陕西省自然科学基金(2003C215)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 相关作者：刘利英倪磊黄辰宋土生司履生更多>>
- 相关机构：西安交通大学西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA介导的NF-κB P65沉默诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡被引量：3
- 2007年
- 目的研究siRNA介导的NF-κBP65沉默诱导肝癌细胞凋亡相关机制。方法实验以肝癌SMMC7721细胞株为材料,分为空白对照(Con)、脂质体对照(LP)以及siRNA干扰实验(siRNA)3组。以体外转录法合成dsRNA,并用脂质体转染SMMC7721细胞株;Western blotting检测NF-#BP65表达水平,MTT检测细胞增殖情况,Annexin V-PI法检测细胞凋亡,免疫组化检测Bcl-2和Bax表达。结果与Con和LP组相比,siRNA具有抑制SMMC7721细胞NF-$BP65表达的作用,NF-%BP65表达抑制率分别达到64.74%和34.52%。siRNA明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,晚期凋亡细胞分别是Con组和LP组的8倍和7倍。siRNA引起Bcl-2表达下调,而Bax表达上调。结论siRNA可以有效抑制NF-&BP65蛋白表达,并通过调节Bcl-2和Bax诱导SMMC7721细胞的凋亡。
- 黄辰姚嘉宜李宗芳刘利英倪磊宋土生
- 关键词：肝癌NF-ΚBP65SIRNABAX
- p42^MAPK siRNA诱导HeLa细胞凋亡的相关基因表达研究被引量：2
- 2008年
- 目的应用小干扰RNA(siRNA)沉默HeLa细胞MAPK p42,研究其诱导细胞凋亡的分子机制。方法将筛选的MAPK p42靶向小干扰RNA(p42MAPKsiRNA)用脂质体转染至HeLa细胞。激光共聚焦显微镜观察小干扰RNA处理的细胞内钙变化,免疫组织化学法检测细胞Bcl-2和Bax的表达,流式细胞仪检测细胞内Caspase-3的活性。结果小干扰RNA-1和小干扰RNA-2均可诱导HeLa细胞内钙升高,导致Bcl-2表达下调和Bax表达上调,但是Caspase-3未参与细胞凋亡过程。结论MAPK p42小干扰RNA介导的HeLa细胞凋亡与Bcl-2/Bax通路有关。
- 刘利英黄辰李宗芳宋土生倪磊罗禹赵小鸽
- 关键词：MAPKP42小干扰RNA细胞凋亡HELA细胞
- siRNA介导的MA PK p42沉默诱导HeLa细胞凋亡被引量：8
- 2006年
- 目的应用siRNA沉默HeLa细胞MAPK p42,研究其对细胞存活的影响。方法体外合成靶向MAPKp42的 siRNA-1和siRNA-2,并用脂质体转染HeLa细胞,Western印迹法和免疫组织化学法检测p42MAPK的表达;电镜观察, TUNEL法测定细胞凋亡,Annexin-PI法测定不同凋亡时期细胞的分布。结果 siRNA-1和siRNA_2均可使HeLa细胞 MAPKp42沉默,使p42MAPK表达下调,与阴性对照组相比分别降低2．5倍和3．2倍。电镜观察证实,siRNA-1和siRNA-2 转染组部分细胞丧失表面微绒毛,细胞内空泡增加,细胞核染色质边集。处理组HeLa细胞早期凋亡率显著增加,其中 siRNA-1组晚期凋亡率也明显增加。结论 siRNA介导的MAPK p42沉默可以诱导HeLa细胞凋亡。
- 黄辰刘利英宋土生倪磊宋丽萍司履生
- 关键词：SIRNAHELA细胞细胞凋亡
- 使用RNAi技术抑制HeLa细胞p42^(MAPK)表达被引量：3
- 2006年
- 目的筛选可抑制HeLa细胞p42MAPK表达的siRNA。方法采用体外转录合成的方法,合成针对p42MAPK的siRNA3条和阴性对照siRNA1条,并进行Cy-3荧光标记,用脂质体转染HeLa细胞,以判断转染效果。应用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测siRNA的作用效果,筛选具有功能的siRNA序列;应用Westernblot方法鉴定siRNA抑制p42MAPK表达的效果。结果从3条p42MAPKsiRNA中筛选出2条有效的序列siRNA-2和siRNA-3,与空白对照组、脂质体对照组和随机siRNA-4相比,两者均可诱导HeLa细胞p42MAPK表达下调,Westernblot结果分析显示,与随机siRNA-4相比分别下调了1/2和2/3,并抑制HeLa细胞的增殖(P<0·05),同时改变了细胞周期各时相的细胞MAPK分布。结论p42MAPKsiRNA-2和siRNA-3在体外实验中可沉默目的基因以及抑制HeLa细胞增殖。
- 黄辰刘利英宋土生倪磊宋丽萍胡劲松赵小鸽司履生
- 关键词：HELA细胞肿瘤
