国家自然科学基金(30170552)
- 作品数：25 被引量：220H指数：9
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- 相关机构：首都师范大学中国农业大学安捷伦科技有限公司更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 缺铁诱导的水稻根转录本组和蛋白质组分析与膜泡运输被引量：18
- 2004年
- 为了解水稻受缺铁胁迫后根细胞整体水平mRNA和蛋白质的变化规律,对缺铁和加铁的水稻根分别进行了转录本组的做点阵分析和翻译水平的蛋白质组双向电泳与基质辅助的激光解析时间飞行质谱(MALDI-TOF)分析.在10531个点的水稻cDNA芯片图谱上,比较缺铁与加铁之间的相对表达水平(REL),发现了451个差异cDNA点,其中在2.0～9.175之间的缺铁诱导上调基因为203个,在0.075～0.49之间缺铁诱导的下调基因为248个.在水稻根可溶性蛋白双向电泳(IEF-SDS-PAGE)结果中,得到多达约1500个点的蛋白质图谱.比较缺铁与EDTA螯合二价铁培养的水稻根可溶性蛋白质图谱,发现了23个差异蛋白质,其中缺铁诱导加强的有4个,减弱的有2个,特异的有7个.从缺铁处理的聚丙烯酰胺凝胶上选取差异蛋白质,用胰蛋白酶进行水解.继而进行了MALDI-TOF检测,获得9个蛋白质的肽质量指纹谱的检索数据和分析结果.最后对缺铁诱导的膜泡运输和能量代谢相关的基因做了详尽的分析.
- 印莉萍孙彤李伟黄勤妮刘祥林
- 关键词：水稻缺铁胁迫膜泡运输
- 抑制性消减杂交分离苹果缺铁诱导的相关基因被引量：11
- 2007年
- 以铁高效基因型植物——苹果属小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为材料,利用抑制性消减杂交(SSH)方法,成功构建了小金海棠缺铁条件下的消减cDNA文库。该文库包含1 152个克隆,通过PCR检测插入片段大小在300 ～1 000 bp之间。对构建的消减cDNA文库进行差异筛选,得到差异表达片段(ESTs) 105个。GenBank上BLAST结果如下: 50个ESTs与其它物种同源性较高,视为已知基因,并根据其功能分为9个组; 32个ESTs在GenBank中无法查到对应的同源序列,可能代表了新基因;另外23个是与已知ESTs重复的基因片段。
- 张玉刚许雪峰李天忠王忆孔瑾韩振海
- 关键词：苹果小金海棠抑制性消减杂交CDNA文库
- 与植物铁素营养相关的蛋白和基因被引量：19
- 2003年
- 介绍铁胁迫下植物铁素吸收的机制Ⅰ、机制Ⅱ系统中铁素吸收、转运的主要相关蛋白及基因 (如Fro2、Irt1、Naat、Nas、Fdh、Adh) ,可能存在的新机制Ⅲ系统中的Nramp基因 ,铁素储存蛋白 (ferritin)及其基因等的研究进展。
- 戚金亮王忆印莉萍韩振海
- 关键词：植物铁素营养蛋白基因
- 常规PCR与RACE结合法快速从cDNA文库中克隆基因被引量：9
- 2004年
- 首先根据Fe(Ⅱ ) 转运蛋白基因家族的保守区设计同源的常规PCR引物 (F1,R1) ,扩增出 4 90bp的特异片段 .然后根据RACE法原理 ,巧妙地设计 3′RACE(F2 )和 5′RACE(R3)特异性引物 ,使两者既能分别与文库载体上的筛选扩增引物配对扩增cDNA 3′和 5′末端序列 ,又能使扩增出的 3′RACE和 5′RACE产物序列有重叠部分 ;另外设计引物时还兼顾到使F2和R3也能配对 ,从而能对 3′RACE和 5′RACE扩增产物进行双特异性引物常规PCR鉴定 .该方案不但能够直接根据序列鉴定 3′RACE和 5′RACE产物是否为同一基因序列 ,还能快捷地用常规PCR鉴定 3′RACE和5′RACE扩增产物是否为特异性扩增 ,避免了对非特异性扩增产物的克隆测序等繁琐的鉴定过程 ,优化了基因克隆策略 .最后根据拼读出的全长序列设计引物 (F4 ,R4 )扩增出完整编码区 .应用该方法成功地从小金海棠缺铁处理的根系cDNA文库中克隆了Fe(Ⅱ ) 转运蛋白基因的cDNA .
