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江苏省高校自然科学研究项目(08KJB310011)

作品数:7 被引量:14H指数:2
相关作者:杨吉成盛伟华汪小华缪竞诚韩亚丽更多>>
相关机构:苏州大学第二军医大学更多>>
发文基金:江苏省高校自然科学研究项目国家大学生创新性实验计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 5篇基因
  • 4篇细胞
  • 4篇腺病
  • 4篇腺病毒
  • 3篇凋亡
  • 3篇IL-24
  • 2篇人脑
  • 2篇人脑胶质瘤
  • 2篇肿瘤
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇细胞生长
  • 2篇脑胶质瘤
  • 2篇基因治疗
  • 2篇胶质
  • 2篇胶质瘤
  • 2篇肝癌
  • 2篇癌细胞
  • 1篇端粒
  • 1篇端粒酶
  • 1篇端粒酶逆转录...

机构

  • 7篇苏州大学
  • 2篇第二军医大学

作者

  • 7篇汪小华
  • 7篇盛伟华
  • 7篇杨吉成
  • 6篇缪竞诚
  • 3篇韩亚丽
  • 3篇单云波
  • 2篇韩国胜
  • 2篇曹婧媛
  • 2篇井莹莹
  • 2篇焦玉娟
  • 2篇覃岳香
  • 2篇包婉蓉
  • 2篇王金志
  • 2篇刘建民
  • 1篇岳志健
  • 1篇胡小吾
  • 1篇刘铁连
  • 1篇陈竹
  • 1篇李正祎
  • 1篇杨苾雯

