国家自然科学基金(81241041)
- 作品数：21 被引量：33H指数：4
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- 神经病理性疼痛引起成年大鼠空间记忆损害和内侧前额叶的NMDA受体NR2B亚基下调表达被引量：4
- 2015年
- 目的：探讨神经病理性疼痛（neuropathic pain,NP）引起的成年大鼠的空间记忆障碍与内侧前额叶（medial prefrontal cortex,mPFC） NMDA受体NR2B亚基表达的关系.方法：选择健康的Wiser雄性大鼠50只,随机分为5组（每组10只）,分别为假手术组（sham operated group,SO组）,神经病理性疼痛模型组（neuropathic pain group,NP组）,生理盐水组（NS组）,Ro25-6981组（Ro组）和CX546组（CX组）.其中,NS组、Ro组和CX组是在NP模型基础上分别在mPFC区注射生理盐水、Ro25-6981和CX546.采用单侧坐骨神经主干慢性压迫法（chronic constriction injury,CCI）制备NP模型.SO组和NP组分别于术后第7d、14d、21 d和28 d测量机械缩足阈（mechanical withdrawalthreshold,MWT）和热缩足潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）.术后第21-28 d,进行八臂迷宫实验.术后第24 d,利用立体脑定位仪将生理盐水、Ro25-6981或CX546分别注射到mPFC,制备成NS组、Ro组或CX组动物模型.迷宫实验完成后立即处死大鼠,通过RT-PCR、免疫荧光和Western Blotting方法测定内侧前额叶的NR2B亚基mRNA和蛋白表达水平.结果：与SO组比较,NP组的MWT和TWL降低（P＜0.05）.与SO组比较,NP组的空间记忆功能明显减退（P＜0.05）.与NS组比较,Ro组的空间记忆功能明显减退（P＜0.05）,CX组的空间记忆功能明显改善（P＜ 0.01）.与SO组比较,NP组与NS组的NR2B亚基mRNA和蛋白表达均明显降低（P＜0.05）.与NS组比较,Ro组的mRNA和蛋白表达明显降低（P＜0.05）,而CX组的mRNA和蛋白表达明显升高（P＜0.01）.结论：NP所致空间记忆障碍可能与mPFC区的NR2B亚基下调表达有关.
- 刘树珍于剑锋
- 关键词：神经病理性疼痛
- 右美托咪定对喹啉酸引发的成年大鼠空间记忆损害的影响作用
- 2015年
- 目的探讨右美托咪定对喹啉酸引发的成年大鼠空间记忆损害的影响作用及其可能机制。方法选择健康成年Wistar雄性大鼠30只,随机数字法分为生理盐水组(NS组)、喹啉酸组(QA组)、右美托咪定+喹啉酸组(D+Q组)。八臂迷宫实验、旷场实验方法测定各组大鼠的空间记忆能力、探究行为的变化。实验完成后立即处死大鼠,提取海马组织,应用Western Blotting法测定海马内胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)蛋白的表达水平。结果与NS组比较,QA组、D+Q组的空间记忆功能明显减退,自发性活动减少,ChAT蛋白表达明显下降(P<0.05)。与QA组比较,D+Q组的空间记忆功能有所改善(P<0.05)。但自发性活动无明显改变(P>0.05),ChAT表达有所增加(P<0.05)。结论 QA所致空间记忆障碍可能与海马内ChAT表达下调有关系,右美托咪定可部分逆转ChAT表达下调。
- 耿霞于剑锋王钢
- 神经病理性疼痛引起大鼠空间记忆障碍和内侧前额叶PSD95以及CaMK Ⅱ-Thr^(305)的表达升高被引量：4
- 2015年
