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氯化钴对人eNOS基因启动子SP3替换改构体转录活性的影响被引量：2: 2010年; 目的：构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶基因启动子，利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性变化。方法：含SP1替换SP3突变序列的引物通过PCR构建突变启动子pGL2-eNOS-repSP3载体，将已经构建好的pGL2-eNOS—repSP3载体和pGL2-eNOS分别转染HUVEC-12细胞，并以之前构建的SP1插入eNOS启动子改构体pGL2-eNOS—insSP1为阳性对照，通过双荧光素酶报告基因技术检测并比较不同浓度氯化钴刺激下eNOS启动子转录活性的变化。结果：成功构建了含SP1替换SP3突变序列的eNOS启动子改构体。氯化钴刺激后转染细胞，改构体eNOS启动子活性在一定范围内呈现随氯化钴剂量增加而升高的趋势；SP1替换SP3的eNOS启动子转录活性与SP1插入的eNOS启动子之间无显著差异。结论：pGL2-eNOS—rep—SP3和pGL2-eNOS—insSP1两种改造方法在转录活性上没有显著差别。; 龙宇天邢飞跃; 关键词：启动子氯化钴

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国家自然科学基金(30971465)