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江西省卫生厅基金(20092077)
作品数:
1
被引量:2
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相关作者:
龚帧
林玲
吴周环
干丽君
李卫东
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相关机构:
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熊建军
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四川大学学报...
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2011
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泛素特异水解酶22基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定
被引量:2
2011年
目的构建泛素特异水解酶22基因(USP22)RNA干扰(RNAi)的真核表达载体,并观察其对肝癌细胞株HepG2增殖的影响。方法根据USP22 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入质粒载体pMSCV/Hyg/U6。酶切和测序鉴定重组质粒pMSCV/Hyg/siUSP22。脂质体介导重组质粒转染HepG2细胞,RT-PCR和Western blot检测USP22基因mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖能力。结果经酶切鉴定筛选出的重组质粒测序结果与目的序列完全一致。该重组质粒转染能降低HepG2细胞USP22 mRNA及蛋白质表达,并抑制细胞增殖。结论成功构建USP22基因RNAi真核表达载体,该载体通过下调USP22基因表达,抑制HepG2细胞的增殖能力,为进一步研究USP22的生物学功能奠定了基础。
熊建军
干丽君
林玲
龚帧
吴周环
李卫东
关键词:
RNA干扰
HEPG2细胞
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