- 目的:研究神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)对大鼠空间学习记忆功能和内侧前额叶(medical prefrontal cortex,m PFC)钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(alpha calcium/calmodulindependent protein kinaseⅡ,Ca MKⅡ)磷酸化水平以及突触后密度蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)表达的影响。方法:选择经过八臂迷宫训练的雄性健康Wistar大鼠32只,将大鼠随机分为4组,神经病理性疼痛模型组(NP group,NP组,n=8),NP模型m PFC注射生理盐水组(NS组,n=8),NP模型m PFC注射Ca MKⅡ抑制剂KN-93组(KN-93组,n=8)和假手术组(sham operated group,SO组,n=8)。采用坐骨神经慢性压迫损伤制备大鼠NP模型。各组大鼠分别于术后第7、14、21、28和35天测机械缩足阈(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),第29~35天再次进行八臂迷宫实验以检测大鼠的空间学习和记忆功能。术后第33天采用立体脑穿刺进行药物干预试验,建立NP模型m PFC注射生理盐水组(NS组)和NP模型m PFC注射Ca MKⅡ抑制剂KN-93组(KN-93组)两组实验模型,第35天进行八臂迷宫检测大鼠的空间学习和记忆功能,检测后立即处死大鼠,通过Western Blotting、RT-PCR和免疫荧光方法测定m PFC部位Ca MKⅡ磷酸化位点Thr305磷酸化水平和突触小体内PSD95表达水平。结果:与SO组相比,NP组、NS组和KN-93组的术后痛阈明显降低(P<0.05)。与SO组相比,NP组空间学习和记忆功能减退,PSD95表达升高,Ca MKⅡ-Thr305水平升高(P<0.05)。与NS组比较,KN-93组空间学习和记忆功能改善,PSD95表达降低,Ca MKⅡ-Thr305水平降低(P<0.05)。结论:NP能引起大鼠空间学习和记忆能力减退并使m PFC脑区的PSD95表达水平和Ca MKⅡ磷酸化水平升高。
- 阚红军于剑锋
- 关键词：神经病理性疼痛KN-93
- 曲马多抑制大鼠神经病理性痛和脊髓背角NR2B表达
- 2013年
- 目的:研究曲马多对神经病理性痛(neuropathic pain,NP)大鼠的镇痛作用及对脊髓背角N-甲基-D-天门冬氨酸(N-Methyl-D-Aspartate,NMDA)受体NR2B亚基表达的影响。方法:雄性wistar大鼠,随机分为3组(每组10只):假手术组(Sham operation,SO组)、NP模型组(NP组)、曲马多处理组(Tramadol组,T组)。NP模型采用慢性坐骨神经压迫损伤的方法制作。各组大鼠分别于术前和术后3、7、10、14 d测术侧后爪机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)。T组于术后3 d开始腹腔注射曲马多注射液(20 mg/kg),术后14 d取大鼠脊髓背角用免疫荧光法与RT-PCR方法检测NR2B蛋白和mRNA表达水平。结果:与SO组比较,NP组术后痛阈明显降低,NR2B表达水平明显升高(P<0.05)。与NP组比较,T组术后痛阈升高,NR2B表达水平明显降低(P<0.05)。T组和SO组比较,痛阈和NR2B表达水平差异无统计学意义。结论:曲马多可反转NP模型脊髓背角的NR2B表达上调并具有镇痛作用。
- 郑晓南于剑锋唐可欣崔东红
- 关键词：曲马多神经病理性痛脊髓背角NR2B
