作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调一致。EVI1/β-actin从0.9253渐降至0.1379,WT1/β-actin从0.9953降至0.1978。TGF-β1/β-actin从0.3315增至1.2452。结论:HMBA、As2O3及其联合抑制K562细胞增殖作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调有关。
- 董伟谢超刘佳宁温培娥杨炜华任霞唐天华姜国胜
- 关键词：白血病K562细胞乙酰胺类砷剂
- 细胞间黏附分子-1基因多态性与心绞痛关系被引量：3
- 2008年
- 目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因K469E与心绞痛的关系。方法采用候选基因法及病例-对照的方法,利用巢式PCR(nested-PCR)技术,对71例心绞痛和164例对照,进行ICAM-1基因K469E多态性分析。结果病例与对照2组间年龄、性别、体质指数、是否吸烟,收缩压、舒张压、总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白等差异均无统计学意义;ICAM-1基因K469E基因型KK在心绞痛组为28例,占39.4%;KE为30例,占42.3%,EE为13例,占18.3%;K等位基因与心绞痛相关,含有KK或KE基因型的人患心绞痛危险性是EE型的2.525倍。结论ICAM-1基因K469E多态性与心绞痛发生有关,可能是冠心病(心绞痛)潜在的独立危险因素。
- 温培娥路方红周伟商青王舒健徐凤华
- 关键词：细胞间黏附分子-1基因多态性心绞痛
- 六亚甲基二乙酰胺诱导HL-60细胞分化及其分子机制的研究被引量：5
- 2008年
- 本研究探讨六亚甲基二乙酰胺(HMBA)对髓系白血病HL-60细胞分化的作用及其分子机制。应用MTT比色法观察不同浓度HMBA在不同时间点对细胞增殖的抑制作用,采用Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化,运用流式细胞仪测定细胞分化抗原CD11b的表达,并进行细胞周期分析,半定量RT-PCR分析c-myc、mad1、p21、p27、hTERT、HDAC1基因mRNA的表达。结果表明:HL-60细胞经不同浓度(0.5、1、2mmol/L)HMBA处理后细胞增殖受到较明显的抑制,并随时间延长、剂量增大抑制作用明显增强。HL-60细胞经2mmol/L HMBA处理后,细胞形态学上趋于分化成熟,细胞停滞于G0/G1期;CD11b表达显著增高;c-myc、hTERT mRNA表达显著下调,mad1、p21、p27mRNA表达显著上调,而HDAC1mRNA表达无明显变化。结论:HMBA能诱导HL-60细胞分化,其分子机制可能是通过调节c-myc/mad1开关引起p21、p27上调,并且下调hTERT mRNA表达,与HDAC1活性抑制无关。
- 任霞温培娥杨炜华唐天华任海全张之勇赵海涛范华乔高娟姜国胜
- 关键词：六亚甲基二乙酰胺HL-60细胞细胞周期细胞增殖细胞分化
- 布地奈德对慢性支气管哮喘小鼠肺组织HIF-1α和VEGF表达及气道重塑的影响被引量：17
- 2012年
- 目的研究布地奈德对慢性哮喘小鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控和对血管生成、气道重塑的影响。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。卵清蛋白(OVA)激发试验建立哮喘小鼠模型,治疗组从第28天开始每日在OVA激发前1 h雾化吸入布地奈德100μg/kg,对照组以PBS代替OVA。苏木精-伊红染色分析气管管壁厚度变化,Masson染色分析肺组织胶原沉积,免疫组织化学染色法检测肺组织血管生成情况,免疫组织化学染色法和Western blot检测HIF-1α、VEGF表达水平。分析气管管壁厚度、血管面积百分比与VEGF、HIF-1α表达的相关性。结果模型组较对照组气道管壁增厚,肺组织胶原沉积、血管面积、HIF-1α和VEGF表达显著增加;治疗组较模型组气道管壁厚度、肺组织胶原沉积及血管面积减少,HIF-1α和VEGF表达显著下降。气道管壁厚度、血管面积分别与HIF-1α及VEGF表达呈正相关,HIF-1α与VEGF表达亦呈正相关。结论布地奈德通过抑制HIF-1α、VEGF表达,明显减轻哮喘小鼠肺组织血管生成和气道重塑。
- 孙妍王金荣韩秀珍李化兵孙立锋陈星冯益真
- 关键词：哮喘布地奈德缺氧诱导因子-1Α气道重塑小鼠
