中国博士后科学基金(2012M511705)
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 相关作者：许化溪苏兆亮王胜军糜祖煌邢丽丹更多>>
- 相关机构：江苏大学无锡市克隆遗传技术研究所江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 饥饿状态下Lewis细胞HMGB1的表达、定位与细胞自噬发生的相关性研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨饥饿状态下小鼠肺癌细胞(Lewis)自噬的发生与高迁移率组蛋白B1(HMGB1)的相关性。方法分别用HBSS诱导Lewis自噬0、3、6及9 h,免疫荧光检测HMGB1在胞内表达水平及迁移情况;收集细胞及培养上清,Western blot检测微管相关蛋白轻链3(LC3)及其磷脂酰乙醇胺共轭物(LC3-Ⅱ)、泛素结合蛋白p62与高迁移率组蛋白(HMGB1)的表达水平;PCR检测Lewis细胞表面HMGB1配体RAGE、TLR2及TLR4的表达。结果免疫荧光显示,Lewis细胞饥饿6 h后HMGB1表达量增加并伴随从胞核向胞浆的迁移;Lewis细胞饥饿3 h后,Western blot结果显示,HMGB1及LC3-Ⅱ表达水平逐渐增加;Lewis细胞表面表达HMGB1的配体RAGE、TLR2及TLR4;利用重组的HMGB1蛋白刺激Lewis后细胞自噬明显增加。结论 HMGB1可以促进Lewis细胞自噬的发生。
- 汪汀高云涛王承琳徐鑫鑫尹晶平田莎莎邢丽丹王胜军张盼纪晓昀沈慧玲许化溪苏兆亮
- 关键词：自噬P62
- 青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯的合成及其抗炎作用被引量：3
- 2014年
- 目的合成并初步探索青藤碱衍生物青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯的抗炎作用。方法以青藤碱(SN)为原料,化学合成青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯。用脂多糖(LPS)诱导建立内毒素血症小鼠模型,并在诱模前于治疗组小鼠体内分别注射5 mg/kg、2.5 mg/kg剂量的青藤碱和青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯,未治疗组和空白对照组注射生理盐水,观察记录各组小鼠的状态及生存状况。MTT法检测不同浓度青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯体外对RAW264.7细胞增殖的影响。用终浓度为(0、1、2、5、10)μmol/L的青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯共培养刺激RAW264.7细胞24 h,再加终浓度为1μg/kg的LPS刺激6 h后,实时定量PCR检测IL-6mRNA表达水平。结果成功制备青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯。体内研究发现:相同浓度青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯治疗组小鼠,生存状态较青藤碱治疗组有所改善;青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯体外可以抑制巨噬细胞的增殖和IL-6的表达。结论青藤碱-4-羟基-棕榈酸酯具有一定的抗炎作用,可能是通过抑制巨噬细胞增殖、减少炎症介质释放而实现的。
- 田莎莎张蓉杨凤英汪汀沈培汤建徐鑫鑫邢丽丹许化溪苏兆亮
- 关键词：脂多糖青藤碱IL-6内毒素血症
- 高迁移率族蛋白1促进小鼠心肌成纤维细胞增殖和迁移被引量：2
- 2015年
- 目的探讨高迁移率族蛋白1（HMGB1）对心肌成纤维细胞的增殖和迁移以及对胞内基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2、金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP1）表达的影响。方法 HMGB1作用于分离培养的1~2周新生小鼠心肌成纤维细胞,24 h后,采用MTT法检测细胞增殖。心肌成纤维细胞在HMGB1作用6、24、48 h后,反转录PCR检测MMP-1、MMP-2、TIMP1的mRNA水平、Western blot法检测MMP-1、MMP-2和TIMP1的蛋白水平。另外,TranswellTM实验检测HMGB1对心肌成纤维细胞迁移的影响。结果与对照组相比,HMGB1作用于心肌成纤维细胞24 h后,细胞增殖明显增加。心肌成纤维细胞在HMGB1作用后,MMP-1、MMP-2、TIMP1的mRNA和蛋白水平均明显升高。与对照组相比,TranswellTM实验结果显示HMGB1促进心肌成纤维细胞迁移。结论 HMGB1可以促进心肌成纤维细胞的增殖和迁移,上调MMP-1、MMP-2、TIMP1的表达。
- 张盼倪萍苏晓莲应欣宇汪汀杨慧建徐芸芸许化溪苏兆亮
- 关键词：高迁移率族蛋白B1心肌成纤维细胞金属基质蛋白酶
- HMGB1 Drove the Pathogenic Th1-like Th17 cells Expansion in Atherosclerosis Patients by Controlling the Transcription Factor T-bet and RUNX3 Expression
- Th17 cells,as a high plasticity subset of T helper cells with proinflammatory actions,were recently identified...
- Ping NiPan ZhangXin LinYueqin LiuTingjun BaoChanjuan XieWenlin XuHuaxi XuZhaoliang Su
- 关键词：HMGB1ATHEROSCLEROSIS
- 文献传递
- HMGB1 Modulated Lewis Cells Autophagy and Allowed Cells Survival by Positive Feedback via RAGE-HMGB1-Erk1/2 Dependent Pathway during Nutrient Depletion
- Autophagy is a self-digesting mechanism responsible for the removal of long-lived proteins and damaged organel...
