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PP2A B56α调节亚基原核表达载体的构建及表达: 2016年; 为了构建PP2A B56α调节亚基原核表达载体,以p CEP-4HA-B56α质粒为模板,设计引物克隆人源PP2A B56αc DNA,连入p GEX-4T-1载体中,测序正确后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并将诱导表达重组蛋白的菌体超声破碎后,进行可溶性分析,对可溶性蛋白进行纯化.SDS-PAGE电泳及Western Blot分析鉴定重组蛋白.结果表明,经测序和酶切鉴定后成功构建重组质粒p GEX-4T-1-B56α,表达大小约79 k D的重组蛋白,可溶性表达的重组蛋白为菌体总蛋白质量的8.6%,经GST纯化系统纯化得到纯度约为78.9%的重组蛋白,回收率达到52.2%.因此,本研究成功构建了PP2A B56α原核表达体系,获得重组蛋白,为研究PP2A B56α的生物学功能奠定了基础.; 赵亚平程晓清孙晓莉李良渊张朝; 关键词：PP2A 原核表达

Circadian Regulation of Cardiac Sodium-Calcium Exchanger in Response to Physiological and Pathophysiological Stimulation: Aim This study was designed to investigate rhythmic expression of NCX1 and circadian clock genes as well as th...; Mingda WenCaihua YuanLiangyuan LiDachuan DongXiaoli SunChenchen ZhangYaping ZhaoZhao Zhang; 文献传递

麦冬皂苷D缓解多柔比星诱导的心肌细胞损伤: 本研究探讨麦冬皂苷D对多柔比星诱导心肌损伤的保护作用。结果表明,多柔比星可诱导H9c2细胞内质网应激相关蛋白的表达量显著上升,并导致细胞活性氧含量增加,活力下降。而麦冬皂苷D预处理可部分逆转多柔比星引起的上述变化,抗氧化...; 张赢予张国辉孟晨高艳红芮涛张朝; 关键词：麦冬皂苷D 多柔比星内质网应激; 文献传递

麦冬皂苷D缓解多柔比星诱导的心肌细胞损伤: 本研究探讨麦冬皂苷D对多柔比星诱导心肌损伤的保护作用。结果表明,多柔比星可诱导H9c2细胞内质网应激相关蛋白的表达量显著上升,并导致细胞活性氧含量增加,活力下降。而麦冬皂苷D预处理可部分逆转多柔比星引起的上述变化,抗氧化...; 张赢予张国辉孟晨高艳红芮涛张朝; 关键词：麦冬皂苷D 多柔比星内质网应激

3种新型蛋白酶体抑制剂对斑马鱼心脏毒性的评价被引量：2: 2019年; 为了观察3种新型蛋白酶体抑制剂对斑马鱼的心脏毒性并初步探讨其机制,将斑马鱼胚胎分别暴露于一系列浓度的化合物NNU395、NNU458和NNU459。于显微镜下观察并拍摄斑马鱼的心脏形态,统计死亡率及心率,并检测斑马鱼心脏发育相关基因的表达情况。结果显示,NNU395、NNU458和NNU459呈浓度依赖地增加了斑马鱼的死亡率,对斑马鱼胚胎的半数致死浓度分别为(179.7±12.2),(27.5±1.3)和(24.4±2.6)μmol/L,且较之各自改构前体,3种化合物对斑马鱼的毒性更低。120~200μmol/L NNU395及30μmol/L的NNU458或NNU459处理后的斑马鱼出现明显的心包水肿和心脏畸形。120~200μmol/L的NNU395及0.1~30μmol/L的NNU458或10~30μmol/L的NNU459均显著降低斑马鱼的心率。3种化合物对斑马鱼心脏发育相关基因的表达都没有显著影响。本研究提示低浓度的NNU395、NNU458和NNU459对斑马鱼心脏无明显毒性,高浓度的3种化合物对斑马鱼可产生心血管毒性。; 胡丙雪董雪范宏伟朱永强张茵张朝; 关键词：蛋白酶体抑制剂心脏毒性斑马鱼