- 迷走神经电刺激对实验性关节炎大鼠T细胞活化的调节机制被引量：1
- 2007年
- 目的探讨迷走神经刺激对实验性关节炎(EA)大鼠T细胞活化的调节作用及其机制。方法建立大鼠EA模型,将模型大鼠分为迷走神经刺激(VNS)组和假手术组。VNS组在完全清醒状态下予迷走神经电刺激,刺激参数:波宽1.0ms、电流强度3.0mA、频率16Hz、串长10s、串隔1.5min,每日30min,共4周。用流式细胞及免疫荧光技术检测大鼠外周血CD4+ T淋巴细胞活化(表达CD71)及表达烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的状态。结果治疗1周后VNS组大鼠外周血CD4+T细胞表达nAChRα7、ChAT明显高于假手术组(Pa<0.01);2周后VNS组大鼠外周血活化的CD4+ T淋巴细胞明显低于假手术组(P<0.01);治疗3周后VNS组大鼠关节炎指数明显低于假手术组(P<0.01)。结论电刺激迷走神经可以上调nAChRα7在CD4+ T淋巴细胞中的表达,激活免疫系统的固有胆碱能系统,通过抑制免疫细胞异常活化,减少炎性细胞因子合成及分泌,减轻关节炎症,从而实现对EA的治疗作用。
- 王金荣李秀云王宏伟范慧韩秀珍刘志刚孙妍李化兵
- 关键词：迷走神经电刺激实验性关节炎
- 原发性高血压患者细胞间黏附分子K469E基因多态性与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨ICAM-1基因K496E多态性与动脉粥样硬化(AS)的关系。方法对437名原发性高血压(EH)患者进行颈动脉超声检测,根据检测结果将所有患者分为AS组和动脉正常组(正常组),采用巢式聚合酶链反应和免疫酶联吸附测定技术检测所有患者的细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因K496E基因型和等位基因分布及ICAM-1血浆水平,进行对比分析。结果AS组KK型频率明显高于正常组(χ2=12.437,P=0.000),基因型相对风险度分析发现,KK基因型的个体发生AS的危险性是KE或EE型的2.087倍(OR=2.087,95%CI=1.382～3.151);携带K等位基因发生AS的风险是E等位基因的1.962倍。经二元多因素Logistic回归分析,调整年龄、性别、体重指数、收缩压、舒张压、总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白等指标后,ICAM-1血浆水平、K等位基因和吸烟均不同程度的影响AS的发病,而且K等位基因及吸烟对于AS发病具有一定的协同作用。结论ICAM-1基因K469E多态性与EH患者的AS有相关性,K等位基因可能是AS的遗传危险因素。
- 温培娥路方红刘振东商青王舒健赵颖馨孙尚文金世宽
- 关键词：细胞间黏附分子1基因多态性
- 烟碱样乙酰胆碱受体α7在支气管哮喘患儿外周血CD4＋T淋巴细胞中的表达被引量：3
- 2008年
- 目的分析支气管哮喘（简称哮喘）患儿外周血CD4＋T淋巴细胞表达烟碱样乙酰胆碱受体α7（nAChRa7）与相应的血清白细胞介素（IL）-4、干扰素（IFN）-γ水平的相关性，探讨nAChRa7表达与Th1／Th2平衡的关系及其在哮喘发病过程中的意义。方法选取2006年3月至2007年3月山东省立医院儿科门诊哮喘急性发作患儿30例为哮喘组，其中男16例，女14例，年龄3—9岁，平均（5±3）岁；儿科门诊查体健康儿童20名为健康对照组。取空腹静脉血，分离外周血淋巴细胞，并收取血清。用流式细胞仪检测淋巴细胞CD3、CD4和nAChRa7的表达。用ELISA法检测血清中IL4、IFN-γ的水平。结果哮喘组患儿外周血CD4＋T淋巴细胞表达nAChRa7为（8．2±4．7）％，明显高于健康对照组的（5．9±1．9）％，差异有统计学意义（t=2．53，P〈0．05）。哮喘组血清中IL4水平为（11．6±5．5）ng／L，高于健康对照组的（5．8±3．0）ng／L，差异有统计学意义（t=5．42，P〈0．01）；哮喘组IFN—γ水平为（5．7±2．6）ng／L，低于健康对照组的（11．7±7．8）ng／L，差异有统计学意义（t=4．11，P〈0．01）。外周血CD4＋T淋巴细胞表达nAChRa7与血清IL-4水平呈正相关（r=0．688，P〈0．01），CD4＋T淋巴细胞表达nAChRa7与血清IFN-γ水平呈负相关（r=-0．476，P〈0．01）。结论nAChRa7可能通过调节Th1／Th2细胞活性，使血清IL4水平升高、IFN-γ水平降低，参与哮喘气道炎症过程。
- 陈鲁媛刘志刚李玉红冯益真王金荣
- 关键词：哮喘烟碱白细胞介素4
