吉林省科技厅白求恩医学专项基金(200705231)
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- 脂质体介导质粒pcDNA3.1/KDRn3基因在转染小鼠视网膜组织中的表达及定位
- 2010年
- 目的:将真核表达质粒pcDNA3.1/KDRn3以脂质体介导转染C57BL/6J小鼠视网膜组织,观察其表达及定位。方法:首先对真核表达质粒pcDNA3.1/KDRn3进行扩增和酶切鉴定,然后将20只健康C57BL/6J小鼠随机分成对照组及玻璃体腔注射后2、5、7和14d组,每组4只鼠8眼。注射组每眼玻璃体腔注射脂质体pcDNA3.1/KDRn3复合物1μL,分别于注射后2、5、7及14d摘除眼球,制成石蜡切片,用KDRn3蛋白免疫荧光染色在激光共聚焦显微镜下观察KDRn3蛋白表达及定位。结果:XhoⅠ和BamHⅠ进行双酶切,切下900bp大小片段,与目的片段大小一致,表明该质粒确实为KDRn3。注射后2d在视网膜神经节细胞层细胞胞浆内可见红色荧光信号,注射后5和7d组视网膜神经节细胞层、内核层部分细胞胞浆内可见红色荧光信号;注射后14d视网膜神经节细胞层、部分内核层细胞胞浆内可见红色荧光信号,但发出红色荧光信号的细胞数明显减少。结论:阳离子脂质体可有效将pcDNA3.1/KDRn3基因转染小鼠视网膜组织,并得到持续表达。
- 左玲栾永昕姜扬裴颖苏冠方
- 关键词：血管内皮生长因子受体基因转染视网膜