PP2A Cα敲除小鼠心肌细胞模型的构建: 2013年; 体外构建PP2A Cα敲除的原代小鼠心室肌细胞模型.选择性地将雄性PP2A Cαfl/fl,Cre/-小鼠与雌性PP2ACαfl/fl,Cre/-小鼠交配.新生小鼠心脏经胰酶消化后差速贴壁获得原代小鼠心室肌细胞,用带有Cre的腺病毒侵染心肌细胞,经荧光显微镜观察和Western-blot检测,分析PP2A Cα的敲除效果.将基因型为PP2A Cαfl/fl,Cre/-的雌雄小鼠进行交配,得到其同样基因型的后代,进而可获得足量基因型为PP2A Cαfl/fl,Cre/-的原代小鼠心肌细胞.用带有重组酶Cre的腺病毒侵染细胞48 h后,可见带有绿色荧光的心肌细胞;Western-blot检测显示,PP2A Cα在Cre腺病毒侵染的心肌细胞可下调60%～80%.本研究成功建立了PP2A Cα敲除的原代小鼠心肌细胞模型.; 陈文温明达董大川高艳红张朝

蛋白磷酸酶2A缺失导致小鼠心脏线粒体功能异常及能量代谢重构: 心力衰竭（heart failure,HF）是大多数心血管疾病的终末阶段表现为心脏收缩/舒张功能障碍的临床综合征。其发病率高,5年死亡率高达50%,匹敌甚至超过了多种癌症,已成为全球范围内致残致死的首要病因。面对威胁人类...; 陈文; 关键词：心肌肥厚线粒体; 文献传递

Snapin Participated in Modulating the Membrane Expression of Cardiac Cav1.3 Ca2+ Channel: It has recently been established that Cav1 3(α1 D)variant L-type Cachannels palys particular role in generatin...; XL Sun,J Guo,Z Chen,C Chen,MD Wen,C Meng,Z Zhang~# Jiangsu Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology,College of Life Science, Nanjing Normal University,Nanjing 210046; 文献传递

血管非炎性分子1的生理及病理生理作用: 2020年; 血管非炎性分子1(vascular non-inflammatory molecule 1,vanin1;VNN1)是具有泛酰巯基乙胺酶活性的糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白,在人体广泛分布。VNN1催化D-泛酰巯基乙胺水解产生D-泛酸和半胱胺,前者是体内合成辅酶A的前体物质,后者则是体内具有高亲和力的抗氧化物质,它们参与体内多种生物学过程,如氧化应激、炎症反应、代谢活动。鉴于VNN1的酶学特征,它在许多疾病的发生发展中起着重要作用。该文对VNN1基因家族、VNN1蛋白结构、生物学作用及其病理生理功能进行综述。; 张茵张朝; 关键词：半胱胺泛酸

环黄芪醇对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化的影响被引量：6: 2020年; 目的:探讨环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)对小鼠心肌纤维化的影响及其机制。方法:用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)建立小鼠心肌纤维化模型,用低、高浓度CAG分别处理小鼠。超声心动法检测小鼠心功能;Masson三色染色法观察心脏纤维化情况;RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学法检测与纤维化相关的信号分子表达。此外,分离培养乳大鼠心脏成纤维细胞,检测上述信号分子的表达。结果:CAG显著缓解了ISO刺激所致的心脏功能紊乱和心肌纤维化;抑制了氧化应激相关因子NADPH氧化酶4和诱导型一氧化氮合酶的转录;抑制了核因子κB信号通路中关键蛋白的磷酸化以及转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达;并且在原代成纤维细胞中验证了CAG可以缓解ISO刺激引起的上述因子表达。结论:CAG通过抑制氧化应激、炎症反应和TGF-β的表达缓解心肌纤维化。; 董雪范宏伟胡丙雪张茵张朝; 关键词：心肌纤维化核因子ΚB 转化生长因子Β

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