国家自然科学基金(30971425)
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
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- 肌肉生长抑制素前肽融合蛋白的重组表达及其抗萎缩活性的初步鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨"白蛋白-突变型肌肉生长抑制素前肽"融合蛋白在抗肌萎缩中的作用。方法:首先将肌肉生长抑制素前肽基因第76位天冬氨酸对应的碱基突变为丙氨酸对应的碱基,获得了"突变型肌肉生长抑制素前肽"基因。再将该基因与大鼠白蛋白基因片段连接,克隆至酵母表达载体。利用酵母表达系统,重组表达"白蛋白-突变型肌肉生长抑制素前肽"融合蛋白。纯化的重组蛋白用于尾悬吊大鼠的治疗实验。结果:大鼠经过21天的尾悬吊,后肢骨骼肌发生了明显的萎缩。注射"白蛋白-突变型肌肉生长抑制素前肽"融合蛋白的尾悬吊大鼠,其后肢骨骼肌未发生萎缩。结论:重组表达的"白蛋白-突变型肌肉生长抑制素前肽"
- 黄庆生李琦杨慧靳明亮车速
- 关键词：肌肉萎缩肌肉生长抑制素融合蛋白
- 重组标签蛋白在蛋白质纯化中的研究进展被引量：14
- 2014年
- 重组蛋白的表达纯化是研究蛋白质结构与功能的重要环节之一,表达重组蛋白宿主细胞的监测筛选和重组蛋白低水平可溶性表达、低回收率以及不稳定易水解等问题一直是蛋白质高通量纯化工艺中的难题。近年来,将多肽或蛋白质作为标签,与目标蛋白共表达的方法已经很大程度地解决了这一问题。因此,针对不同特性的蛋白质选择合适的标签纯化策略在重组蛋白纯化研究中是相当关键的环节。本文回顾了几种传统标签蛋白的研究概况(His-tag,Arg-tag,Flag-tag,GST-tag,MBP-tag等),着重对近年来新开发的了几种标签蛋白(Si-tag,Halo-tag,Intein-CBD-tag,ELPs-tag等)进行了深入探讨,并对新标签蛋白在蛋白质纯化中的应用前景作以展望。
- 崔超呼延霆尹大川
- 关键词：重组蛋白
- 尾悬吊大鼠比目鱼肌‘肌肉生长抑制素’基因的表达水平被引量：5
- 2010年
- 目的确定尾悬吊大鼠比目鱼肌组织中‘肌肉生长抑制素’(myostatin,MSTN)基因的表达水平。方法在测定尾悬吊14、30 d大鼠后肢比目鱼肌相对湿重的基础上,采用real-time RT-PCR方法,在基因水平对尾悬吊14、30 d大鼠比目鱼肌中MSTN mRNA水平进行检测。结果尾悬吊14、30 d后比目鱼肌的相对湿重分别下降了11%和19%。real-time RT-PCR结果表明,大鼠尾悬吊14、30 d后,比目鱼肌中MSTN mRNA表达水平均有所提高,分别是对照大鼠的2.2倍和3.5倍。结论尾悬吊大鼠后肢去负荷后可诱导抗重力肌-比目鱼肌组织中MSTN mRNA表达水平的上调。
- 黄庆生李琦张明杰
- 关键词：肌肉生长抑制素失重比目鱼肌
- 响应重力负荷变化的抗肌萎缩表达载体构建
- 2012年
- 目的:为了验证‘肌肉生长抑制素’启动子(PM)对去负荷(失重)的响应能力,观察PM调控下的抗萎缩蛋白(mM)表达载体在肌细胞去负荷时的表达水平及抗萎缩活性。方法:首先,构建了PM调控下的荧光素酶表达载体(pGL3-PM-Luc),检测模拟失重下荧光素酶基因在肌细胞中的表达水平,验证PM对重力负荷变化的响应。随后,构建了PM调控下的mM表达载体‘pGL3-PM-mM’,观察模拟失重下mM在肌细胞中的表达及其对肌细胞增殖的影响。结果:模拟失重下,‘pGL3-PM-Luc’转染的肌细胞荧光素酶表达提高了29%,‘pGL3-PM-mM’载体转染的肌细胞,mM表达上调了2.6倍,细胞增殖活性提高了24%。结论:PM在失重条件下可开启下游基因的表达,依此特点构建的mM表达载体,其mM的表达能随负荷减少而增加,且可促进肌细胞的增殖活性。
- 车速黄庆生李琦叶琳洁杨慧
- 关键词：肌肉萎缩肌肉生长抑制素失重