- 慢性压迫背根神经节对成年雄性大鼠脊髓背角P2X3受体表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察神经病理性疼痛下脊髓背角内P2X3受体的表达情况。方法将成年雄性大鼠随机分为3组(每组n=6),分别为空白组、假手术组、慢性压迫背根神经节(CCD)组。通过压迫L4和L5背根神经节建立大鼠神经病理性疼痛模型。术后第7天分别测定各组大鼠的机械痛阈值,并用RT-PCR和蛋白印迹的方法测定大鼠患侧脊髓背角中P2X3基因mRNA和蛋白的表达水平。结果 CCD组大鼠表现出机械性痛觉过敏增强和疼痛阈值降低,同时CCD组大鼠术侧脊髓背角mRNA和蛋白的表达明显高于假手术组(P<0.01)。假手术组和空白组比较差异无显著性。结论 CCD诱导大鼠患侧脊髓背角P2X3受体的表达增高。
- 付鹏张岩刘淑珍于剑锋
- 关键词：P2X3受体脊髓背角神经病理性疼痛背根神经节
- 神经病理性疼痛对大鼠空间识别记忆功能和海马区HDAC2表达的影响
- 2014年
- 目的研究神经病理性疼痛(NP)对大鼠空间识别记忆功能与海马区组蛋白去乙酰化酶2(HADC2)表达的影响。方法将30只健康的Wistar雄性大鼠随机分为3组(每组10只),分别为对照组(CON组)、假手术组(SO组)、NP模型组(NP组)。NP模型采用右侧坐骨神经慢性压迫(CCI)的方法制备。各组大鼠分别于术后3d,7d,10d和14d测右侧后爪机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。术后第14天,进行八臂迷宫实验观测NP对大鼠的空间识别记忆功能的影响。八臂迷宫实验完成后立即处死大鼠,通过Western Blotting方法测定海马区HADC2蛋白表达水平。结果与CON组比较,SO组和NP组的术后痛阈明显降低,空间识别记忆功能减退,HDAC2表达明显升高(P<0.05)。与SO组比较,NP组的术后痛阈降低,空间识别记忆功能减退,HADC2表达明显升高(P<0.05)。结论 NP可导致大鼠空间识别功能减退,同时海马区HDAC2表达升高。
- 尹玉洁于剑锋阚红军刘树珍耿霞
- 关键词：神经病理性疼痛
- 阿米替林对SNI模型大鼠抑郁样行为及杏仁体外侧核5-HT2CRmRNA表达的影响
- 2018年
- 目的研究阿米替林(AMI)对神经病理性疼痛(NP)大鼠产生的抑郁样行为以及杏仁体外侧核(BLA)5羟色胺2C受体(5-HT2CR)mRNA表达水平的影响。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分到3个组,分别为假手术组(S0组)、神经病理性疼痛组(NP组)和阿米替林组(AMI组),每组8只。采用坐骨神经分支保留性损伤(SNI)的方法制备神经病理性疼痛模型,AMI组大鼠在术后第14~35天每天腹腔注射阿米替林(10mg/kg)。术后第3,7,14,21,28,35天测各组大鼠右后足机械痛阈,计算50%缩足阈值(50%PWT)。术后第36天强迫游泳实验评价大鼠抑郁样行为,随后处死大鼠,用反转录PCR(RT-PCR)方法检测大鼠BLA脑区5-HT2CR mRNA的表达水平。结果与SO组比较,NP组50%PWT降低,强迫游泳静止时间延长,5-HT2CR mRNA的表达水平升高;与NP组比较,AMI组50%PWT升高,强迫游泳静止时间缩短,5-HT2CR mRNA的表达水平降低。结论阿米替林可改善神经病理性疼痛及其引起的抑郁样行为并降低BLA脑区的5-HT2CR mRNA的表达水平。
- 陈静于剑锋杨舟静任鹏程高文洁董沛娜赵恒宇
- 关键词：阿米替林抑郁
- CaMK Ⅱ活性对H_2O_2所致SK-N-SH细胞氧化应激损伤的影响
- 2017年
- 目的:评价钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活性对过氧化氢所致人源性神经母细胞瘤细胞氧化应激损伤的影响。方法:SK-N-SH细胞生长至对数期时,接种于96孔培养板或6孔培养板,采用随机数字表法,将其分为4组:正常对照组,培养基中添加H_2O_2组(H_2O_2组),培养基中只添加CaMKⅡ活性抑制剂KN93组(KN93组),培养基中同时添加H_2O_2和KN93组(H_2O_2+KN93组),倒置显微镜观察细胞形态学,采用CCK-8法测定细胞活力,采用Fura-2/AM荧光法检测细胞内Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i),采用免疫印迹测定CaMKⅡ和磷酸化CaMKⅡ的表达,采用RT-PCR法检测CaMK mRNA表达。