- 戚金亮马小娟王丽印莉萍韩振海
- 关键词：RACECDNA克隆
- Application of Non-invasive Microsensing System to Simultaneously Measure Both H^＋ and O2 Fluxes Around the Pollen Tube被引量：21
- 2006年
- 在细胞外的环境的各种各样的离子、分子的活动是重要的种房间生理的过程。一个 noninvasive microsensing 系统(NMS ) 基于也扫描离子选择的电极技术(SIET ) 或扫描 polarographic 电极技术(SPET ) 能在正常生理的条件下面在未经触动的样品关于各种各样的离子 / 分子的交通获得信息。二探查的同时的测试系统(2STS ) 是由 SIET， SPET，和一个 Xu-Kunkel 采样协议组成的一个综合系统。在现在的学习， 2STS 能同时测量 H+ 的流动和百合的 O2 (Lilium longiflorum Thunb。cv。王牌) 花粉试管当避免在二根探针之间的干扰时。而氧流动是，结果显示质子流动是流出流入，和他们密切被相关到包围组成的碱的乐队区域的对方。明确地，当质子流出增加了时，氧流入也增加了。因此，在 Hepler 的组建议的花粉试管的 alkalized 区域存在的压缩活跃线粒体的假设被支持。
- Yue XuTong SunLi-Ping Yin
- 关键词：花粉管
- 小金海棠抗缺铁相关基因——Nramp基因片段的克隆被引量：9
- 2004年
- 以高效抗缺铁苹果种小金海棠 (MalusxiaojinensisChengetJiang)为试材 ,以异源的小麦Nramp基因为探针进行杂交分析。Southern杂交结果表明 :小金海棠基因组中存在该家族基因。Northern杂交结果表明 :在根和叶中 ,Nramp基因在正常供铁和缺铁胁迫下均能得以转录 ,且叶中的转录受缺铁胁迫的诱导而加强。通过PCR方法已从基因组DNA中扩增出了 75 2bp的特异性产物 ,该片段与水稻的Os Nramp3具有
- 戚金亮韩振海印莉萍许雪峰张连忠
- 关键词：小金海棠NRAMP杂交
- 水稻缺铁胁迫条件下根部形态及电镜观察被引量：2
- 2008年
- 为研究缺铁胁迫条件下植物的适应机制,首次使用植物凝胶培养方法对不同条件下的水稻根进行形态学观察,结果发现苗期水稻缺铁诱导的根毛和侧根明显增多,幼根周围有分泌物出现.进一步利用电镜制样技术和超薄切片技术在透射电子显微镜下观察两种处理的水稻根尖细胞中膜泡的分布和形态.发现缺铁培养的水稻根尖细胞中膜泡的个数较多,而且较明显.为水稻在适应缺铁胁迫下根部细胞内膜泡运输增强提供了证据.
- 常正尧王健美齐冰韩建辉印莉萍
- 关键词：铁胁迫膜泡水稻根透射电子显微镜
- 小金海棠中抗缺铁相关基因的杂交分析被引量：7
- 2003年
- 以高效抗缺铁胁迫基因型苹果种小金海棠 (MalusxiaojinensisChengetJiang)为试材 ,以异源的玉米Fe(II) 转运蛋白基因 (irt)和小麦Nramp基因为探针进行了杂交分析。Southern杂交结果表明 ,小金海棠基因组中该两家族基因均存在。Northern杂交结果表明 ,在根中 ,irt的转录受缺铁胁迫诱导 ,并随缺铁胁迫处理天数的增加而加强 ;在根和叶中 。
- 戚金亮卫功宏黄勤妮印莉萍韩振海
- 关键词：小金海棠转录表达
- 非损伤性扫描离子选择电极技术及其在高等植物研究中的应用被引量：19
- 2006年
- 各种分子和离子进出细胞的过程对于维持植物体自身的活性至关重要．非损伤性扫描离子选择电极技术(scanning ion-selective electrode technique,SIET)在不接触被测生物样品,即在保持被测生物样品完整和近乎实际生理环境的状态下,获得进出样品的各种分子和离子的信息．该技术不仅能够测量离子及分子静止状态下的绝对浓度,而且还可以测量它们进出生物样品的运动速率及运动方向．SIET可以围绕被测的单个或多个细胞、组织甚至器官进行灵活、方便而准确的立体测量并获得被测物体周围的离子或分子的三维立体数据．目前,SIET不但可以分别测量 H+,ca2+,K+,Al3+,Cd2+,Cl-和O2,CO2,NO及温度等参数,而且可以同时采集多种离子及参数,为获得生物样品内外分子或离子运动的有关信息提供了良好的实验平台．
- 印莉萍上官宇许越
- 关键词：离子选择性电极
- 酵母和植物的锌转运系统及其调控被引量：9
- 2007年
- 锌是所有生物体必需的微量元素之一,是多种蛋白的辅酶并参与催化生物体内的一些重要生化反应。生物体为了维持细胞内适当的锌浓度以保证其正常功能而进化出了复杂的锌转运及调控系统。本文主要论述酵母和植物中的锌转运系统及其调控,以及锌吸收的分子标记和QTL位点分析。
- 王祥李鹏印莉萍
- 关键词：转运体锌