- Pan ZhangPing NiTing WangXin LinYueqin LiuTingjun BaoChanjuan XieWenlin XuHuaxi XuZhaoliang Su
- 关键词：HMGB1AUTOPHAGYRAGE
- 文献传递
- 耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与LAP-2型β-内酰胺酶分子对接研究被引量：5
- 2013年
- 目的检测20株耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因,研究LAP-2型β-内酰胺酶分子对接情况,以了解LAP-2型β-内酰胺酶对11种β-内酰胺类药物水解活性。方法 22种β-内酰胺酶基因检测均为PCR法,在SWISS-MODEL利用PDB数据库作同源建模获得LAP-2型β-内酰胺酶的受体分子3D结构,使用ArgusLab4.1软件中的DOCK模块作11种β-内酰胺类药物和克拉维酸β-内酰胺酶抑制剂与LAP-2型β-内酰胺酶分子对接。结果 20株耐药大肠埃希菌中18株检出β-内酰胺酶基因,检出阳性率为90.0%,其中TEM阳性率50.0%,CTX-M-1群阳性率65.0%,LAP阳性率5.0%,LAT/CMY阳性率5.0%,OXA-1群阳性率25.0%;LAP-2型β-内酰胺酶催化效率最高的为阿莫西林。结论 11种β-内酰胺类药物和1种β-内酰胺酶抑制剂与LAP-2型β-内酰胺酶对接的结合自由能,阿莫西林、氨苄西林和头孢噻肟结合自由能下降为前3位。
- 原鸿雁孙强尹晶平高晶晶苏兆亮糜祖煌王胜军许化溪
- 关键词：大肠埃希菌Β-内酰胺酶类
- 耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分析被引量：3
- 2013年
- 目的:了解耐药大肠埃希菌(drug-resistant Escherichia coli,DR-ECO)氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分布,探讨该菌对氨基糖苷类药物耐药的分子机制。方法:采用PCR法检测20株DR-ECO中15种氨基糖苷类修饰酶基因和7种16S rRNA甲基化酶基因,并用PCR直接全自动荧光法对阳性产物进行测序。结果:20株DR-ECO中,18株检出氨基糖苷类修饰酶基因;其中,aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、aadA4/5和aph(3')-Ⅰ的阳性检出率分别为25%、25%、5%、65%和55%;只有1株检出rmtB型16S rRNA甲基化酶基因,阳性率为5%,其余基因型均未测出。结论:本组DR-ECO对氨基糖苷类药物的耐药主要与aadA4/5和aph(3')-Ⅰ等氨基糖苷类修饰酶基因相关,而与16S rRNA甲基化酶基因无明显关系。
- 原鸿雁郭兵方尹晶平孙强高晶晶苏兆亮王胜军许化溪糜祖煌
- 关键词：耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶
- 耐药鲍曼不动杆菌ADC型β-内酰胺酶基因分子流行病学研究被引量：9
- 2013年
- 目的了解临床分离的92株耐药鲍曼不动杆菌ADC型β-内酰胺酶基因存在状况以及其基因进化分析。方法 92株耐药鲍曼不动杆菌分离自某省级医院痰液标本,药敏纸片法检测其药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析ADC型β-内酰胺酶基因。结果 92株鲍曼不动杆菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、米渃环素、复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为:91.3%、91.3%、91.3%、89.1%、89.1%、90.2%、67.4%、83.7%、58.7%、84.7%;ADC型β-内酰胺酶的阳性率为93.5%;ADC型β-内酰胺酶基因分子进化显示,可分为4个簇群。结论 ADC型β-内酰胺酶基因在多重耐药的鲍曼不动杆菌中广泛存在,这有可能是造成青霉素、第一至第三代头孢类药物和单环类β-内酰胺类药物耐药的主要原因。
- 苏兆亮糜祖煌朱海涛邢丽丹陈建国林新刘月琴许化溪
- 关键词：鲍曼不动杆菌多药耐药
- 胃癌组织IL-17RB的表达及意义
- 2014年
- 分析胃癌组织IL-17RB和IL-17B表达水平,探讨其与胃癌发生发展的关系及其可能机制。留取25例胃癌组织及其配对的癌旁组织,应用普通PCR和实时荧光定量PCR法检测IL-17RB和IL-17B的mRNA,采用Pearson法进行相关性分析;western blot和免疫荧光法检测胃癌组织及其配对的癌旁组织IL-17RB蛋白水平表达差异。结果显示,胃癌组织IL-17RB和IL-17B mRNA表达水平均明显高于癌旁组织,两者呈明显正相关;胃癌组织IL-17RB蛋白水平明显高于癌旁组织。在胃癌组织,IL-17B/IL-17RB信号对胃癌的发生发展具有一定作用。
- 别庆丽孙彩霞吴玉敏杨慧健应欣宇苏兆亮王胜军许化溪
- 关键词：胃癌
- 牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB-GITRL真核共表达载体的构建及免疫原性研究被引量：1
- 2012年
- 目的:构建牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB和小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体(mGITRL)真核共表达载体,在体内研究其免疫原性。方法:应用PCR扩增技术,从pMD18-T-ragB中获得ragB基因编码序列片段,克隆至真核共表达载体pIRES及pIRES-mGITRL。对重组质粒进行双酶切与测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot检测其在COS7细胞中的表达。将成功构建的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗RagB的水平。结果:PCR扩增目的基因,酶切和测序证实重组质粒pIRES-ragB及pIRES-ragB-mGITRL成功构建,Westernblot结果显示目的基因在COS7细胞及骨骼肌细胞中均过表达。小鼠血清中检测出高滴度的抗RagB的抗体。结论:pIRES-ragB-mGITRL表达载体的构建,为牙龈卟啉菌疫苗研究、预防和牙周炎治疗提供了实验依据。
- 孔凡芝郑东苏兆亮佘鹏徐鑫鑫田莎莎张盼陈建国许化溪
- 关键词：牙龈卟啉菌免疫原性