传媒

  • 2篇生物工程学报
  • 2篇苏州大学学报...
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇肿瘤防治研究
  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2011
  • 4篇2010
  • 2篇2009
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
Ad-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑癌效应的体内外实验被引量:3
2009年
本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;半定量RT-PCR法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞中的bcl-2、bax、caspase-3相关基因表达的影响。用Ad-IL-24重组腺病毒在MG-63骨肉瘤荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重。并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果表明Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞后,能明显抑制MG-63细胞增殖,并能通过上调细胞中bax、caspase-3和下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡,呈现出典型细胞凋亡形态学变化。Ad-IL-24重组腺病毒瘤内注射MG-63裸鼠荷瘤骨肉瘤移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52%,免疫组化结果显示Ad-IL-24重组腺病毒能明显上调与细胞凋亡相关因子Bax和Caspase-3的表达和下调Bcl-2和CD34的表达。本研究结果显示腺病毒介导的IL-24基因在体内外均可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导其凋亡,其机制可能与下调bcl-2,上调bax、caspase-3的基因表达水平有关,由此为骨肉瘤的基因治疗提供实验依据。
韩亚丽缪竞诚盛伟华汪小华井莹莹单云波刘铁连包婉蓉杨吉成
关键词:IL-24基因腺病毒载体肿瘤抑制
Ad-IL-24对SGC-7901胃癌细胞生长抑制的体外实验被引量:9
2009年
旨在研究携带人IL-24基因的腺病毒表达载体(Ad-IL-24)对SGC-7901人胃癌细胞的生长抑制作用并分析其分子机制。以不同MOI(感染复数)的Ad空载体腺病毒感染SGC-7901人胃癌细胞,筛选出最佳感染剂量;Ad-IL-24以最佳感染剂量感染SGC-7901胃癌细胞,RT-PCR法和Western blotting法检测腺病毒介导的IL-24基因在SGC-7901胃癌细胞中的转录;MTT法检测Ad-IL-24对SGC-7901胃癌细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测其诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡和细胞周期改变的效应,Hoechst33258染色荧光显微镜检测其诱导胃癌细胞凋亡的核形态改变;RT-PCR半定量法进一步检测SGC-7901胃癌细胞中凋亡相关基因的转录。结果显示,100MOI为感染SGC-7901胃癌细胞的腺病毒最佳感染剂量;Ad-IL-24能成功介导IL-24基因在SGC-7901胃癌细胞中转录性表达;Ad-IL-24感染SGC-7901胃癌细胞后,能明显抑制胃癌细胞生长和诱导凋亡;Ad-IL-24能显著上调SGC-7901胃癌细胞中bax、caspase-3和p53的表达和下调bcl-2的表达。因此,腺病毒介导的IL-24表达具有明显抑制SGC-7901人胃癌细胞生长和诱导凋亡的抗肿瘤效应,其机制可能与上调bax/bcl-2、caspase-3和p53密切相关。
包婉蓉缪竞诚盛伟华单云波李正祎汪小华井莹莹韩亚丽杨吉成
关键词:腺病毒胃癌肿瘤基因治疗抗肿瘤效应
人端粒酶逆转录酶启动子介导的E1A和IL-24表达及其对肝癌细胞生长的抑制作用被引量:2
2011年
目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子介导的E1A和IL-24双基因靶向腺病毒载体,获得Ad-h-E1A-IL-24靶向重组病毒子,并探索其体外抑瘤作用。方法运用PCR扩增MCF-7乳腺癌细胞的DNA,XbaⅠ和HindⅢ酶切获得280 bp hTERT启动子,插入空载体构建成pTrack-hTERT;运用PCR及HindⅢ和XhoⅠ酶切获得E1A,与pTrack-hTERT构成pAdTrack-hTERT-E1A;运用PCR及NotⅠ和SalⅠ酶切获得IL-24,插入pTrack-PP-IRES;XbaⅠ和XhoⅠ酶切获得hTERT-E1A,与pTrack-PP-IL-24-IRES形成pTrack-hTERT-E1A-PP-IL-24-IRES,同源重组、包装和扩增获得Ad-h-E1A-IL-24重组靶向病毒子。用25 MOI重组靶向腺病毒感染SMMC-7721肝癌细胞,MTT法测定Ad-h-E1A-IL-24的细胞生长抑制作用。结果成功构建pTrack-hTERT-E1A-PP-IL-24-IRES,并获得Ad-h-E1A-IL-24重组病毒子。与非靶向双基因比较,Ad-h-E1A-IL-24组可明显抑制肿瘤细胞生长(P<0.05或0.01)。结论Ad-h-E1A-IL-24靶向腺病毒载体的体外抑瘤作用优于非靶向双基因载体。
汪小华缪竞诚谢宇锋盛伟华韩亚丽杨吉成
关键词:人端粒酶逆转录酶启动子SMMC-7721肝癌细胞
Ad—IL-24诱导U87-MG人脑胶质瘤细胞凋亡的研究
2010年
脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,约占所有脑肿瘤的50%,目前多采用手术、放疗及化疗等常规疗法,但大部分患者预后不佳。我们利用已构建的腺病毒介导白细胞介素-24(IL-24)基因表达载体(Ad-IL-24),观察其对U87-MG人脑胶质瘤细胞的生长抑制和凋亡作用,并探讨其分子机制。
韩国胜刘建民盛伟华汪小华单云波杨吉成
关键词:人脑胶质瘤细胞瘤细胞凋亡IL-24AD基因表达载体
裂瘤型腺病毒Ad-E1A对小鼠腹水型肝癌的基因治疗及免疫功能影响被引量:1
2010年
目的研究裂瘤型腺病毒Ad-E1A对BALB/c小鼠腹水型肝癌的基因治疗效果,并检测其对免疫功能的影响。方法将Ad-E1A进行多轮扩增获得高效价病毒子,采用RT-PCR法鉴定E1A基因在小鼠肝癌H22细胞内的转录。将BALB/c小鼠分为非致瘤组(正常组)和皮下注射H22细胞转移瘤的致瘤组,其中致瘤组又分为PBS组、Ad-E1A组、5-Fu组进行抗肿瘤试验,检测各组的抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞总数等。结果获得了达7×109pfu/ml的高滴度Ad-E1A。致瘤组的抗肿瘤试验中,Ad-E1A组与5-Fu组的抑瘤率分别为66.7%和68.8%,二者差异无统计学意义(P>0.05);Ad-E1A组和PBS组间的胸腺指数和脾脏指数变化无统计学意义,而5-Fu组显著降低(P<0.01和P<0.05);同时Ad-E1A组和PBS组间的白细胞总数变化不大,但5-Fu组显著降低(P<0.01),其中中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞均明显降低(P<0.05)。结论 Ad-E1A可以抑制小鼠腹水型肝癌的生长,且对小鼠的免疫功能未见明显毒副作用。
曹婧媛杨苾雯覃岳香焦玉娟汪小华王金志盛伟华杨吉成缪竞诚
关键词:小鼠腹水型肝癌基因治疗免疫功能
三种癌细胞对Ad-E1A的敏感程度研究
2010年
目的研究腺病毒介导的E1A基因(Ad-E1A)体外对Hep-2人喉癌细胞、A375人黑色素瘤细胞、SMMC-7721人肝癌细胞的生长抑制作用及敏感程度。方法 RT-PCR鉴定E1A基因的转录;MTT法检测细胞的生长抑制作用;Hoechst染色法检测细胞核形态改变;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡。结果 Ad-E1A在三种癌细胞内均有效表达,在其感染72h和96h后对Hep-2、A375、SMMC-7721细胞的生长抑制率达分别为18.65%和29.95%;33.02%和45.36%;36.32%和54.11%;其中对SMMC-7721细胞的作用最强,FCM检测发现其凋亡率为36.92%。Hoechst染色表明Ad-E1A诱导肿瘤细胞凋亡,使其呈现典型的核固缩、断裂并出现凋亡小体等核形态改变。结论 Ad-E1A对Hep-2、A375、SMMC-7721三种癌细胞均有生长抑制作用,尤以对SMMC-7721细胞作用最强、A375细胞次之,Hep-2细胞的敏感性相对较低;此外,Ad-E1A还能诱导肿瘤细胞凋亡。
曹婧媛覃岳香焦玉娟陈竹王金志盛伟华汪小华杨吉成缪竞诚
关键词:癌细胞细胞凋亡
腺病毒介导IL-24基因诱导人脑胶质瘤U87MG细胞的凋亡被引量:1
2010年
目的:研究腺病毒介导IL-24基因表达载体(Ad-IL-24)对人脑胶质瘤U87MG细胞的抑制作用,初步探讨其作用机制。方法:将本科室构建的Ad-IL-24感染U87MG细胞,RT-PCR法检测IL-24基因的表达,MTT法和流式细胞术检测U87MG细胞的生长和凋亡,激光共聚焦显微镜观察U87MG细胞凋亡的形态学变化,RT-PCR法检测Bax、Bcl-2基因mRNA的表达,Western blotting检测caspase-3的活化。结果:Ad-IL-24感染U87MG细胞后,IL-24在U87MG细胞中有明显表达,并抑制U87MG细胞生长、诱导其凋亡、出现典型的凋亡细胞核形态学改变。Ad-IL-24可上调U87MG细胞中Bax基因、下调Bcl-2基因的表达,并诱导caspase-3蛋白的活化。结论:Ad-IL-24可诱导U87MG细胞凋亡,其机制可能与上调Bax基因、下调Bcl-2基因表达,并活化caspase-3有关。
韩国胜刘建民岳志健胡小吾盛伟华缪竞诚汪小华杨吉成
关键词:腺病毒人脑胶质瘤凋亡
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