黑龙江省自然科学基金(D200842)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：张丽景田野徐长庆张力李全凤更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SHP-2重组腺病毒的包装及对心肌细胞的感染被引量：2
- 2010年
- 目的采用HEK293细胞包装Ad-GFP-SHP-2和Ad-GFP-SHP-2-E76A并扩增Ad-GFP重组腺病毒并感染乳鼠心肌细胞。方法纯化两种载体;PacⅠ酶切线性化;线性化的载体转染入HEK293细胞进行包装;从病变的HEK293细胞分离重组腺病毒。利用重组的腺病毒感染乳鼠心肌细胞,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。结果 PacⅠ酶切后,琼脂糖凝胶上显示有4.5 kb的条带;转染线性化的重组腺病毒载体入HEK293细胞中,反复冻融HEK293,其上清中含有重组腺病毒,当感染乳鼠心肌细胞感染复数为100时,感染效率大于90%。结论成功包装重组腺病毒,包装后的腺病毒可高效感染乳鼠心肌细胞。
- 张力李全凤李弘王丽娜金成艳董红岩王秀丽张丽景王果元徐长庆田野
- 关键词：SHP-2重组腺病毒心肌细胞
- 蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2减弱心肌细胞凋亡
- 目的成年心肌细胞为终末分化细胞,不能通过分裂增殖。细胞凋亡作为细胞死亡的一种形式伴随着心脏疾病的终末阶段,可使细胞数量减少,进而影响心脏功能。因而,揭示心肌细胞凋亡的机制有望为阻断心肌细胞的死亡提供理论思路。方法本研究采...
- 王果元金成艳张丽景吴博李全凤徐长庆田野张力
- 关键词：心肌细胞
- 文献传递
- SHP-2对人胃癌细胞克隆增殖的影响被引量：7
- 2012年
- 目的研究SHP-2对人胃癌细胞SGC-7901细胞克隆增殖的影响。方法采用重组腺病毒Ad-GFP(GFP)、Ad-GFP-SHP-2(WT)转染SGC-7901细胞;采用蛋白印迹技术(Western blot)检测SHP-2蛋白的表达;同时进行集落形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力。另外,观察SHP-2抑制剂NSC-87877作用后,对SGC-7901集落形成的影响。结果当胃癌细胞感染复数为150时,转染成功的细胞数占总细胞数的0.9。WT组SHP-2蛋白过表达。WT组的平板克隆数明显高于SGC-7901亲本细胞组(Control 1)和GFP组,P<0.05。SHP-2抑制剂组(NSC-87877)的平板克隆数及软琼脂克隆数分别明显低于SGC-7901亲本细胞组(Control2),P<0.05。结论 SHP-2对SGC-7901细胞克隆增殖有明显促进作用。
- 汪钊张丽景侯媛媛徐长庆田野张力
- 关键词：SHP-2SGC-7901细胞细胞增殖
- 蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞增殖的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨含有Src同源结构域2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology 2 domain-containing pro-tein tyrosine phosphatase 2,SHP-2)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fi-broblasts,CFs)增殖的作用。方法:差速贴壁法体外培养心肌成纤维细胞,以波形蛋白(vimentin)鉴定CFs纯度;MTT法检测AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖率,采用重组腺病毒过表达SHP-2和SHP-2抑制剂NSC-87877分别对AngⅡ作用下的细胞增殖的影响。结果:AngⅡ对CFs增殖的促进作用有剂量依赖性,其促进细胞增殖的最高浓度为10-7mol/L;在AngⅡ的刺激下,SHP-2可以促进心肌成纤维细胞增殖,并且突变体组比野生型组增殖更明显(P<0.01)。SHP-2抑制剂NSC-87877达到50μmol/L时可以明显抑制AngⅡ刺激下的CFs增殖。结论:AngⅡ的促CFs增殖作用是通过SHP-2调控的。
- 张丽景金成艳王果元吴博李全凤徐长庆田野张力
- 关键词：心肌成纤维细胞细胞增殖
