黑龙江省自然科学基金(D200856)
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 相关作者：胡伟平郭阳张智慧曹潇方袁梦桐更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院哈尔滨医科大学北京大学口腔医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外克隆化传代培养人年轻恒牙牙髓干细胞的研究被引量：13
- 2010年
- 目的:观察克隆化传代培养10代以上人年轻恒牙牙髓干细胞的形态及特性。方法:体外分别采用传统传代法和克隆化传代法培养人年轻恒牙牙髓干细胞,流式细胞仪分别检测两种培养方法传代第10代细胞表面抗原stro-1的表达。细胞连续性克隆化传代培养。结果:克隆化传代培养的第10代细胞表面抗原stro-1阳性率高于传统传代培养的细胞(P<0.05)。所培养的细胞具有干细胞的形态特征,呈集落型生长。目前细胞已稳定传代22代。结论:克隆化传代培养能有效提纯人年轻恒牙牙髓干细胞,细胞能稳定传代20代以上并保持干细胞特性。
- 袁梦桐胡伟平周海燕胡那日苏
- 关键词：STRO-1克隆化培养
- SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究被引量：6
- 2010年
- 目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代人牙髓干细胞,并进行克隆化培养,检测间充质干细胞特异性标志物STRO-1的表达。将人牙髓干细胞分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测不同时间、两种因子单独或联合对细胞增殖能力的影;免疫荧光法检测抗微管相关蛋白(MAP-2)、神经元烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的间充质干细胞特异性标志物STRO-1表达阳性。100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF单独作用促增殖作用最强(P<0.05),碱性成纤维生长因子bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。音猬因子SHH作用各组检测到阳性细胞。而100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF联合增殖和分化作用均优于其它组。透射电镜观察到神经元样细胞表现。结论:100μg/L音猬因子和20μg/L碱性成纤维生长因子联合可以在体外有效诱导人牙髓干细胞分化为神经细胞。
- 张智慧胡伟平郭阳曹潇方袁梦桐
- 关键词：人牙髓干细胞音猬因子碱性成纤维生长因子分化
- 细胞外基质磷酸糖蛋白在牙发生及骨形成上的研究进展被引量：1
- 2013年
- 细胞外基质磷酸糖蛋白（matrix extracelluar phospho-glycoprotein,MEPE），最初由Rowe等Ⅲ从肿瘤相关性骨软化症（ oncogenic hypophosphatemic osteomalacia, OHO）患者肿瘤细胞的cDNA文库中克隆而得，随后L．Argiro等在骨组织中发现MEPE与矿化密切相关。牙和骨组织均为矿化的组织，在细胞外基质中的蛋白组成以及形成机制上是相似的。目前MEPE在成骨细胞、骨细胞和成牙本质细胞上均表达，其在牙形成及骨发生方面作用已成为研究热点。本文现就MEPE在骨及牙这两个矿化组织中的研究进展进行综述。
- 刘明月郭阳李莹张智慧于忠艳吴迪胡伟平
- 关键词：细胞外基质磷酸糖蛋白牙发生骨形成CDNA文库成牙本质细胞肿瘤相关性
- 牙髓干细胞多向分化能力的研究进展被引量：1
- 2012年
- 文中从牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)多向分化潜力、研究进展及应用方面进行探讨,综合分析了DPSC多向分化能力的研究进展。DPSC可向三胚层细胞分化,例如向成牙本质细胞、软骨细胞等细胞分化,这将有助于DPSC的鉴定、牙齿再生、牙体牙髓疾病及其他疾病的治疗。
- 张智慧郭阳胡伟平
- 关键词：分化
- RA、SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:研究体外使用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、音猬因子(sonic hedgehog,SHH)、碱性成纤维生长因子(fibroblastgrowth factor-basic,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化DPSCs向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代DPSCs,并进行克隆化培养,检测STRO-1的表达。将DPSCs分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测三种因子对细胞增殖能力的影响,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性。三种因子联合诱导促增殖作用最强,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。除对照组外,各诱导组均检测出神经元样细胞,其中以三因子联合诱导组阳性细胞表达率最高,促分化作用均优于其他组。透射电镜观察到神经元样细胞表现。结论:三因子联合可以在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞。
- 张智慧胡伟平郭阳曹潇方
- 关键词：人牙髓干细胞全反式维甲酸音猬因子碱性成纤维生长因子分化
- 成骨细胞与矿化液诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化的对比研究被引量：10
- 2012年
- 目的比较成骨细胞和矿化液对牙髓干细胞（dental pulp stem cells，DPSC）向成骨细胞分化的作用，选择理想的诱导方法。方法利用插入式小室将成骨细胞与DPSC共培养作为共培养组，矿化液培养DPSC作为矿化液组。在光学显微镜和透射电镜下观察DPSC形态学变化；应用茜素红染色法检测矿化结节；采用反转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-RCR）分别检测DPSC骨涎蛋白、Runt相关转录因子2、骨钙蛋白、I型胶原等骨源性基因表达情况。结果茜素红染色显示培养28d后共培养组DPSC矿化结节明显多于矿化液组。培养15d后共培养组骨涎蛋白和I型胶原基因阳性表达水平（分别为9．807±1．135和2．913±0．310）显著高于矿化液组（分别为6．478±0．781和1．703±0．184，P〈0．05）。结论成骨细胞分泌大量细胞因子或可溶性蛋白，对DPSC的诱导作用较矿化液明显。
- 王钰莹运慧媛缪宏颖胡伟平
- 关键词：干细胞牙髓成骨细胞细胞分化
- RA和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性。方法:体外分离培养DPSCs并进行克隆化,检测STRO-1的表达。将DPSCs分别接种于含有不同浓度RA、bFGF或二者结合的诱导液,MTT法检测细胞增殖能力,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性。0.5μg/ml RA或20 ng/ml bFGF单独应用促增殖作用最强(P<0.05),bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。RA作用各组检测到阳性细胞。而0.5μg/ml RA与20 ng/ml bFGF联合应用的增殖和分化效应均优于其它组。透射电镜观察到幼稚神经元样细胞。结论:RA和bFGF联合应用可在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞。
- 张智慧胡伟平郭阳曹潇方
- 关键词：人牙髓干细胞全反式维甲酸分化
