国家高技术研究发展计划(2009AA043801)
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 相关作者：贺健康李涤尘刘亚雄靳忠民周新民更多>>
- 相关机构：西安交通大学第四军医大学中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 筛选适宜于构建工程化肝组织的凝胶材料支架被引量：1
- 2012年
- 目的使用不同可注射性凝胶支架体外进行新生大鼠肝细胞立体培养,为后期体内植入筛选相容性较好的支架材料。方法使用胰酶冷消化法分离新生大鼠肝细胞。将肝细胞分别与纤维蛋白胶、壳聚糖凝胶、鼠尾胶原、透明质酸钠支架材料复合,形成工程化肝组织凝胶,接种于培养板中,并通过定期光镜来观察大鼠肝细胞,四唑盐(MTT)比色法评价细胞活性。溴甲酚绿法测上清白蛋白含量,脲酶比色法测定上清尿素含量。结果四组均可形成三维生长的工程化类肝样组织。培养第4天,生物蛋白胶及壳聚糖组的培养上清液中尿素含量达到高峰,分别为培养第1天的1.31倍和1.28倍,随后含量缓慢下降。培养第7天,新生大鼠肝细胞在纤维蛋白凝胶及壳聚糖凝胶中密集生长,同时MTT显示细胞活性及白蛋白分泌达到高峰,OD值分别为培养初期的1.11倍和1.17倍,上清白蛋白含量分别是初期的1.13倍和1.15倍。而在透明质酸钠及鼠尾胶原凝胶中则细胞生长缓慢,白蛋白及尿素含量持续下降。结论 4种可注射性支架中,壳聚糖和生物蛋白胶对于新生大鼠肝细胞生物相容性较好,透明质酸和鼠尾胶原较差,前两者更适合用于工程化肝组织的构建。
- 周海洋刘巨超孙慧伟赵云山丁毅徐迎新
- 关键词：纤维蛋白凝胶
- 面向重要实质器官的生物制造技术被引量：5
- 2012年
- 在体外制造可修复人体受损组织与器官功能的活性替代物一直是人类的梦想。制造、材料与生命科学的交叉与融合发展,为生物组织与器官的体外制造提供了必要的技术、材料与生物学基础,从而实现了皮肤、骨、膀胱等简单活性组织的临床应用,但人体重要实质器官如肝脏、肺等的再造研究至今未取得突破性进展。重要实质器官内部复杂的微观结构系统及多细胞体系的构建是实现其体外制造的关键,也是当前生物组织与器官制造技术所面临的巨大挑战。从生物制造的角度,综述国内外在重要实质器官复杂微结构制造领域的主要技术方法及最新研究进展,通过分析与评价,对未来重要实质器官的生物制造技术发展进行展望。
- 贺健康刘亚雄连芩王玲靳忠民李涤尘
- 关键词：生物制造
- 卷裹型丝素蛋白/明胶肝组织工程支架制造
- 目的 :基于快速成型技术,利用丝素蛋白/明胶作为支架材料制备可降解的三维多孔肝组织工程支架。方法 :将制备的丝素蛋白和明胶溶液混合得到支架材料,将其灌注到基于快速成型技术制备的支架模具中,并冷冻干燥处理。经过卷裹后,得到...
- 毛茅刘亚雄李涤尘赵倩郝星尹芳杨照靳忠民连芩
- 关键词：冷冻干燥组织工程支架
- 文献传递
- 植入式人工肝组织制造技术
- 2011年
- 中国是肝病高发国家，许多重症肝病患者急需大量人工肝脏移植。通过体外构建可植入的人工肝组织是解决肝移植供体匮乏的根本途径。本课题通过压印成形技术和细胞打印组装技术在体外构建可植入的人工肝组织，即由具有一定空间结构的支架材料复合经过培养扩增的肝细胞及其它细胞。主要研究内容包括：针对肝组织的复杂结构制造问题，以材料／结构／功能仿生为目标，研究植入式肝组织的仿生制造方法与相关设备，
- 关键词：肝组织植入式体外构建空间结构
- 蚕丝蛋白/明胶多孔肝组织支架的制备及性能研究被引量：2
- 2011年
- 采用冷冻干燥法制备了蚕丝蛋白/明胶多孔支架,并分别在-20℃和-70℃预冻,以观察支架的微孔结构,测量支架的孔隙率、溶胀吸水性及力学性能,研究HepG2细胞在支架中的生长增殖情况.结果表明:随预冻温度降低,支架的孔径减小且微孔分布更加均匀,孔隙率及力学性能均得到提高.细胞培养结果显示:随预冻温度降低,支架的细胞贴壁率减小,-20℃预冻支架中的细胞数量稳步增加,而-70℃预冻支架中的细胞在培养前期生长良好,在培养后期增殖受到限制.此项研究证明,采用冷冻干燥法可以成功制备蚕丝蛋白/明胶多孔支架,通过改变预冻温度可以控制支架的孔隙结构及性能.