结果:与正常对照组比较,H202组细胞体呈圆形的细胞和脱落细胞增加,细胞突起长度缩短,细胞存活率降低,[Ca^(2+)]_i升高,磷酸化CaMKⅡ表达上调,CaMKⅡmRNA表达下调。与H_2O_2组比较,H_2O_2+KN93组脱落细胞明显减少,突起变长,细胞存活率增加,[Ca^(2+)]_i降低,磷酸化CaMKⅡ表达下调,CaMKⅡmRNA表达水平上调。结论:CaMKⅡ增强了H_2O_2诱导的人源性神经母细胞瘤细胞氧化应激损伤。
- 于剑锋耿霞王钢陈静陈静高文洁
- 关键词：过氧化氢氧化应激神经母细胞瘤
- 阿米替林对CCD诱发疼痛模型大鼠海马NMDA受体NR2B亚基表达和空间记忆的影响
- 2017年
- 目的探讨阿米替林(AMI)对神经病理性疼痛大鼠认知和海马N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚基表达的影响。方法将32只体重250~300g雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=8):假手术腹腔注射生理盐水组(SO+NS组),假手术腹腔注射AMI组(SO+AMI组),背根神经节压迫(CCD)模型腹腔注射生理盐水组(CCD+NS组),CCD模型腹腔注射AMI组(CCD+AMI组)。采用CCD的方法制备神经病理性疼痛模型。CCD后5d开始腹腔每天注射AMI 10mg/kg或同体积生理盐水。各组大鼠分别于术后3,7,14,21,28d测右侧后爪机械缩足阈值。术后第28~32天,八臂迷宫检测大鼠的认知功能,检测后立即处死大鼠以蛋白印迹和反转录PCR方法检测大鼠对侧海马NR2B mRNA和蛋白表达水平。结果与SO+NS比较,CCD+NS组痛阈降低,出现空间记忆降低,对侧海马NR2B mRNA和NR2B蛋白表达明显减少。与CCD+NS组比较,CCD+AMI组空间记忆明显改善,NR2B mRNA和蛋白的表达明显增加。结论 AMI可部分反转神经病理性疼痛导致的空间记忆功能障碍并使海马的NR2B表达上调。
- 杨舟静于剑锋陈静高文洁王孟岩王钢
- 关键词：阿米替林神经病理性疼痛空间记忆海马NR2B亚基
- 氯胺酮、利多卡因对分化的PC12细胞内游离钙浓度的影响
- 2021年
- 目的探讨不同浓度的氯胺酮、利多卡因对PC12细胞内游离钙的影响及其作用机制。方法将经NGF诱导分化的神经元样PC12细胞接种于24孔板内,培养8~12h后,细胞随机分为氯胺酮处理组(K组):分别为10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)倍比稀释的氯胺酮;利多卡因处理组(L组):分别为10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)倍比稀释的利多卡因。用Fura 2-AM染料作为Ca^(2+)指示剂,37℃下共孵育40min,人工脑脊液洗涤后,选定多个细胞分别观察加入染料后340/380nm激发荧光强度比值的变化,代表细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的变化。结果10^(-2)~10^(-6)倍比稀释的氯胺酮或10^(-2)~10^(-8)倍比稀释的利多卡因使分化的PC12细胞340/380nm激发荧光强度比值明显下降。结论一定浓度的氯胺酮或利多卡因明显降低分化的PC12细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i),可能分别与NMDA受体和钠通道被抑制有关。
- 张倬宁刘莉莉周晓平杨百川孙昕培韩雨佳冷恒芳张云于剑锋
- 关键词：氯胺酮利多卡因PC12细胞钙离子浓度