- 郝星贺健康高琨李涤尘刘亚雄
- 关键词：冷冻干燥法肝组织工程
- 脾蒂血管束法构建工程化肝组织被引量：1
- 2012年
- 目的通过在脾蒂血管束内注射工程化肝组织凝胶，探讨一种体内植入较大尺度组织工程化肝脏的新方法。方法2×10^7新生大鼠肝细胞与1ml生物蛋白胶混合构建工程化肝组织凝胶。切除sD大鼠的脾脏，并远端结扎、近端套圈后形成血管束。将凝胶注入血管束内，形成体积≥1cm。的球形组织；同法构建肝组织凝胶植入大腿皮下作为对照。术后2周行大体观察，组织切片苏木素．伊红（HE）染色。结果皮下组残留组织块较小，直径（1．63±0．55）mm，其内血管组织少。实验组形成了较大的组织块，直径（7．33±2．40）mm，内有大量血管形成。结论在脾蒂血管束内构建工程化肝组织可以形成血管化的较大尺度类肝组织。
- 周海洋刘巨超孙慧伟丁毅赵云山徐迎新
- 关键词：血管化
- 共培养的大块组织工程肝构建及体内植入研究被引量：3
- 2014年
- 目的选择大鼠成纤维细胞和原代肝细胞共培养于胶原水凝胶支架中,进行多细胞的大块组织工程肝构建及体内植入研究,以期构建长期存活的功能性肝组织。方法采用3-D打印技术制备硅胶模具,经成胶脱模制备胶原水凝胶支架。将大鼠肺成纤维细胞与原代肝细胞以0.4∶1比例种植于该支架中(B组),以种植同密度单纯原代肝细胞为对照(A组)。体外培养1、3、7、14、21 d,观察细胞形态并检测肝功能(白蛋白和尿素分泌量)。取24只SD大鼠,采用皮下注射四氯化碳方法制备肝硬化模型,将A、B组组织工程肝分别植入大鼠腹腔大网膜内(n=12),植入后3、7、14、21、28 d行HE、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)及ALB染色观察。结果体外实验中,与A组相比,B组肝细胞呈多边形,细胞核大且圆,肝功能表达旺盛,并且在7 d时聚团生长最多,7 d后白蛋白及尿素分泌量显著增高(P<0.05)。体内实验中,B组肝细胞能存活至28 d,白蛋白和尿素分泌也显著增多,细胞团聚成条索形,形成了类正常肝脏组织。结论多细胞大块组织工程肝体内植入时形成了类正常肝脏组织,并长期存活,为构建结构和功能更完整的组织工程肝奠定了基础。
- 曲晓丽王敏贺健康刘亚雄周新民李涤尘靳忠民
- 关键词：成纤维细胞原代肝细胞共培养体内植入
- 肝细胞体外培养平台的仿生设计与构建被引量：1
- 2010年
- 构建一种能够更好地模拟肝细胞生长环境的体外培养平台。利用先进制造方法中的快速成型技术和微压印技术制作生物反应器和三维支架。将三维支架置于生物反应器中,与蠕动泵、氧和器、储液罐构建肝细胞的体外的动态培养系统。研究培养液流速、氧流量与氧含量的关系并进行参数优化,利用细胞支架复合体进行细胞培养。细胞培养结果显示该系统能够维持肝细胞的正常存活和生长。所设计并实现的动态灌注培养系统,通过调整流速和氧流量,可具有良好的氧合效果和较高的效率,能够更好的模拟肝细胞的体内生长环境。
- 刘亚雄李涤尘赵倩贺健康高琨
- 关键词：肝组织工程
- 蚕丝蛋白和明胶复合组织工程材料与肝细胞相容性的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究蚕丝蛋白-明胶三维材料支架对人永生化肝细胞系QZG贴附及增殖的影响。方法:采用四氮唑盐比色法(MTT)、细胞计数法检测QZG细胞在纯蚕丝生物材料上与在蚕丝蛋白-明胶复合材料上的增殖情况,用扫描电镜观察QZG细胞在两种三维生物材料上的贴附与增殖情况。结果:QZG细胞可以在蚕丝蛋白生物材料贴附及增殖,在引入明胶的蚕丝蛋白材料上细胞贴附更紧密,增殖更明显。结论:蚕丝蛋白与明胶复合材料支架具有良好的细胞贴附性能,通过改进在肝组织工程应用方面将具有一定应用前景。
- 徐丽莎刘文晶申少波杨照陈蕊蕊韩英尹芳时永全周新民
- 关键词：MTT比色法蚕丝蛋白明胶肝组织工程
- 三维微流道支架直接压印成形方法被引量：3
- 2012年
- 针对软质生物材料支架内部三维微结构成形难题,提出了结合分层制造、微压印与冷冻干燥技术的三维微流道支架直接压印成形方法.通过开发自动化成形设备,实现了材料溶液填充、微结构压印、结构预冻、层间黏结等工艺过程的可控化,从而解决了传统手工操作所造成的结构重复性差、成形效率低等问题.研究了模具表面等离子处理、亲水物质添加、改变溶液填充方式等工艺对自动化成形过程中微结构复型性能的影响.结果表明,向材料溶液中添加微量亲水物质并辅助溶液填充引导,可实现软质水溶性天然生物材料内部复杂微流道结构的精确三维压印成形.通过工艺装备保证了成形过程的自动化和稳定性,从而实现了支架微结构制造的可重复性与可控性.
- 王烨贺健康刘亚雄庞师坤张文友李涤尘
